一、Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织胰岛素受体底物1和含2个SH_2结构的蛋白酪氨酸磷酸酶的蛋白表达（论文文献综述）
母倩文[1]（2021）在《SHP2抑制剂的发现研究》文中研究表明磷酸化和去磷酸化是蛋白质翻译后修饰的重要组成部分,参与调节细胞生长、增殖、分化、转移及肿瘤发生发展等生理病理活动,主要由蛋白磷酸酶（Phosphatases）和激酶（Kinases）协同完成。SHP2（Src homology-2 domain-containing protein tyrosine phosphatase-2）是由PTPN11编码的重要酪氨酸磷酸酶,参与调控多种癌症及炎症相关信号通路。SHP2突变可引起造血系统恶性肿瘤、实体瘤、努南综合征和豹皮综合征等多种疾病发生,因而开发SHP2抑制剂对治疗SHP2相关疾病尤其是癌症具有重要意义。SHP2＿E76K突变是幼年型粒-单核细胞白血病中最常见的突变,而现有抑制剂对该突变型SHP2的抑制活性低于野生型;此外,SHP2与同源蛋白SHP1氨基酸序列高度保守;因此,抑制剂的选择性颇为关键。本论文中我们主要针对SHP2＿E76K突变体建立抑制剂筛选平台,并针对SHP1测试化合物的选择性,旨在为高活性、高选择性的SHP2抑制剂发现提供苗头化合物。为此,我们首先构建了SHP2和SHP1相关的多种蛋白质（野生型SHP2全长蛋白,SHP2＿WT;E76K突变型SHP2全长蛋白,SHP2＿E76K;SHP2催化结构域蛋白,SHP2＿PTP;野生型SHP1全长蛋白,SHP1＿WT;E74K突变型SHP1全长蛋白,SHP1＿E74K;SHP1催化结构域蛋白,SHP1＿PTP）的表达质粒并纯化得到后续实验所需的目标蛋白。随后,建立针对SHP2和SHP1的酶活测试方法,并靶向SHP2＿E76K对2560个老药进行抑制剂筛选,发现10个对SHP2＿E76K具有抑制活性的化合物,其中艾曲波帕乙醇胺和漆树酸的抑制活性最佳,对SHP2＿E76K的IC50值分别为4.5μM和6.5μM。在针对SHP1测试化合物的选择性实验中,漆树酸表现出一定的选择性,对SHP2＿WT和SHP1＿WT的IC50值分别为2.2μM和10.1μM。我们利用蛋白热迁移方法（Thermal shift assay,TSA）验证活性化合物与SHP2的结合,其中头孢曲松和硫辛酸有较为明显的热迁移现象,ΔTm值分别是2.0℃和1.5℃。接着,我们利用分子对接方法探究小分子与SHP2的可能结合模式,发现这些小分子可与底物结合口袋中的关键氨基酸K364、K366、C459、S460和R465等形成了氢键、盐桥等相互作用。最后,我们通过筛选960个晶体条件得到SHP2的晶体生长条件,并使用X-射线衍射法收集晶体数据,尝试解析小分子与蛋白的复合物晶体结构,但没有发现小分子抑制剂的电子云密度,目前仅解析得到SHP2＿PTP（1.7?）和SHP2＿WT（2.5?）的单晶结构。综上所述,我们建立了SHP2抑制剂的筛选平台,针对老药化合物筛选得到了多个抑制SHP2的活性化合物,解析得到了高分辨率的SHP2＿PTP和SHP2＿WT蛋白质自身的晶体结构,为后续SHP2抑制剂的优化和复合物结构解析奠定了重要基础。
韩丹[2]（2021）在《“昆南素”辅助降血糖固体饮料的作用机制及降糖效果研究》文中提出糖尿病是以慢性高血糖为特征的代谢性疾病,与遗传、生活习惯、工作压力、饮食结构等因素密切相关。近年来糖尿病呈现年轻化趋势,严重危害人们的身体健康。蛋白质酪氨酸磷酸酶1B（Protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B）是最早发现的蛋白质酪氨酸磷酸酶（Protein tyrosine phosphatases,PTPs）,是胰岛素信号通路重要的负调控因子,通过抑制PTP1B在体内的活性,有可能恢复糖尿病人对血糖的控制能力,因此PTP1B已成为增加胰岛素敏感性和治疗2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）的重要靶点。