一、猪的采精与人工授精技术(论文文献综述)
王聚雷[1](2021)在《猪的人工授精技术》文中进行了进一步梳理随着养殖业的发展,猪的人工授精技术应用越来越普遍,本文详细阐述了猪的人工授精技术,通过猪人工授精所需设备和物品、采精前准备、种公猪的采精、猪精液品质检查、精液稀释方法、精液分装与保存、母猪适时输精7个方面指导专业技术人员掌握此项技术,以提高广大养殖户的养殖收益。
石武[2](2020)在《壳聚糖、庆大霉素和维生素C对猪精液常温保存效果的研究》文中研究表明随着猪人工授精技术在生猪养殖业中的广泛应用,精液保存技术迅速发展。由于猪精子结构的特殊性,目前猪精液常温保存是人工授精最常用的保存方法。众所周知,细菌污染和氧化应激是精液常温保存所面临的两大重要障碍。目前的研究表明,在稀释液中加入适当的抗氧化剂可以有效防止精子的氧化损伤,从而提高常温保存的精液品质。然而随着抗生素的禁用,新的抗生素代替策略逐渐成为了研究热点。壳聚糖具有改善动物生长性能、增强机体免疫力、调节脂肪代谢、抗菌抑菌和抗氧化等多种生物学功能,被认为是具有广泛开发前景的绿色添加剂,但壳聚糖在精液保存方面的研究较少。因此,为了提高猪精液常温保存的效果,本研究结合前期研究基础,在猪精液常温保存稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖,检测保存1~6 d的精子活力、质膜完整性、顶体完整性等,与0.25 g/L庆大霉素和0.068 g/L维生素C进行比较,并进行16S r DNA测序分析,研究壳聚糖的抗氧化性能与抗菌性能,以期对壳聚糖作为猪精液常温保存抗氧化剂的应用提供理论依据。本研究获得的主要结果如下:1.在猪精液常温保存稀释液中分别加入0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068g/L维生素C,常温保存6 d后,三组精液的保存质量显着高于对照组(P<0.05),其中稀释液中添加庆大霉素组的保存质量显着高于其他组(P<0.05),壳聚糖组的保存质量显着高于维生素C组(P<0.05)。稀释液中添加壳聚糖保存6 d的精子活力、质膜完整率和顶体完整率分别为61.67%、68.67%、72.67%,仅次于庆大霉素组,但均显着高于对照组(P<0.05)。同时,对照组精子凋亡细胞占比最高,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖组和0.068 g/L的维生素C组的精子凋亡细胞占比仅次于对照组,而添加0.25g/L庆大霉素组的精子凋亡细胞占比最低。因此,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖可达到庆大霉素等传统添加剂的效果,精子有效保存时间可达到6 d。2.在猪精液常温保存稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068 g/L维生素C,对常温保存6 d后精子的相关抗氧化酶及凋亡情况进行检测发现,稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖和维生素C组精子的T-AOC活性、GSH活性、SOD活性和CAT活性显着高于庆大霉素组和对照组(P<0.05),而MDA含量和ROS水平显着低于庆大霉素组和对照组(P<0.05)。虽然稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖组和维生素C组之间差异不显着(P>0.05),但0.1 g/L壳聚糖组的精子T-AOC活性、GSH活性、SOD活性和CAT活性高于维生素C组,MDA含量和ROS水平低于维生素C组,稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖组的保存效果显着优于对照组和庆大霉素组(P<0.05)。因此,在稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖组的保存效果最佳,显着提升了精子的抗氧化性能。3.本研究分别从门、目、属三个水平上的微生物组成的变化来分析精液中微生物的种类及分布情况,发现精液中在门水平上占据主导地位的细菌主要包括变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes);在纲水平上占据主导地位的细菌主要包括γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)、梭菌纲(Clostridia)和α-变形菌纲(Gammaproteobacteria);在目水平上的优势菌种为肠杆菌目(Enterobacteriales)、假单胞菌目(Pseudomonadales)和梭菌目(Clostridiales),其中最为优势的是肠杆菌目,占总变形菌门的60%~80%。本研究结果表明稀释液中添加壳聚糖组和庆大霉素组精液中变形菌门(Proteobacteria)、肠杆菌目(Enterobacteriales)、假单胞菌目(Pseudomonadales)和沙雷氏菌属(Serratia)等的丰度显着低于其他组(P<0.05)。精液保存5 d后,16S r DNA测序结果表示稀释液中添加0.25 g/L庆大霉素和0.1 g/L壳聚糖相对于对照组来说变形菌门的含量显着下降(P<0.05),其中肠杆菌目和假单胞杆菌目的含量也相应下降,但有部分菌属的含量也有所上升,表明壳聚糖有类似庆大霉素的抗菌作用,且只对部分菌属有抑制作用。因此,本研究结果表明在猪精液常温保存稀释液中添加0.1 g/L壳聚糖能够显着提高精子常温保存后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率、T-AOC、SOD、GSH和CAT活性,并显着降低MDA含量和ROS水平,且抗菌效果达到庆大霉素等传统抗生素的效果,表明在一定程度上可替代抗生素的使用,壳聚糖既具有抗氧化性能,又具有一定的抑菌性能,对于猪精液常温保存的研究具有重要意义。
段元彬[3](2020)在《番鸭精液液态保存研究》文中研究表明番鸭精液密度高,人工受精前,往往需要对采集精液以不同稀释液进行一定比例的稀释,以提高精液利用率,充分发挥番鸭种公鸭繁殖潜力。本研究通过配制不同稀释液对精液以不同比例稀释,分别在常温和低温下恒温保存,同时,进行人工授精试验,筛选番鸭精液常、低温保存的最佳稀释液和稀释比例以及适合人工授精的最佳稀释液。本研究共包括四点:本试验旨在筛选番鸭精液常温保存(15-25℃)的最佳稀释液,稀释比例和保存温度。试验以NO-1,NO-2,BJJX和生理盐水4种稀释液分别以精液-稀释液v/v 2:1,1:1,1:2比例分别稀释,并分别在15℃、17℃、20℃、25℃恒温保存。从0 h起每隔8 h检测精液精子活率、精子畸形率和质膜完整率。结果显示:NO-1为常温保存最佳稀释液;25℃精液保存质量和保存时间明显低于15~20℃;精液以1:1比例保存精液质量优于1:2和2:1。本试验旨在确定适合番鸭精液4℃保存的稀释比例和稀释液。试验以NO-1,NO-2,BJJX和生理盐水4种稀释液以精液-稀释液体积比2:1,1:1,1:2比例分别稀释,并在冰箱4℃恒温保存。每隔8 h检测精液保存质量。试验结果显示:NO-1在1:1比例下表现为最优保存质量和最长保存时间(72±8.00 h)。以NO-1为基础液,添加不同含量的脱脂奶粉,确定番鸭精液4℃保存稀释液中脱脂奶粉最优含量。试验分别添加(0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 g)5个浓度的脱脂奶粉,每隔8 h检测精液质量。结果显示:0.08 g的脱脂奶粉能够极显着延长精子保存时间(117.33±4.62),明显降低畸形精子比例,提高精子活率和质膜完整率,表现为最优保存效果。本部分试验以NO-1,NO-2,BJJX和生理盐水4种稀释液以精液-稀释液1:1比例稀释后,并对1080羽黑羽母番鸭进行人工授精。试验显示:相比于生理盐水(65.35±1.01),试验组均能极显着提高受精率,NO-1组受精率最高(70.25±0.22),为番鸭精液人工授精的最优稀释液。综上所述,番鸭精液常低温保存质量受稀释液组分,稀释比例以及保存时间的显着影响;稀释液中添加脱脂奶粉能显着延长精液保存时间,最适添加量为0.08 g。