目前,糖尿病的传统治疗方法虽然有效,但也存在一定的副作用及耐药等问题,所以迫切需要更安全、更有效、可长期服用的天然植物类保健食品进行辅助治疗。根据课题组的前期研究,本文将昆布、南瓜籽、山药、A、B、C、D等7种食物或药食同源植物的水提物粉末,辅以木糖醇,通过科学配比制备出一种辅助降血糖固体饮料（命名为昆南素）。我们以昆南素为研究对象,通过体外酶学实验证明了昆南素能够有效抑制PTP1B(IC50=97μg/m L)的活性,并且考察了昆南素对其他酪氨酸磷酸酶的抑制效果,发现它对PTP1B具有较好的抑制专一性。应用小鼠胚胎成纤维细胞（3T3-L1）,我们在细胞水平上检测了昆南素对胰岛素信号通路的影响。结果表明,昆南素能够增加小鼠脂肪细胞中蛋白质的总酪氨酸磷酸化水平,能够激活胰岛素信号通路上、下游分子IRβ、ERK1/2以及GLUT4,并且昆南素能够增加胰岛素的敏感性,这种作用很可能是由于昆南素抑制了PTP1B的活性所致。为了进一步研究昆南素在体内的降血糖作用,我们构建了胰岛素分泌低下的糖尿病小鼠模型,通过灌胃给药的方式每天给糖尿病小鼠喂食昆南素,持续31天。与对照组相比,昆南素中、高剂量组可显着降低糖尿病小鼠空腹血糖水平,同时增加模型小鼠对葡萄糖的耐受。综上所述,我们以昆布、南瓜籽和山药等7种食物及药食同源植物的水提物粉末为原料,辅以木糖醇,通过科学配比制备出昆南素固体饮料。研究表明,昆南素具有类胰岛素的作用,能够增加胰岛素的敏感性,并且在一定程度上改善了糖尿病模型小鼠的症状,具备成为辅助降血糖保健食品的潜力。本研究为抗糖尿病天然植物类辅助降血糖保健食品的开发提供了新的思路。
杨兵[3]（2020）在《拐枣多糖的分离纯化和结构解析及其降血糖活性研究》文中指出糖尿病是一种慢性内分泌代谢疾病,是由于机体胰岛素分泌相对不足或绝对不足而引起机体糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱,并以持续高血糖为典型特征的一种综合症。世界卫生组织将糖尿病分为以下四类:1型糖尿病（Type 1 Diabetes mellitue,T1DM）、2型糖尿病（Type 2Diabetes mellitue,T2DM）、妊娠糖尿病（Gestational Diabetes mellitus,GDM）和其他糖尿病。根据国际糖尿病联盟最新统计,2019年全球约有4.63亿糖尿病患者,而我国糖尿病患者约为1.16亿,居全球首位。以目前趋势推测,到2045年全球糖尿病患者将达到7亿。目前,糖尿病最有效的治疗途径为注射胰岛素和口服降血糖药,但大多数口服降糖药具有一定的副作用。因此,寻找方便易行、疗效确切、无副作用或副作用很小的预防和治疗糖尿病的天然药物显得十分重要。拐枣（Hovenia dulcis）是一种鼠李科枳椇属植物,其可食部分为拐枣果梗。拐枣中富含植物多糖、黄酮类、三萜皂苷类和生物碱等活性成分。近年来,拐枣在营养和保健功效方面的功效越来越受到人们的重视。目前有关拐枣资源的研究主要集中在拐枣种子（枳椇子）方面,对其可食部分（拐枣果梗）的研究较少,一般为利用拐枣果梗开发拐枣果醋、果酒和果汁等产品。同时,也有少量研究报道了拐枣果梗中小分子活性物质（如黄酮类物质）的提取、分离纯化和功能方面的研究。可见,由于对拐枣果梗活性成分研究的不深入,造成其工业化产品附加值低,进而导致资源浪费等问题依然存在。因此,提高拐枣资源开发的附加值,减少资源浪费已成为拐枣产业的重中之重。基于此,本实验以拐枣（果梗）为研究对象,瞄准其活性成分拐枣多糖,采用三种提取工艺提取拐枣多糖,筛选出体外降血糖活性最高的拐枣多糖样品;并对拐枣多糖样品进行分离纯化和结构解析;以及探讨拐枣多糖纯化组分对1型糖尿病和2型糖尿病的降糖效果及机制。主要研究结果如下:（1）三种提取工艺对拐枣多糖的理化性质和结构特性及生物活性的影响采用热水提取（Hot water extraction,HWE）、快速溶剂萃取（Accelerated solvent extraction,ASE）和超声辅助提取（Ultrasonic-assisted extraction,UAE）三种提取工艺提取拐枣多糖,分别命名为:HWE-HDPs、ASE-HDPs和UAE-HDPs,探讨三种提取工艺对拐枣多糖的理化性质和结构特性以及生物活性的影响。