阿娜尔[4](2020)在《蒙古马精液冷冻保存的研究》文中指出蒙古马是世界上古老的品种,也是优秀的地方品种。通过冷冻精液人工授精技术可以加快蒙古马提纯复壮及提高本品种选育进程。由于农业机械化的推进及国内对马繁殖技术关注度的下降,目前还没有人对蒙古马精子的冷冻保存方法进行过系统的研究,仍未探索到一种成熟有效并可推广到生产实践中的冷冻保存技术程序。为了研究出在实际生产中能够推广应用的蒙古马精液冷冻保存方法,进一步完善蒙古马冷冻精液品质,本研究对蒙古马精液冷冻程序及冷冻保护液配方的进行了优化,同时,使用最优冷冻保护液配方和冷冻保护程序对蒙古马精液进行了冷冻,并开展了人工授精受胎率验证试验,其结果如下:(1)将蒙古马精子置于不同渗透压(30、50、100、200、240、300、360、420、480、550、600mOsm/kg)的盐水溶液中孵育后,测定其前进运动精子百分比(PM)和精子质膜完整率(MI)。结果显示,蒙古马精子渗透压耐受范围为200~400mOsm/kg,从此渗透压再回到等渗状态时,其活力是可以恢复的,而渗透压超出这一范围其活力恢复能力降低。2)比较了沉降离心法之不同离心力和离心时间(400 g,15 min;600 g,10 min;1000 g,7 min)和缓冲离心法(使用商品化离心垫)对蒙古马精液冻前冻后精液质量和精子损失率的影响,结果显示,600 g,10 min组离心方法获得的精液冷冻前后TM、PM、VAP、VSL、MI和精子损率均与使用离心垫进行离心的对照组无显着差异(P<0.05),该方法可代替商品化离心垫使用。(3)比较了不同平衡时间(0 min、100 min和120 min)、不同冷冻降温速率(液氮熏蒸高度2 cm、3 cm和4 cm)对蒙古马精液冷冻效果的影响,结果显示,蒙古马精液冷冻之前需进行一段时间的冷却平衡。获得可接受的解冻后质量最佳平衡时间是应将蒙古马精子冷却至4℃并平衡100 min。距离液氮面高度3 cm的熏蒸高度获得的冷冻效果与程序化冷冻仪相当。(4)以INRA82+2%卵黄基础液,添加4种不同浓度甘油(2%、3%、4%和5%)和二甲基甲酰胺(4%、5%、6%和7%)作为冷冻保护剂对蒙古马精液进行冷冻,分别测定了在4℃平衡100 min后的质量指标和冷冻-解冻后的质量指标。结果显示,冷冻-解冻后,3%gly、4%gly、5%gly和7%DMF组TM和PM均显着高于其他组(P<0.05);添加2%gly组、3%gly组和7%DMF组MI显着高于其他组(P<0.05)。综合考虑TM和MI,蒙古马精液冷冻保护液中适宜甘油比例为3.0%。(5)比较了 8种不同冷冻保护液:INRA82基础液+5种不同浓度低密度脂蛋白(LDL,0.5%、1%、2%、3%和 5%),INRA82 基础液+2%卵黄,INRA82 基础液+2%离心卵黄和INRAFreeze商品稀释液对蒙古马精液冷冻效果的影响。以上冷冻保护液均添加了 3%甘油。结果显示,在冷冻-解冻后,2%LDL、2%卵黄和INRAFreeze组TM、PM、VAP、VSL、VCL、MI和AI均显着高于其他组(P<0.05)。表明,2%的LDL和2%的卵黄对蒙古马精子可能具有低温保护作用,2%的卵黄提取步骤简单,更容易获得。(6)在脱脂奶基础液上,选择4种不同浓度的葡萄糖(0、67、125和147 mM)与270mM乳糖、50mM棉子糖组合,制备成精子低温保存稀释液,比较了其对蒙古马精液冷藏保存的效果。结果显示,125 mM葡萄糖+270 mM乳糖对蒙古马精液低温保存质量有显着提高作用。(7)以INRA82作为基础稀释液,分别添加谷胱甘肽(0、5、7、10和20mg/mL)、海藻糖(0、25、35和50 mg/mL)和联合添加谷胱甘肽+海藻糖(0+0、5+35、5+50、7+35和7+50mg/mL)制备成含有不同氧化剂的冷冻保护液,将浓缩处理后的马精子分别置于上述稀释液中稀释、冷冻和解冻,利用精子常规品质检测方法和酶联免疫分析法,检测精子常规品质和抗氧化相关指标。结果显示:1)5 mg/mL谷胱甘肽对精子TM、PM和MI均有提高,可降低精液中MDA含量,添加谷胱甘肽可显着提高CAT和GSH-PX活性(P<0.05);35和50mg/mL海藻糖可提高TM、PM、AI和MI,且35 mg/mL海藻糖可显着降低MDA含量(P<0.05);2)联合添加5mg/mL谷胱甘肽+35 mg/mL海藻糖可显着提升马精液的TM、PM、AI和MI(P<0.05),还可显着降低MDA含量(P<0.05),提高SOD活性和GSH-PX活性。综上,联合添加5 mg/mL谷胱甘肽+35 mg/mL海藻糖一定程度上可通过改变酶活性,对精子氧化应激产生保护作用,提高了马冷冻-解冻后精液质量。(8)在以上研究基础上,筛选出一套自配冷冻保护液配方和简便冷冻程序,将自配冷冻保护液组、INRAFrezee组、鲜精INRA96稀释组处理的精液用于30匹母马共60个排卵周期进行人工授精,通过妊娠检查,进行受胎率统计。结果表明,鲜精人工授精受胎率为70%,INRAFreeze冻精人工授精受胎率为50%;自配冷冻保护液冻精人工授精受胎率为50%。综上所述,经过筛选的自配蒙古马精液冷冻保护液成本低廉、制备步骤少、简单易操作,制备条件温和易控制,冻后活力在35%以上,情期受胎率达到了 50%,能够满足生产需要。
黄溢[5](2020)在《青紫蓝獭兔精液保存的研究》文中进行了进一步梳理家畜人工授精技术是畜牧业高效生产的重要一环,其中精液的冷冻保存对于该技术的广泛推广应用至关重要。在獭兔养殖业中,青紫蓝獭兔的精液冷冻保存研究目前未见报道。为获得青紫蓝獭兔精液最有效的保存条件及方法,以期提高该品种公兔的利用率和母兔的繁殖性能,进而为降低生产成本提供技术支撑,本试验研究了不同保存方法(不同稀释液、PH值和温度)对精子质量和人工授精后代的影响。本试验在常温(17℃)、低温(4℃)、冷冻(-196℃)3种条件下分别用0.9%生理盐水稀释液Ⅰ、葡萄糖-柠檬酸钠-EDTA稀释液Ⅱ、葡萄糖-柠檬酸钠稀释液Ⅲ和葡萄糖-柠檬酸-Tris-DMSO稀释液Ⅳ对青紫蓝獭兔精液进行保存探究及在常温下6种不同pH值的稀释液对精液的保存研究,结果表明:在常温保存下,以Ⅳ(Tris、葡萄糖、柠檬酸等)为基础液,在pH为6.3至6.7范围中,最适pH值为6.5,该组合下优于其它三种稀释液的保存效果;在保存48h时,稀释液Ⅳ-1组精子活力(63.33%)极显着高于其它稀释液(P<0.01);在保存60h时,pH值为6.5组精子活力(65.01%)显着高于其它组(P<0.05)。在低温保存下,以Ⅳ-2(Tris、葡萄糖、柠檬酸等)为基础液,pH值为6.5时的稀释液,优于其他三种稀释液的保存效果;保存72h时,稀释液Ⅳ-2的精子活力(48.42%)、质膜完整率(21.03%)及顶体完整率(87.58%)均极显着高于Ⅱ-2、Ⅲ-2(P<0.01)。在冷冻保存下,以稀释液Ⅳ(Tris、葡萄糖、柠檬酸等)为基础液(pH值为6.5)的冻存液组合进行精液的保存后,解冻后精子活力(30.64%)、顶体完整率(38.29%)均极显着高于其它稀释液组(P<0.01)。在人工授精试验中,以稀释液Ⅳ(Tris、葡萄糖、柠檬酸等)为基础配方,分别用3种方法保存精液,48h后进行人工授精,并分别与新鲜精液进行比较,平均窝产活仔数以常温保存精液效果最佳(7.12只)(P>0.05),其次是低温保存精液(7.10只)(P>0.05)、冷冻保存精液(6.75只)(P<0.01)。
朱振东[6](2020)在《猪精子能量代谢的调控机理研究》文中进行了进一步梳理随着养猪业的规模化、专业化、集约化管理程度增加,人工授精技术的推广应用越来越广泛。猪人工授精技术对于提高生猪生产、促进优良种公猪利用率及加快遗传育种改良进程具有重要意义。猪人工授精技术使用的精液为15~17oC条件下保存的液态稀释精液。液态稀释精液的保存效果是制约猪人工授精技术发展的重要因素之一。精子运动的维持依赖于自身的能量供应。糖酵解和氧化磷酸化途径是体细胞广泛存在的重要能量代谢途径。细胞对能量代谢途径的选择取决于其微环境的能量代谢底物类型。精子在精浆和子宫液中做直线运动及在输卵管液中做超活化运动,即精子的代谢参与精子运动的调控。但是精子代谢对精子运动的调节作用及机制尚不清楚。通过探究精子代谢而改良稀释液成份对建立高效的猪精液保存稀释液配方具有重要意义。因此,本研究从精子代谢入手,探究精子氧化磷酸化途径及其相关作用因子在维持精子直线运动中的调控机制。本研究首先利用低糖模型探究糖酵解和氧化磷酸化供能方式对精子运动的影响,并检测精子运动轨迹变化及线粒体的转录翻译。其次,通过低糖稀释液模型及精子线粒体功能分析探究氧化磷酸化副产物活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子运动的损伤机制。此外,通过检测精子的谷胱甘肽合成及磷酸戊糖途径探究精子自身如何维持精子线粒体氧化磷酸化的运转。本研究主要取得如下结果:(1)精子在高糖液稀释液中做圆圈运动或类圆圈运动;降低稀释液中的葡萄糖含量促进猪精子直线运动。低糖稀释液通过激活精子线粒体活性、进而促进线粒体合成ATP(adenosine triphosphate)。精子直线运动的能量来源主要依靠线粒体合成的ATP。(2)猪精子在低糖稀释液的体外孵育过程中,精子存在线粒体基因的转录与翻译。