结果显示:三种提取工艺的拐枣多糖基本化学组成成分具有显着性差异;拐枣多糖HWE-HDPs的平均分子量显着高于拐枣多糖ASE-HDPs和UAE-HDPs;拐枣多糖HWE-HDPs的单糖组成以鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖为主,拐枣多糖ASE-HDPs和UAE-HDPs的单糖组成以鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖为主;三种提取工艺的拐枣多糖均具有一定的潜在降血糖活性,其中拐枣多糖HWE-HDPs对α-葡萄糖苷酶的抑制能力和Hep-G2细胞胰岛素抵抗的改善效果均显着高于拐枣多糖ASE-HDPs和UAE-HDPs。（2）拐枣多糖的分离纯化和结构解析采用DEAE-52阴离子交换柱层析法和Sephadex G-100柱层析法对拐枣多糖进行分离纯化,得到拐枣多糖的纯化组分,对其进行纯度鉴定并测定其分子量分布,最后结合化学分析法和现代仪器分析法对多糖的纯化组分进行结构解析。结果显示:采用DEAE-52阴离子交换柱层析法分离纯化得到三个拐枣多糖组分（HDPs-1,HDPs-2和HDPs-3）,其中HDPs-2的纯化得率和α-葡萄糖苷酶的抑制能力最高;进而对HDPs-2进行Sephadex G-100柱层析,得到单一多糖组分HDPs-2A,其得率为粗多糖HDPs的19.63%;HDPs-2A平均分子量为372.91 k Da,其总糖含量为84.22%,糖醛酸含量为5.35%,不含蛋白质;HDPs-2A的单糖组成主要包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等,摩尔百分比分别为:3.64%、1.41%、4.67%、5.16%、3.01%、60.02%和22.09%;高碘酸氧化、Smith降解、甲基化和核磁共振分析结果表明,HDPs-2A是由α-L-Araf-（1→、→3,5）-α-L-Araf-（1→、→3）-α-L-Araf-（1→、→3,6）-β-D-Manp-（1→、→3）-β-D-Galp A-（1→、→6）-β-D-Galp-（1→、α-D-Glcp A-（1→和→6）-α-D-Glcp-（1→等8种糖苷键组成;原子力显微镜结果表明,HDPs-2A在水中呈不规则的聚合物颗粒形态;X-RD结果表明,HDPs-2A呈单晶体结构存在。（3）拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病的降糖效果及机制研究以拐枣多糖HDPs-2A为研究材料,采用链脲佐菌素（STZ）诱导构建T1DM大鼠模型,将实验大鼠随机分为6组（每组8只）:空白对照组（NG）、模型组（DM）、阳性对照组（MET）、拐枣多糖HDPs-2A低（L-PA）、中（M-PA）、高（H-PA）剂量组,分别灌胃干预4周。结果显示:中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可提高T1DM大鼠的体重、血清胰岛素水平和肝糖原水平,降低T1DM大鼠的空腹血糖水平,并改善其口服葡萄糖耐量能力;此外,中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A还能部分修复胰岛β-细胞损伤,减轻胰腺氧化应激反应,降低血清促炎因子水平;高剂量的拐枣多糖HDPs-2A对T1DM大鼠的降糖效果与MET组无显着性差异;实时荧光定量PCR和Western Blotting结果表明,1）中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可显着上调胰腺中PDX-1的表达,激活并上调IRS2的表达,以调控胰岛β-细胞的凋亡和再生,达到恢复胰岛β-细胞功能损伤的作用,此外,中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A也可上调胰腺GK和GLUT2的表达,以提高胰岛β-细胞的胰岛素分泌能力,最终改善T1DM大鼠的糖代谢紊乱;2）中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可显着上调肝脏中GK的表达,显着下调G6Pase的表达,以提高肝糖原合成能力,抑制肝脏糖异生作用,最终改善T1DM大鼠的肝脏糖代谢紊乱。