线粒体翻译抑制剂处理结果揭示精子线粒体的转录与翻译参与了精子运动的调控。精子线粒体转录翻译主要通过影响线粒体功能,进而影响线粒体ATP的合成而调控精子的运动。(3)低糖稀释液在促进精子线粒体氧化磷酸化供能的同时也产生大量的副产物ROS,过量的ROS会氧化损伤精子的功能、降低精子的直线运动能力。(4)ROS主要氧化损伤精子线粒体蛋白转录系统及线粒体ATP合成系统。研究发现,随着胞内ROS含量的增加,精子线粒体呼吸链蛋白MT-ND1(NADPH dehydrogenase subunits 1)、MT-ND6(NADPH dehydrogenase subunits 6)和线粒体转录因子POLRMT(mitochondrial RNA polymerase)、TFAM(mitochondrial transcription factor-A)的4-HNE(4-hydroxynonenal)修饰增加,即MT-ND1、MT-ND6、POLRMT和TFAM的氧化损伤增加。并且,精子线粒体DNA也受到ROS的攻击而被氧化损伤。(5)在低糖稀释液中外源添加线粒体靶向抗氧化剂PQQ(pyrroloquinoline quinone)和Co Q10(coenzyme Q10)可以维持精子的直线运动,但是当线粒体翻译被抑制的情况下,添加这两种抗氧化剂均不能挽救精子的运动,说明PQQ和Co Q10不能有效减缓ROS对呼吸链上的蛋白MT-ND1和MT-ND6的氧化损伤。这主要是由于呼吸链上的蛋白更近于ROS产生的位点。PQQ和Co Q10主要通过保护线粒体的转录系统(POLRMT和TFAM)而维持线粒体的转录与翻译,进而为呼吸链上的来源于线粒体转录翻译蛋白(如MT-ND1和MT-ND6等)的周转提供新蛋白,维持线粒体ATP的合成,提高精子的直线运动。(6)猪精浆中存在合成谷胱甘肽(glutathione,GSH)的氨基酸底物,其中蛋氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸含量较高,半胱氨酸含量较低。在低糖稀释液中添加蛋氨酸、甘氨酸、谷氨酸及丝氨酸可以促进精子合成GSH,并缓解精子的氧化损伤而维持精子的直线运动。猪精子存在利用蛋氨酸合成GSH的途径,精子存在由蛋氨酸合成GSH途径所涉及的蛋白酶CBS(cystathionine beta synthase)、CTH(cystathionase)、GCLC(glutamate-cysteine ligase)和GSS(glutathione synthetase);并且蛋白酶CBS和CTH含量随着精子氧化应激程度的增加而增加,GCLC和GSS蛋白酶含量则未发生显着变化。说明氧化应激可以诱导精子合成CBS和CTH蛋白酶,进而利用蛋氨酸合成GSH而减缓ROS诱导的氧化损伤。(7)氧化应激激活精子的ERK1/2-e IF4E-RSK信号通路。随着精子胞内ROS含量的增加,精子内的p-ERK1/2、p-RSK、p-e IF4E水平增加,这也揭示了精子可以通过自身氧化还原平衡系统减少ROS的氧化损伤。(8)精子的磷酸戊糖途径(pentose phosphate pathway,PPP)参与精子的直线运动调控。无糖稀释液不能持久维持精子的直线运动,而20%葡萄糖稀释液中则可以持久维持精子直线运动。低糖稀释液中的葡萄糖进入合成NADPH的PPP途径,未进入糖酵解供能途径。精子衣康酸修饰是调节其葡萄糖代谢重编程的关键因子。低糖稀释液可以促进三羧酸循环产生中间代谢产物衣康酸,衣康酸对精子糖酵解途径的ALDOA(aldolase A)酶进行修饰,使其失活,进而降低精子的糖酵解途径,使葡萄糖进入PPP途径,参与NADPH的合成,进而参与自身氧化还原稳态的调控。综上所述,本研究探究了精子代谢对直线运动的调控作用。发现精子直线运动主要受线粒体氧化磷酸化供能调控;氧化磷酸化副产物ROS主要氧化损伤精子线粒体转录翻译系统和能量合成系统;精子自身通过调节谷胱甘肽合成和磷酸戊糖途径而调节其胞内氧化还原平衡稳态,进而维持精子的高速直线运动。本研究发现为高效猪精液保存稀释液的研发提供理论依据,并为高效猪人工授精技术体系的建立奠定基础。
黄剑锋[7](2019)在《人工授精技术提高乌金猪繁殖性能的试验报告》文中认为为了有效提高良种利用率,降低生产成本,促进凉山地区乌金猪品种改良,笔者在试验猪场开展了人工授精技术提高乌金猪繁殖性能的试验。试验结果表明,人工授精技术可以提高母猪情期受胎率和窝产仔数,其中初配母猪和经产母猪的情期受胎率分别比本交提高4.67、8.26个百分点,窝均产活仔数分别比本交提高0.46、0.38头。
张志鹏[8](2019)在《马胚胎移植及克隆胚体外构建技术》文中研究说明我国是世界马业大国,但并非马业强国。马存栏量虽大,却在现代马术的国际竞技场上未见身影。现代马术用马的匮乏,成为我国马产业发展的重要制约因素。胚胎移植技术已成熟应用于牛、羊等家畜的繁育生产,但马胚胎移植的各环节技术尚不完全成熟,相关研究与应用与马产业的发展不相适应。因此,本研究针对我国马业发展的技术需求,开展其发情鉴定、人工授精、非手术法胚胎采集和胚胎移植等马胚胎移植关键生物技术的研究。在此基础上,开展了卵巢的运输、卵母细胞采集、卵母细胞体外成熟、体细胞系的建立、细胞融合、体细胞核移植等马克隆胚胎体外构建技术的研究,其研究结果如下:1、母马发情的准确鉴别。摸索了 3种发情方法,发现B超检查法鉴定母马发情的成功率达到100%,显着高于外部观察法(47.3%)和直肠触摸法(85%),P<0.05。2、母马发情的有效诱导。建立了母马发情和同期发情的有效诱导方法,母马排卵第5 d,肌肉注射0.2 mg PGF2α后的发情率为63.2%,高于肌肉注射1500 IU PMSG和自然发情的比例(47.2%、0),P<0.05。有效的诱导6个品种马的发情,发情周期显着缩短,分别为 11.7±3.1、12.2±2.8、11.5±1.9、12.8±2.1、11.8±2.5 和 12.7±2.3 d。注射0.2 mg黄体酮和PGF2α方法母马的同期发情率为76.4±2.6%,显着高于单纯注射黄体酮组的62.8±2.1%和对照组的16.7± 1.2%,P<0.05。3、母马排卵的有效调控。建立了母马排卵的有效调控方法,关键在卵泡发育、激素类型和剂量的选择。当卵泡直径≥30 mm,静脉注射1500 IU hCG,48 h内的排卵比例为84.3%,显着高于FSH+LH组(31.6%)和对照组(15.8%)(P<0.05),6 个品种马分别在 41.2±2.3、43.9±2.7、42.3±1.6、39.7±3.1、40.9±2.9 和 39.8±2.4 h 时排卵。发现左侧卵巢的排卵率比右侧的高,59.5%排卵发生在左侧,高于右侧的40.5%(P<0.05)。4、马精液的保存与授精。建立了马精液的常温、低温和超低温保存的方法,常温(22℃)保存20 min,HN-SD(本实验室制备)和INRA96(IMV商品)组的精子活率分别为65.6±2.3%和68.6±1.2%,显着高于脱脂牛奶组的53.5±3.2%(P<0.05)。低温(0~4℃)保存24 h,HN-SD和INRA96组的精子活率分别是65.5±2.3%和67.7±2.1%,高于脱脂牛奶组的49.5±3.4%(P<0.05)。液氮(-196℃)保存精液1d后,INRA96组的精子活率为44.3±2.2%,HN-SD组为36.2±2.3%,高于脱脂牛奶组的21.3±1.8%(P<0.05)。摸索出了最适的输精部位,发现输精的不同部位对母马受胎率的影响不同,子宫角输精的母马情期受胎率为85.4%,显着高于子宫输精(78.4%)和自然交配(25%)(P<0.05)。保鲜精液的情期受胎率为61.1%,低于鲜精的84%,但高于冷冻精液的40%(P<0.05)。5、马胚胎的非手术法采集。建立了马胚胎的非手术采集方法,选取乳酸钠林格注射液作为冲胚液,在马受孕后5~8 d进行冲胚,采集的时间是关键环节。本研究胚胎采集成功率为72.8%。不同时间采集胚胎的成功率不同,5月份的胚胎采集成功率最高,为88.9%,10月份成功率最低,为42.9%。桑椹胚采集成功率为70.6%。6、马胚胎的非手术法移植。建立了马胚胎的非手术移植方法,选择排卵后4~7 d的受体马,选取IMV胚胎保存液进行子宫体移植。试验组HN-EHM和IMV胚胎保存液的胚胎移植成功率分别为80%和83.3%,高于乳酸钠林格注射液试验组(75%)。胚胎低温保存24 h后,移植成功率为60%。桑椹胚移植成功率为90.9%。7、马卵巢的运输。本试验获得马卵巢体外运输过程中保存液的合适温度,夏季为33~37℃,冬季为30~35℃。8、马卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的采集。抽吸法+切割法的采集成功率最高,为73.3%,高于切割法(64.6%)和抽吸法(54.8%)的成功率(P<0.05)。发现繁殖季节的卵巢中大、中、小卵泡的比例分别是20.9%、51%和28.1%,非繁殖季节的比例分别是3.1%、51.9%和45%。9、马卵母细胞的体外成熟。摸索了马卵母细胞体外培养成熟的条件,5%CO2、37℃、饱和湿度培养,紧凑型(Cp)卵母细胞培养32~36 h,扩展型(Ex)培养24~28 h。结果发现不同类型的COC其成熟率不同,不同繁殖季节,卵母细胞的成熟率也不同。繁殖季节,马扩展型(Ex)的成熟率为58.6%,高于紧凑型(Cp)的成熟率36.5%(P<0.05),非繁殖季节,成熟率分别为29.1%和49.2%(P<0.05)。添加ActA能提高紧凑型(Cp)卵母细胞的成熟率,在繁殖、非繁殖季节卵母细胞成熟率分别达到 47.3%和 42.2%。10、马卵母细胞的孤雌激活。摸索了马卵母细胞孤雌激活的条件,本试验选取离子霉素进行孤雌激活,结果发现ActA促进马Cp型卵母细胞孤雌激活胚胎的发育,2-细胞(57.9%)、4-细胞(36.8%)的比例分别高于对照组(P<0.05)。不同的卵母细胞类型对卵母细胞孤雌激活后胚胎的发育没有影响。在马的繁殖季节,孤雌激活胚胎发育到2-细胞期、4-细胞、8-细胞和桑椹胚的比例分别是50%(42/80)、35.7%(30/84)、13.1%(11/84)和6%(5/84),高于非繁殖季节同时期的比例,(P<0.05)。在马的非繁殖季节,孤雌激活的胚胎与颗粒细胞共培养后,发育到2-细胞、4-细胞的比例分别为41.7%和25%,显着高于对照组的比例(P<0.05),获得1枚桑椹胚(2.8%)。11、马体细胞克隆胚的构建及体外培养。摸索了不同融合电压对重构胚胎融合率的影响,克隆胚胎置于38.5℃、5%C02、饱和湿度培养箱中培养,结果发现采用140 V,20μs,融合2次,重构胚胎融合成功率达到72%。马驹成纤维细胞的融合率、2-细胞,4-8细胞和桑椹胚的比例分别为77.4%、41.5%、33.9%和15.1%,高于成年马体细胞的相应比率(P<0.05)。用非手术法将构建好的8枚桑椹胚移植到受体马的子宫体中,没有获得克隆马。通过上述研究,本研究获得成熟的马胚胎移植技术体系,为实现规范化、商业化、市场化的繁殖现代马术用马提供的技术方案。在此基础上,研究体外诱导成熟的马卵母细胞构建克隆胚胎的技术,为我国突破马克隆技术奠定基础。
陈毅龙[9](2019)在《杜洛克公猪精液性状全基因组关联分析及遗传参数估计》文中研究表明猪人工授精技术已成为大型规模化猪场的主要配种手段,其在节约成本、加速遗传改良等方面发挥着重要作用。猪人工授精技术的应用关键因素之一在于公猪生产优质的精液。因此,对公猪精液性状遗传结构的研究,有利于全面了解精液性状的遗传特性,选育精液品质优良的公猪。本研究使用计算机辅助精子分析系统测定杜洛克公猪精液量、精子浓度、精子活力、精子畸形率和总精子数性状,首先对公猪精液性状进行了遗传参数估计,然后通过全基因组关联分析,寻找影响公猪精液性状的分子标记和重要候选基因,加深对杜洛克公猪精液性状遗传机理的理解。研究结果如下:(1)收集并整理了2022头杜洛克公猪共105201次采精记录,其中精液量、精子浓度、精子活力、精子畸形率、总精子数的平均数±标准差分别为162.51±63.53mL、4.71±2.20×108/mL、88.62±7.11%、11.96±8.36%、721.92±339.26×108。(2)利用2022头杜洛克公猪共105201次采精记录信息,采用多性状动物模型对精液性状进行遗传参数估计。结果发现,精液量、精子浓度、精子活力、精子畸形率和总精子数的遗传力和重复力分别为0.22、0.20、0.14、0.25、0.10和0.40、0.37、0.25、0.39、0.26。较低的遗传力表明虽然通过选择改良精液性状难度较高,但精液性状依然有通过选择进行遗传改良的空间。精液量和精子浓度以及精子活力和精子畸形率间遗传负相关程度较高,分别为-0.65和-0.69;精子浓度分别与精子活力(0.45)和总精子数(0.40)具有中等程度的正遗传相关,精液量与总精子数间的遗传相关为0.40,其余性状间的遗传相关程度较低。总精子数分别与精液量(0.47)和精子浓度(0.60)具有中等的表型正相关性,其余性状间的表型相关程度较低。(3)基于GeneSeek Porcine 50K SNP芯片获取个体的基因型信息,使用Beagle软件对缺失的基因型数据进行填充,在进行填充前和填充后分别使用Plink软件对基因型数据进行质控,最终有1440个个体和35813个SNPs用于后续分析。(4)利用FarmCPU算法,对1440头杜洛克公猪的精液量、精子浓度、精子活力、精子畸形率和总精子数共5个性状进行了全基因组关联分析。使用Bonferroni方法确定显着性阈值为1.40×10-6。累计发现了23个SNPs达到了显着性阈值水平,在1号染色体上发现了与精子活力和总精子数都显着关联的SNP位点ALGA0001958。(5)在显着SNPs上下游1Mb区域内搜索候选基因,根据已发表文献报道的结果,认为FGF10、PSPH1、MAP7、MTFR2、FKBP6、CNR1、UBE2J1、NME5、LHX9、GATA4、SPAG4和CNBD2共12个基因可作为重要候选基因。其中,在1号染色体显着关联的SNP位点ALGA0001958附近的MAP7基因可以认为是同时影响精子活力和总精子数的重要候选基因。本研究发现杜洛克公猪精液性状属于中低水平遗传力性状,并且各性状间存在不同水平的遗传相关,说明可以通过合理的选择方案对杜洛克公猪精液性状进行遗传改良。同时还发现了与精液性状显着关联的SNP位点以及影响精液性状的重要候选基因,为杜洛克公猪精液性状的遗传改良提供了新的分子标记,丰富了公猪精液性状的遗传研究内容。
新疆维吾尔自治区畜牧总站[10](2019)在《畜禽繁殖主推技术》文中研究表明1多胎羊两年三产技术1.1技术概述本技术标准依据新疆维吾尔自治区原畜牧厅相关文件多胎羊的含义进行了明确界定,对适宜引入品种、养殖环境、饲料、饲养管理与卫生防疫等方面提出了明确要求,并涉及到母羊舍和产羔舍建造技术参数、两年三产母羊营养调控、优势杂交组合、生产程序安排和多羔羊护理等配套技术。2014年9月通过自治区技术监督局审定,2014年9月26日发布、实施。
二、猪的采精与人工授精技术(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪的采精与人工授精技术(论文提纲范文)
(1)猪的人工授精技术(论文提纲范文)
一、猪人工授精所需设备和物品 |
1. 实验室所需设备和物品 |
2. 输精时所需物品 |
3. 猪人工授精台帐 |
二、采精前准备 |
1. 公猪的选择及准备 |
2. 稀释液配制 |
三、种公猪采精技术 |
1. 采精频率 |
2. 采精前准备 |
3. 采精方法 |
四、猪精液品质检查 |
1. 外观检查 |
2. 精子密度检测 |
3. 精子活力检测 |
五、精液稀释方法 |
1. 要求 |
2. 步骤 |
六、精液分装与保存 |
七、母猪适时输精 |
1. 挑选合适的试情公猪 |
2. 输精次数及时间 |
3. 输精前准备 |
4. 输精操作 |
5. 填写记录 |
(2)壳聚糖、庆大霉素和维生素C对猪精液常温保存效果的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 猪人工授精技术研究概况 |
1.2 猪精液常温保存技术研究概况 |
1.3 影响猪精液常温保存的环境因素 |
1.3.1 温度 |
1.3.2 pH |
1.3.3 渗透压 |
1.3.4 稀释倍数 |
1.3.5 微生物 |
1.4 猪精液常温保存稀释液成分 |
1.4.1 营养物质 |
1.4.2 缓冲物质 |
1.4.3 抗生素 |
1.4.4 抗氧化物质 |
1.4.5 壳聚糖的抗氧化及抑菌性能研究进展 |
1.5 猪精液品质评估常规指标 |
1.5.1 精子活力 |
1.5.2 精子密度 |
1.5.3 顶体完整性 |
1.5.4 质膜完整性 |
1.5.5 抗氧化能力 |
1.6 本研究的目的和意义 |
1.6.1 本研究的目的 |
1.6.2 本研究的意义 |
试验研究 |
第二章 壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液常温保存效果的比较分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 主要试剂 |
2.1.2 主要仪器设备 |
2.1.3 稀释液配制 |
2.1.4 试验动物与精液采集 |
2.1.5 精液处理与保存 |
2.1.6 精液质量检测 |
2.1.7 数据处理 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子活力的影响 |