综上,拐枣多糖HDPs-2A对T1DM的降糖机制可能为:通过上调胰腺PDX-1、IRS2、GK和GLUT2等信号分子的表达,以调控胰岛β-细胞的凋亡和再生,促进胰岛素分泌,同时也可通过上调肝脏GK的表达和下调G6Pase的表达,来改善肝脏糖代谢紊乱,最终达到改善T1DM的作用。（4）拐枣多糖HDPs-2A对2型糖尿病的降糖效果及机制研究以拐枣多糖HDPs-2A为研究材料,采用高脂高糖结合小剂量STZ诱导构建T2DM大鼠模型,分组与T1DM的降血糖实验一致,灌胃干预4周。结果显示:中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可提高T2DM大鼠的体重和肝糖原水平,降低T2DM大鼠的空腹血糖水平,并改善其口服葡萄糖耐量能力,提高胰岛素的利用和降低胰岛素抵抗,此外,中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A还可部分修复肝脏组织损伤,减轻肝脏氧化应激反应,并提高T1DM大鼠粪便中的短链脂肪酸（SCFAs）水平;高剂量的拐枣多糖HDPs-2A对T2DM大鼠的降糖效果与MET组无显着性差异;实时荧光定量PCR和Western Blotting结果表明,1)中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可显着上调T2DM大鼠肝脏中Ins R和IRS2的表达,激活PI3K,进一步激活并上调PI3K下游关键信号分子Akt的表达,从而上调肝脏中GLUT4的表达,以促进T2DM大鼠肝脏对葡萄糖的吸收和利用,同时提高肝脏的胰岛素敏感性,最终降低肝脏胰岛素抵抗;2)中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可显着上调T2DM大鼠肝脏p-AMPK的表达,激活AMPK途径,进而下调AMPK途径介导的糖异生关键酶G6Pase与PEPCK的表达,以抑制肝脏糖异生作用,最终改善肝脏糖代谢紊乱;3)中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可显着下调T2DM大鼠肝脏中糖原合成酶激酶GSK-3β的表达,并上调糖原合成酶GS的表达,以促进肝糖原合成,还可显着下调肝脏糖异生关键调控因子Fox O1的表达,以抑制肝脏糖异生作用,减少肝糖输出,最终改善肝脏糖代谢紊乱并降低肝脏胰岛素抵抗;4)中、高剂量的拐枣多糖HDPs-2A可显着上调T2DM大鼠肝脏中PPARγ和PGC-1α的表达,激活PPARγ/PGC-1α信号通路,进而上调PI3K-p85和GLUT4的表达,以及激活AMPK途径和调控与糖代谢相关激酶的表达,以提高葡萄糖的转运,促进肝糖原合成,最终改善肝脏糖代谢紊乱并降低肝脏胰岛素抵抗。综上,拐枣多糖HDPs-2A对T2DM的降糖机制可能为:通过激活胰岛素PI3K/Akt信号转导通路的上下游相关信号分子,降低肝脏胰岛素抵抗;另外,通过激活AMPK途径和糖代谢相关酶,改善肝脏糖代谢紊乱;同时,也可通过调控GS/SGK-3β信号通路和下调Fox O1的表达,改善肝脏糖代谢紊乱并降低胰岛素抵抗;还可通过调控PPARγ/PGC-1α信号通路,进而调控其他相关信号分子的表达,改善肝脏糖代谢紊乱并降低胰岛素抵抗。因此,拐枣多糖HDPs-2A可改善肝脏糖代谢紊乱并降低肝脏胰岛素抵抗,且两种机制相互调节,共同改善T2DM。结论:本实验以拐枣多糖的降血糖活性为出发点,首先对拐枣多糖进行提取、分离纯化和结构解析,然后探讨拐枣多糖HDPs-2A对1型/2型糖尿病的降糖效果及机制。