2.2.2 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子质膜完整率的影响 |
2.2.3 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子顶体完整率的影响 |
2.2.4 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精子凋亡的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对猪精液常温保存抗氧化能力的影响 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 主要试剂 |
3.1.2 主要仪器设备 |
3.1.3 稀释液配制 |
3.1.4 试验动物与精液采集 |
3.1.5 精液处理与保存 |
3.1.6 测定指标 |
3.1.7 数据处理 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对常温保存猪精液中T-AOC活性的影响 |
3.2.2 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对常温保存猪精液中MDA含量的影响 |
3.2.3 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对常温保存猪精液中GSH、CAT和 SOD活性的影响 |
3.2.4 壳聚糖、庆大霉素及维生素C对对常温保存猪精液中ROS水平的影响 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第四章 壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液常温保存抗菌能力的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 主要试剂 |
4.1.2 稀释液配制 |
4.1.3 试验动物与精液采集 |
4.1.4 精液处理与保存 |
4.1.5 精液样品16SrDNA测序 |
4.1.6 数据处理 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 常温保存猪精液中微生物测序结果及OTU聚类 |
4.2.2 常温保存猪精液中微生物多样性分析 |
4.2.3 常温保存猪精液中微生物群落结构分析 |
4.2.4 处理组间微生物差异物种分析 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
结论与创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简历 |
(3)番鸭精液液态保存研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
文献综述 |
1.1 番鸭人工授精研究进展 |
1.1.1 种公鸭选育与调教 |
1.1.2 采精方法 |
1.1.3 精液质量检测 |
1.1.4 精液质量评价指标 |
1.1.5 输精方法 |
1.1.6 输精频率 |
1.1.7 输精时间 |
1.1.8 输精部位 |
1.2 精液保存研究 |
1.3 精液稀释液研究进展 |
1.3.1 精液稀释液主要成分 |
1.4 本研究的目的和意义 |
1.4.1 研究目的 |
1.4.2 研究意义 |
第一章 番鸭精液常温保存研究 |
1.1 材料和方法 |
1.1.1 试验材料 |
1.1.2 试验方法 |
1.1.3 精液采集和处理 |
1.1.4 精液品质鉴定 |
1.2 数据分析 |
1.3 结果分析 |
1.3.1 新鲜精液质量 |
1.3.2 稀释液、稀释比例、保存温度和保存时间对精子活率的影响 |
1.3.3 稀释液、稀释比例、保存温度和保存时间对质膜完整率的影响 |
1.3.4 稀释液、稀释比例、保存温度和保存时间对精子形态的影响 |
1.3.5 稀释液和保存温度对精液常温保存时间的影响 |
1.4 讨论 |
1.4.1 稀释液对精子活率、精子畸形率和质膜完整率的影响 |
1.4.2 稀释比例对精子活率、精子畸形率和质膜完整率的影响 |
1.4.3 保存时间对精子活率、精子畸形率和质膜完整率的影响 |
1.4.4 保存温度对精子活率、精子畸形率和质膜完整率的影响 |
1.5 小结 |
第二章 番鸭精液低温保存研究 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.2 精液品质评定 |
2.3 数据分析 |
2.4 结果分析 |
2.4.1 稀释液对精液低温保存精子活率的影响 |
2.4.2 保存时间对精液低温保存精子活率的影响 |
2.4.3 稀释液对精液低温保存精子质膜完整率的影响 |
2.4.4 保存时间对精液低温保存精子质膜完整率的影响 |
2.4.5 稀释液对番鸭精液低温保存精子形态的影响 |
2.4.6 保存时间对番鸭精液低温保存精子形态的影响 |
2.4.7 稀释液对番鸭精液低温保存时间的影响 |
2.4.8 稀释比例对番鸭精液低温保存时间的影响 |
2.5 讨论 |
2.5.1 稀释液和稀释比例对精液低温保存质量的影响 |
2.5.2 保存时间对精液低温保存质量的影响 |
2.6 小结 |
第三章 脱脂奶粉对精液低温保存质量影响 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验方法 |
3.2 精液采集和精液处理 |
3.3 精液品质鉴定 |
3.4 数据分析 |
3.5 结果分析 |
3.5.1 不同含量脱脂奶粉对精液低温保存精子活率的影响 |
3.5.2 保存时间对不同含量脱脂奶粉组精子活率的影响 |
3.5.3 不同含量脱脂奶粉对精液低温保存精子质膜完整率的影响 |
3.5.4 保存时间对不同含量脱脂奶粉组精子质膜完整率的影响 |
3.5.5 不同含量脱脂奶粉对精液低温保存精子畸形率的影响 |
3.5.6 保存时间对不同含量脱脂奶粉组精子形态的影响 |
3.5.7 不同含量脱脂奶粉对精液低温保存时间的影响 |
3.6 讨论 |
3.6.1 脱脂奶粉对精液低温保存精子活率的影响 |
3.6.2 脱脂奶粉对低温保存精子质膜完整率和畸形率的影响 |
3.6.3 脱脂奶粉对精液低温保存时间的影响 |
3.7 小结 |
第四章 稀释液对番鸭人工授精受精率的影响 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 试验材料 |
4.1.2 试验方法 |
4.1.3 精液品质检测 |
4.2 人工授精 |
4.3 数据分析 |
4.4 结果分析 |
4.5 讨论 |
第五章 结论 |
本研究的创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简历 |
(4)蒙古马精液冷冻保存的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略语表 |
引言 |
1 文献综述 |
1.1 马精液冷冻保存的研究进展 |
1.2 马精液冷冻保存中存在的问题 |
1.3 AI在国内外的使用状况 |
1.4 AI使用效率低下的原因 |
1.5 马精液冷冻保存损伤机制 |
1.5.1 机械损伤 |
1.5.2 氧化损伤 |
1.6 影响马精液冷冻保存质量的因素 |
1.6.1 外观 |
1.6.2 精液量 |
1.6.3 精液密度 |
1.6.4 精清 |
1.6.5 离心 |
1.6.6 渗透压 |
1.6.7 降温速率 |
1.6.8 平衡时间 |
1.6.9 解冻程序 |
1.7 马精液冷冻保存液的主要成分 |
1.7.1 冷冻保护剂 |
1.7.2 卵黄 |
1.7.3 糖类 |
1.7.4 抗氧化剂 |
1.8 马精液品质常用测定指标 |
1.8.1 精子活率 |
1.8.2 精子形态 |
1.8.3 顶体完整率 |
1.8.4 质膜完整率 |
1.8.5 线粒体膜电位 |
1.8.6 抗氧化能力 |
2 蒙古马细管精液冷冻程序的优化研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验动物 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.3 马冷冻精液的制作 |
2.1.4 试验设计 |
2.1.5 精子质量评价 |
2.1.6 数据统计与分析 |
2.2 结果 |
2.2.1 渗透压对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
2.2.2 不同离心方法去除精清对蒙古马精液冷冻质量及精子损失率的影响 |
2.2.3 不同平衡时间对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
2.2.4 不同降温速率对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
2.3 讨论 |
2.3.1 渗透压对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
2.3.2 不同离心方法去除精清对蒙古马精液冷冻质量及精子损失率的影响 |
2.3.3 不同平衡时间对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
2.3.4 不同降温速率对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
2.4 结论 |
3 冷冻保护液不同成分对蒙古马细管精液冷冻效果的研究 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验动物的选择 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 马冷冻精液的制作 |
3.1.4 试验设计 |
3.1.5 精子质量评价 |
3.1.6 数据统计分析 |
3.2 结果 |
3.2.1 不同浓度gly和DMF对马精子冷冻效果的影响 |
3.2.2 不同浓度卵黄、LDL对蒙古马精子低温保存及冷冻效果的影响 |
3.2.3 不同糖类组合对马精子低温保存效果的影响 |
3.3 讨论 |
3.3.1 不同浓度gly和DMF对马精子冷冻效果的影响 |
3.3.2 不同浓度卵黄、LDL对蒙古马精子低温保存及冷冻效果的影响 |
3.3.3 不同糖类组合对马精子低温保存效果的影响 |
3.4 结论 |
4 不同抗氧化剂对蒙古马精液品质的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验动物的选择 |
4.1.2 主要试剂 |
4.1.3 马冷冻精液的制作 |
4.1.4 试验设计 |
4.1.5 精子质量评价 |
4.1.6 统计分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 不同抗氧化剂对冷冻-解冻后马精子质量的影响 |
4.2.2 不同抗氧化剂对蒙古马精液中抗氧化相关指标的影响 |
4.3 讨论 |
4.4 结论 |
5 蒙古马细管精液冷冻保护液的验证 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 试验动物的选择 |
5.1.2 稀释液的制备 |
5.1.3 精液的采集 |
5.1.4 精液的处理 |
5.1.5 精液的冷冻及解冻 |
5.1.6 试验设计 |
5.1.7 母马的管理和人工授精 |
5.1.8 数据统计分析 |
5.2 结果 |
5.2.1 冻后活力均值 |
5.2.2 受胎率验证 |
5.3 讨论 |
5.3.1 输精方法对受胎率的影响 |
5.3.2 不同种公马精液对受胎率的影响 |
5.3.3 不同精子活力对受胎率的影响 |
5.4 小结 |
6 结论 |
7 研究创新点 |
致谢 |
附录 |
作者简介 |
参考文献 |
(5)青紫蓝獭兔精液保存的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
1 绪论 |
1.1 獭兔养殖现状 |
1.2 家畜的精液组成及特性 |
1.3 兔精液及精子的特点 |
1.4 精液的保存方法及原理 |
1.4.1 常温保存 |
1.4.2 低温保存 |
1.4.3 冷冻保存 |
1.4.4 冷冻干燥保存 |
1.5 影响兔精液保存的因素 |
1.5.1 个体差异 |
1.5.2 鲜精品质 |
1.5.3 不同的保存方法 |
1.5.4 稀释液的组成 |
1.5.5 pH值 |
1.6 精液质量的评价指标及测定方法 |
1.6.1 精子的外观评定 |
1.6.2 精子的活力和活率 |
1.6.3 质膜的完整性(低渗膨胀) |
1.6.4 顶体的完整性 |
1.7 精液保存的研究现状 |
1.7.1 兔精液稀释配方的研究现状及理论依据 |
1.7.2 精液保存稀释液pH值研究现状及理论依据 |
1.7.3 不同保存方法的研究进展 |
1.8 青紫蓝獭兔精液保存的发展趋势 |
1.9 兔人工授精的发展趋势 |
1.10 研究的目的和意义 |
1.10.1 研究目的 |
1.10.2 研究意义 |
2 材料与方法 |
2.1 试验设计 |
2.2 试验药品 |
2.3 实验动物 |
2.4 试剂配制及操作方法 |
2.5 仪器设备 |
2.5.1 试验仪器 |
2.5.2 采精及输精仪器 |
2.6 试验方法 |
2.6.1 基础稀释液的配制 |
2.6.2 精液采集和鲜精的检测 |
2.6.3 精液的常温(17℃)保存 |
2.6.4 精液常温(17℃)下,不同pH值稀释液的保存 |
2.6.5 精液的低温(4℃)保存 |
2.6.6 精液的冷冻(-196℃)保存 |
2.6.7 人工授精 |
2.6.8 精液质量检测 |
2.7 数据测定 |
2.8 数据处理方法 |
3 结果与分析 |
3.1 不同稀释液对青紫蓝獭兔精液常温(17℃)保存效果的影响 |
3.1.1 常温下,不同稀释液对青紫蓝獭兔精子活力及存活时间的影响 |
3.1.2 常温下,不同稀释液对青紫蓝獭兔精子质膜完整性的影响 |
3.2 同种稀释液不同pH值对青紫蓝獭兔精液常温(17℃)保存效果的影响 |
3.2.1 常温下,同种稀释液不同pH值对青紫蓝獭兔精子活力的影响 |
3.2.2 常温下,同种稀释液不同pH值对青紫蓝獭兔精子质膜完整性的影响 |
3.3 不同稀释液对青紫蓝獭兔精液低温(4℃)保存效果的影响 |
3.3.1 低温下,不同稀释液对青紫蓝獭兔精子活力及存活时间的影响 |
3.3.2 低温下,不同稀释液对青紫蓝獭兔精子质膜完整性的影响 |
3.3.3 低温下,不同稀释液对青紫蓝獭兔精子顶体完整性的影响 |
3.4 不同稀释液对青紫蓝獭兔冷冻(-196℃)保存效果的影响 |
3.5 常温保存精液、低温保存精液、冻解精液与新鲜精液人工授精的比较 |
4 讨论 |
4.1 稀释液对兔精液常温保存效果的影响 |
4.2 稀释液pH值对兔精液常温保存效果的影响 |
4.3 稀释液对兔精液低温保存效果的影响 |
4.4 稀释液对兔精液冷冻效果的影响 |
4.5 精液不同保存方式对母兔人工授精效果的影响 |
5 结论、创新点及展望 |
5.1 结论 |
5.2 创新点 |
5.3 展望 |
致谢 |
参考文献 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
(6)猪精子能量代谢的调控机理研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
文献综述 |
第一章 猪精子保存研究进展 |
1.1 猪人工授精技术的研究进展 |
1.2 猪精液和精子 |
1.2.1 猪精囊腺、前列腺及尿道球腺的生理特点 |
1.2.2 精子发生 |
1.2.3 公猪精液的特点 |
1.2.4 猪精子的生理结构特点 |
1.2.5 猪精浆成份特点 |
1.3 精子在雌性生殖道内的迁移 |
1.3.1 子宫颈、子宫与精子的互作 |
1.3.2 输卵管与精子的互作 |
1.4 猪精液保存的主要方式 |
1.4.1 常温保存 |
1.4.2 冷冻保存 |
1.5 常温保存稀释液 |
1.5.1 猪精液常温稀释液种类介绍 |
1.5.2 稀释液的营养成份 |
1.5.3 稀释液的pH |
1.5.4 稀释液的渗透压 |
1.5.5 稀释液抗生素的使用 |
1.6 精子质量检测方法 |
1.6.1 精子运动指标分析 |
1.6.2 质膜完整 |
1.6.3 顶体完整 |
1.6.4 线粒体活性 |
1.6.5 精子的脂质过氧化检测 |
第二章 精子能量代谢研究进展 |
2.1 精子糖酵解途径研究 |
2.1.1 糖酵解供能 |
2.1.2 糖酵解与精子功能的关系 |
2.2 精子线粒体氧化磷酸化 |
2.2.1 精子线粒体的特征及功能 |
2.2.2 精子线粒体氧化磷酸化供能途径 |
2.2.3 精子线粒体呼吸链复合物 |
2.3 精子糖酵解与氧化磷酸化代谢途径的关系 |
第三章 精子ROS氧化损伤研究进展 |
3.1 ROS的种类 |
3.2 ROS的来源 |
3.2.1 精液ROS的内源来源 |
3.2.2 精液ROS的外源来源 |
3.3 精子ROS的产生 |
3.4 ROS对精子的影响 |
3.4.1 ROS有利于促进精子功能 |
3.4.2 ROS对精子的不利影响 |
3.5 抗氧化剂的应用 |