实验结论为:采用三种提取工艺提取拐枣多糖,其中HWE-HDPs具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性和Hep-G2胰岛素抵抗细胞改善作用;以HWE-HDPs为研究材料,经分离纯化得到拐枣多糖纯化组分HDPs-2A,其主要含α-L-Araf-（1→、→3,5）-α-L-Araf-（1→、→3）-α-L-Araf-（1→、→3,6）-β-D-Manp-（1→、→3）-β-D-Galp A-（1→、→6）-β-D-Galp-(1→、α-D-Glcp A-（1→和→6）-α-D-Glcp-(1→等8种糖苷键;然后以拐枣多糖HDPs-2A为研究材料,发现拐枣多糖HDPs-2A对T1DM的降糖机制可能为:通过调控T1DM大鼠胰腺相关基因的表达,来调控胰岛β-细胞的凋亡和再生以及促进胰岛素分泌,还可通过调控肝脏糖代谢相关酶的表达,以改善T1DM大鼠肝脏糖代谢紊乱,最终达到改善T1DM的作用;拐枣多糖HDPs-2A对T2DM的降糖机制可能为:通过激活胰岛素PI3K/Akt信号转导通路以及肝脏糖代谢相关的通路和信号分子的表达,以改善肝脏糖代谢紊乱并降低肝脏胰岛素抵抗,最终改善T2DM。
金永祚[4]（2020）在《电针调控T2DM大鼠骨骼肌内质网应激IRE1/JNK改善胰岛素抵抗的机制研究》文中研究指明意义:2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）是以高血糖为主要特征并伴胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）或胰岛素相对分泌障碍的慢性代谢性疾病。其中IR贯穿于T2DM病程的所有阶段,在疾病的发生和发展中起着重要作用。IR的发生主要涉及骨骼肌、脂肪、肝脏组织。其中骨骼肌摄取约80%的葡萄糖,是维持恒定血糖平衡和利用葡萄糖的重要组织,因此骨骼肌在IR中占有至关重要的地位。糖尿病是当前公共健康所面临的重大问题,已被确定为代谢疾患重点疾病。针刺疗法属于非药物疗法,是中国传统医学之一,已通过临床及实验研究证明疗效。胃脘下俞、脾俞、足三里、三阴交为T2DM常用穴,因此本研究探讨电针干预胰岛素抵抗及降糖机制,对T2DM的研究具有重要意义。目的:本研究基于T2DM研究热点的内质网应激,从白肌醇需求酶1（inositol requiring enzymel,IRE1）激活 c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N terminal kinase,JNK）进而影响磷脂酰肌醇-3-羟激酶（phosphatidylinositol 3-hydroxy kinase,PI3K）信号通路出发,采用自发性2型糖尿病大鼠为研究对象,观察电针胃脘下俞、脾俞、足三里、三阴交对空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、口服葡萄糖耐量试验（oral glucose tolerance test,OGTT）的曲线下面积（area under curve,AUC）、血脂、胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-1R）、胰岛素敏感性指数（insulin sensitivity index,ISI）的影响,并从 IRE1、JNK、p-JNK、胰岛素受体底物-1（insulin receptor substrate-1,IRS-1）ser307、PI3K p85和葡萄糖转运蛋白 4（glucose transporter Type 4,GLUT4）蛋白表达层面分析电针改善胰岛素抵抗的作用机制。方法:选取14只体质量140-1 60g（2 月龄）SPF级雄性zucker糖尿病肥胖型（zucker diabetic fatty,ZDF）大鼠（fa/fa）,随机分为模型组、电针组;另取7只同月龄SPF级雄性zucker糖尿病瘦型（zucker lean,ZL）大鼠（fa/+）作为空白组。成模后测定各组空腹血糖及OGTT,连续干预4周（周一至周六）,末次干预第二日测定空腹血糖以及OGTT。