3.5.1 酶类抗氧化剂 |
3.5.2 非酶类抗氧化剂 |
3.5.3 胺类激素物质 |
3.6 研究目的与意义 |
试验部分 |
第四章 线粒体氧化磷酸化对猪精子运动方式的调节 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 主要仪器设备 |
4.1.2 主要材料和试剂 |
4.2 试验步骤 |
4.2.1 试验动物及其饲养 |
4.2.2 猪精液采集 |
4.2.3 猪精液稀释处理 |
4.2.4 猪精液孵育处理 |
4.2.5 猪精子运动分析 |
4.2.6 猪精子质膜完整指标检测 |
4.2.7 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
4.2.8 线粒体基因在猪精子上的表达分析 |
4.2.9 猪精子ATP含量分析 |
4.2.10 猪精子线粒体蛋白的免疫荧光分析 |
4.2.11 Western Blotting检测猪精子线粒体蛋白在孵育过程的表达变化 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 利用不同梯度浓度葡萄糖的Modena液孵育精子而探究精子直线运动与葡萄糖含量的关系 |
4.3.2 线粒体呼吸链复合物I抑制剂鱼藤酮降低精子的直线运动、线粒体活性及ATP含量 |
4.3.3 猪精子线粒体基因转录与翻译 |
4.3.4 线粒体翻译抑制剂CRP呈浓度依赖性抑制线粒体翻译而降低精子的直线运动 |
4.3.5 线粒体翻译抑制剂CRP呈时间依赖性抑制线粒体翻译而降低精子的直线运动 |
4.3.6 细胞质翻译抑制剂(CHX)和核转录抑制剂(AMNT)不影响猪精子的直线运动方式 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
第五章 低糖稀释产生的ROS对猪精子的损伤机理研究 |
5.1 材料和方法 |
5.1.1 仪器 |
5.1.2 主要试剂 |
5.1.3 相关抗体 |
5.1.4 相关试剂配制 |
5.2 试验步骤 |
5.2.1 试验动物及其饲养 |
5.2.2 猪精液采集 |
5.2.3 猪精液稀释处理 |
5.2.4 猪精液孵育处理 |
5.2.5 猪精子运动指标检测 |
5.2.6 流式细胞术分析猪精子线粒体活性 |
5.2.7 DNA分离和长链PCR扩增 |
5.2.9 猪精子ATP含量分析 |
5.2.10 猪精子线粒体ROS含量分析 |
5.2.11 猪精子线粒体蛋白的免疫荧光分析 |
5.2.12 Western Blotting检测猪精子蛋白在孵育过程的表达变化 |
5.3 结果与分析 |
5.3.1 低糖稀释液稀释后在孵育过程中精子的运动形式 |
5.3.2 低糖应激对精子损伤的机理 |
5.3.3 PQQ和 Co Q10 处理降低精子ROS含量,减少线粒体蛋白损伤,并增加线粒体膜电位、ATP含量和精子直线运动 |
5.3.4 在线粒体翻译抑制剂D-氯霉素(CRP)处理下,PQQ和 Co Q10 不能增加线粒体蛋白含量及精子直线运动 |
5.3.5 在低糖稀释液中添加PQQ或 Co Q10 会增强精子的线粒体基因转录与翻译 |
5.3.6 细胞质翻译抑制剂(CHX)和核转录抑制剂(AMNT)不影响精子的TFAM和POLRMT水平 |
5.4 .讨论 |
5.5 小结 |
第六章 精子谷胱甘肽合成系统调控精子运动 |
6.1 材料和方法 |
6.1.1 主要仪器设备 |
6.1.2 主要材料和试剂 |
6.2 试验步骤 |
6.2.1 试验动物及其饲养 |
6.2.2 猪精液采集 |
6.2.3 猪精液稀释处理 |
6.2.4 猪精液孵育处理 |
6.2.5 精浆氨基酸的分析 |
6.2.6 猪精子运动指标检测 |
6.2.7 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
6.2.8 精子总谷胱甘肽含量 |
6.2.9 精子ROS检测 |
6.2.10 猪精子CBS、CTH、GCLC、GSS基因的表达分析 |
6.2.11 猪精子ATP含量分析 |
6.2.12 Western Blotting检测 |
6.3 结果与分析 |
6.3.1 猪精浆中的GSH合成底物(氨基酸)与精液品质关系 |
6.3.2 在低糖稀释液中添加蛋氨酸会促进猪精子的直线运动 |
6.3.3 抑制谷胱甘肽的合成会降低精子的直线运动 |
6.3.4 低糖稀释液激活精子翻译合成CBS和 CTH限制酶而利用Met合成GSH |
6.3.5 氧化应激诱导精子利用蛋氨酸合成GSH相关蛋白酶的合成 |
6.3.6 氧化应激激活精子的ERK1/2/ e IF4E/RSK信号通路,合成相关蛋白酶,从而利用蛋氨酸合成GSH而缓解ROS对精子氧化损伤 |
6.4 讨论 |
6.5 小结 |
第七章 磷酸戊糖途径参与猪精子运动的调控 |
7.1 材料和方法 |
7.1.1 主要仪器设备 |
7.1.2 主要材料和试剂 |
7.2 试验步骤 |
7.2.1 试验动物及其饲养 |
7.2.2 猪精液采集 |
7.2.3 猪精液稀释处理 |
7.2.4 猪精液孵育处理 |
7.2.5 猪精子运动指标检测 |
7.2.6 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
7.2.7 精子还原型总谷胱甘肽与氧化谷胱甘肽的比值检测 |
7.2.8 精子总NADPH含量及NADPH/NADP+的比值检测 |
7.2.9 精子ALDOA活性检测 |
7.2.10 精子G6PD活性检测 |
7.2.11 精子总衣康酸修饰检测 |
7.2.12 GS/MS检测精子和精液中的衣康酸 |
7.2.13 精子ROS检测 |
7.2.14 猪精子质膜完整指标检测 |
7.2.15 猪精子ATP含量分析 |
7.2.16 Western Blotting |
7.3 结果与分析 |
7.3.1 葡萄糖对精子运动的影响 |
7.3.2 猪精子存在NADPH的磷酸戊糖途径合成系统 |
7.3.3 G6PD活性抑制剂(6-AN)抑制精子磷酸戊糖途径,调节精子直线运动 |
7.3.4 精子衣康酸修饰抑制糖酵解途径,促进磷酸戊糖途径 |
7.4 讨论 |
7.5 小结 |
结论 |
本研究创新点 |
后续研究工作 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(7)人工授精技术提高乌金猪繁殖性能的试验报告(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 试验设计 |
1.2 相关配套技术 |
1.2.1 母猪发情鉴定技术 |
1.2.2 公猪手握采精技术 |
1.2.3 两步间隔输精技术 |
2 结果与分析 |
2.1 人工授精与本交的繁殖性能对比 |
2.2 两步间隔输精对比 |
3 结论 |
3.1 人工授精技术可以有效提高母猪的繁殖效率 |
(8)马胚胎移植及克隆胚体外构建技术(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 引言 |
1.1 研究背景 |
1.1.1 国外马业现状 |
1.1.2 我国马业现状 |
1.1.3 存在的主要问题 |
1.2 马的生殖生理特点 |
1.2.1 生殖活动 |
1.2.2 生殖行为 |
1.2.3 生殖激素的调节 |
1.3 国内外研究进展 |
1.3.1 马胚胎移植技术 |
1.3.2 精液冷冻与授精 |
1.3.3 胚胎冷冻与移植 |
1.3.4 体外受精(IVF) |
1.3.5 单精子卵胞浆显微注射技术(ICSI) |
1.3.6 卵母细胞成熟 |
1.3.7 马的体细胞核移植(SCNT) |
1.4 本研究的目的意义及内容 |
1.4.1 研究目的意义 |
1.4.2 研究内容 |
1.4.3 技术路线 |
2 试验一: 马胚胎移植技术的研究 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 试验动物 |
2.1.2 动物饲养 |
2.1.3 试剂 |
2.1.4 试验设备 |
2.1.5 试剂制备 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 种马的选择 |
2.2.2 母马发情鉴别 |
2.2.3 母马发情调控 |
2.2.4 排卵调控 |
2.2.5 精液品质检测 |
2.2.6 精液的保存 |
2.2.7 人工授精 |
2.2.8 非手术法冲胚 |
2.2.9 胚胎的鉴定与保存 |
2.2.10 胚胎移植 |
2.2.11 妊娠诊断 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 母马的发情检查结果 |
2.3.2 不同激素诱导母马发情的试验结果 |
2.3.3 不同激素调控马排卵的比例 |
2.3.4 不同精液稀释液对精液品质的影响 |
2.3.5 不同输精方式对母马受孕率的影响 |
2.3.6 不同冲胚液对胚胎收集效率的对比与应用 |
2.3.7 不同胚胎移植方法的成功率 |
2.3.8 桑椹胚的收集与移植结果 |
2.3.9 不同妊娠诊断方法的比较 |
2.4 讨论 |
2.4.1 种马的选择 |
2.4.2 发情与卵泡生长的关系 |
2.4.3 超数排卵 |
2.4.4 采精与授精 |
2.4.5 马的胚胎移植 |
2.5 小结 |
3 马克隆胚胎体外构建技术的研究 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 试验对象 |
3.1.2 试剂 |
3.1.3 设备 |
3.1.4 试剂制备 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 卵巢的采集 |
3.2.2 马卵巢卵母细胞的收集 |
3.2.3 卵母细胞体外成熟 |
3.2.4 成纤维细胞培养 |
3.2.5 孤雌激活 |
3.2.6 体细胞核移植 |
3.2.7 构建胚胎的移植 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 不同季节卵巢的最佳运输温度 |
3.3.2 马、驴卵巢、COCs形态的对比 |
3.3.3 COCs回收率 |
3.3.4 卵母细胞体外成熟 |
3.3.5 不同年龄马的成纤维细胞系的建立 |
3.3.6 孤雌激活胚胎的成功率 |
3.3.7 马体细胞核移植的试验结果 |
3.4 讨论 |
3.4.1 卵巢体外运输 |
3.4.2 母体的营养情况对卵母细胞成熟率的影响 |
3.4.3 ActA对卵母细胞的作用 |
3.4.4 体细胞系的建立 |
3.4.5 体细胞核移植 |
3.5 小结 |
4 全文总结 |
4.1 全文结论 |
4.2 本研究创新点 |
4.3 有待进一步研究的内容 |
4.3.1 胚胎移植技术的推广 |
4.3.2 马卵母细胞体外成熟技术 |
4.3.3 克隆胚胎的构建与体外发育 |
附录 |
1 胚胎移植马的选择标准(LH-201-2018) |
2 胚胎移植马选择结果 |
3 马人工授精技术规程(LH-202-2018) |
4 马胚胎移植技术规程(LH-203-2018) |
致谢 |
参考文献 |
作者简介 |
(9)杜洛克公猪精液性状全基因组关联分析及遗传参数估计(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词中英文对照表 |
1 前言 |
1.1 研究问题的由来 |
1.2 文献综述 |
1.2.1 公猪精液性状的评价指标 |
1.2.1.1 基本检测指标 |
1.2.1.2 计算机辅助精子分析 |
1.2.2 公猪精液性状的影响因素 |
1.2.2.1 动物因素 |
1.2.2.2 环境因素 |
1.2.2.3 营养因素 |
1.2.2.4 采精频率 |
1.2.3 公猪精液性状遗传效应研究进展 |
1.2.3.1 遗传参数估计简介 |
1.2.3.2 公猪精液性状的遗传参数估计 |
1.2.3.3 公猪精液性状的候选基因研究 |
1.2.4 全基因组关联分析(GWAS)研究进展 |
1.2.4.1 全基因组关联分析(GWAS)的优势及影响因素 |
1.2.4.2 全基因组关联分析(GWAS)在公猪精液性状上的应用 |
1.2.4.3 全基因组关联分析(GWAS)在其他物种精液性状上的应用 |
1.3 研究目的及意义 |
2 材料和方法 |
2.1 技术路线 |
2.2 实验材料 |
2.2.1 数据来源 |
2.2.2 主要仪器、设备和耗材 |
2.2.3 主要试剂和试剂盒 |
2.2.4 主要软件、数据库和网站 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 采精记录数据整理 |
2.3.2 精液性状遗传参数估计 |
2.3.3 精液性状个体随机效应值估计 |
2.3.4 精子总DNA提取及质量检测 |
2.3.5 基因型数据获取及数据的质控 |
2.3.6 精液性状全基因组关联分析 |
2.3.7 重要候选基因鉴定 |
3 结果与分析 |
3.1 精液性状描述性统计 |
3.2 精液性状遗传参数估计结果 |
3.3 精液性状个体随机效应值 |
3.4 基因型数据的质量控制 |
3.5 精液性状全基因组关联分析结果 |
3.5.1 精液量 |
3.5.2 精子浓度 |
3.5.3 精子活力 |
3.5.4 精子畸形率 |
3.5.5 总精子数 |
3.6 重要候选基因鉴定 |
4 讨论 |
4.1 杜洛克公猪精液性状遗传参数估计的讨论 |
4.1.1 关于遗传力的讨论 |
4.1.2 关于遗传相关的讨论 |
4.2 杜洛克公猪精液性状全基因组关联分析的讨论 |
4.2.1 关于反应变量的讨论 |
4.2.2 关于全基因组关联分析结果的讨论 |
5 小结 |
5.1 主要结论 |
5.2 主要创新点 |
5.3 不足之处及下一步工作计划 |
参考文献 |
致谢 |
(10)畜禽繁殖主推技术(论文提纲范文)
1 多胎羊两年三产技术 |
1.1 技术概述 |
1.2 增产增效情况 |
1.3 技术要点 |
2 牛冷冻精液人工授精配种技术 |
2.1 技术概述 |
2.2 增产增效情况 |
2.3 技术要点 |
2.4 注意事项 |
3 绵羊人工授精技术 |
3.1 技术概述 |
3.2 增产增效情况 |
3.3 技术要点 |
3.3.1 精液采前处理与采精 |
3.3.1. 1 种公羊采精调教: |
3.3.1. 2 采精前的准备: |
3.3.1. 3 采精操作: |
3.3.2 精液处理与输精 |
3.3.2. 1 精液品质检查: |
3.3.2. 2 精液稀释: |
3.3.2. 3 输精时间: |
3.3.2. 4 输精剂量: |
3.3.2. 5 输精部位: |
3.3.2. 6 输精方法: |
3.3.2. 7 输精次数: |
3.3.3 配种前期工作流程 |
3.3.3. 1 种公羊与试情公羊的准备: |
3.3.3. 2 母羊的发情检查: |
3.3.3. 3 采精与精液处理: |
3.3.3. 4 羊只保定: |
3.4 注意事项 |
4 猪人工授精技术 |
4.1 技术概述 |
4.2 增产增效情况 |
4.3 技术要点 |
4.3.1 公猪的采精: |
4.3.2 精液稀释与保存: |
4.3.3 母猪发情鉴定: |
4.3.4 母猪输精: |
5 三元猪繁育生产技术 |
5.1 技术概述 |
5.2 增产增效情况 |
5.3 技术要点 |
5.4 注意事项 |
6 马人工授精技术 |
6.1 技术概况 |
6.2 增产增效情况 |
6.3 技术要点 |
6.4 适宜区域 |
6.5 注意事项 |
7 奶牛生产性能测定(DHI)与日粮调控技术 |
7.1 技术概述 |
7.2 增产增效情况 |
7.3 技术要点 |
7.3.1 规范采样操作: |
7.3.2 完善并规范牛场基本信息资料、牛号编写规则和牛场基础数据: |
7.3.3 DHI报告解读和日粮配方与饲养管理措施改进: |
7.4 注意事项 |
7.5 适宜区域 |
8 超声波早期妊娠诊断技术 |
8.1 技术概述 |
8.2 增产增效情况 |
8.3 技术要点 |
8.4 适宜区域 |
8.5 注意事项 |
9 肉牛超声波胴体质量活体测定技术 |
9.1 技术概述 |
9.2 增产增效情况 |
9.3 技术要点 |
9.4 适宜区域 |
9.5 注意事项 |
四、猪的采精与人工授精技术(论文参考文献)
- [1]猪的人工授精技术[J]. 王聚雷. 农村科技, 2021(05)
- [2]壳聚糖、庆大霉素和维生素C对猪精液常温保存效果的研究[D]. 石武. 西北农林科技大学, 2020
- [3]番鸭精液液态保存研究[D]. 段元彬. 西北农林科技大学, 2020
- [4]蒙古马精液冷冻保存的研究[D]. 阿娜尔. 内蒙古农业大学, 2020(01)
- [5]青紫蓝獭兔精液保存的研究[D]. 黄溢. 西南科技大学, 2020(08)
- [6]猪精子能量代谢的调控机理研究[D]. 朱振东. 西北农林科技大学, 2020
- [7]人工授精技术提高乌金猪繁殖性能的试验报告[J]. 黄剑锋. 四川畜牧兽医, 2019(10)
- [8]马胚胎移植及克隆胚体外构建技术[D]. 张志鹏. 内蒙古农业大学, 2019(08)
- [9]杜洛克公猪精液性状全基因组关联分析及遗传参数估计[D]. 陈毅龙. 华中农业大学, 2019(02)
- [10]畜禽繁殖主推技术[J]. 新疆维吾尔自治区畜牧总站. 新疆畜牧业, 2019(02)