干预后测定血清中甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）、极低密度脂蛋白（very low density lipoprotein,vLDL）含量,并分析电针对血脂的影响,取大鼠股四头肌,Western Blot法检测骨骼肌中IRE1、JNK、p-JNK、IRS-1 ser307、PI3K p85、GLUT4表达水平,验证电针是否通过调控内质网应激及PI3K信号通路从而改善IR。采用SPSS21.0进行统计分析。结果:本实验结果中所有ZDF大鼠高糖高脂饲料诱导一个月后均出现FBG明显升高,且在实验过程中出现ZDF大鼠饮食量增加、口服糖耐量异常。干预4周,电针组FBG低于模型组（P<0.05）,显示电针可降低FBG。OGTTAUC干预后较模型组部分下降,但差异无统计学意义。电针组的HOMA-IR和ISI水平较模型组明显下降（P<0.05）,显示电针可降低改善胰岛素抵抗症状。电针干预后血清TC、TG、HDL含量较模型组轻度下降,但差异无统计学意义,vLDL和LDL水平三组差异无统计学意义。电针干预改善胰岛素抵抗机理研究显示,电针组IRE1、JNK、p-JNK蛋白表达明显低于模型组（P<0.05、P<0.01）,显示电针可控制内质网应激。电针组IRS-1 ser307蛋白表达显着低于模型组（P<0.01）,电针组P13K p85和GLUT4蛋白表达明显高于模型组（P<0.01）,显示电针可调控内质网应激缓解IRS-1 ser307的过度表达,提高PI3K p85和GLUT4的表达。结论:电针胃脘下俞、脾俞、足三里、三阴交干预4周,可降低自发性2型糖尿病大鼠FBG、HOMA-IR及ISI水平,从而改善胰岛素抵抗症状及糖代谢异常。同时电针可以控制内质网应激IRE1/JNK,抑制IRS-1 ser307的过度表达,恢复胰岛素的正常转导,上调PI3K p85和GLUT4的表达,最终达到改善胰岛素抵抗及降低血糖的目的。
石书龙[5]（2020）在《2型糖尿病胰岛素抵抗中医证型的聚类分析以及绞股蓝皂苷XLIX改善胰岛素抵抗的初步研究》文中研究表明目的:1.探讨2型糖尿病胰岛素抵抗的中医证型分布,结合相关临床指标,分析不同证型的临床特点,从而为2型糖尿病胰岛素抵抗的临床辨证施治提供客观的科学依据。2.探讨绞股蓝皂苷XLIX是否能改善胰岛素抵抗以及其可能的作用机制。方法:1.临床研究:本研究采用回顾性病例研究的方式收集纳入本研究的120例2型糖尿病胰岛素抵抗患者的中医四诊信息以及其临床资料,包括年龄、病程、体重指数（BMI）、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL）、糖化血红蛋白（Hb A1c）等指标,运用SPSS软件建立这120例患者的中医四诊信息条目数据库,采用系统聚类分析法中的Ward’s method以及Squared Euclidean Distance进行聚类分析,根据所聚类别证候条目的分布情况,由3名主任医师组成的中医专家组对聚类分析的初始模型进行商讨,结合中医学专业知识、证候诊断标准以及临床实际情况,最终确定2型糖尿病胰岛素抵抗的中医证型分类标准。然后,根据此标准,通过具体分析每个患者的临床症状以及舌脉之表现,来判定其所属中医证型,最后总结、归纳、分析各证型组的临床指标,并进行不同证型组之间的指标比较,以及探讨各证型组中与胰岛素抵抗程度呈相关性的敏感指标。2.实验研究:将SD雄性大鼠随机分为三组,即生理盐水组、脂肪乳组、脂肪乳+绞股蓝皂苷XLIX（Gyp-XLIX）组,通过静脉输注脂肪乳来建立大鼠胰岛素抵抗模型,结合高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验来验证Gyp-XLIX是否能改善胰岛素抵抗,实验完成后,留取肝脏、肌肉、脂肪组织,并行蛋白质免疫印迹试验（western blotting）、聚合酶链式反应（PCR）等相关试验,来探讨Gyp-XLIX可能的作用机制。结果:1.临床研究:（1）四诊信息分布:2型糖尿病胰岛素抵抗频数分布居前十位的症状有:麻木不仁91例（75.83%）,口干渴71例（59.17%）,乏力70例（58.33%）,失眠62例（51.67%）,视物模糊57例（47.50%）,夜尿频数48例（40.00%）,关节刺痛46例（38.33%）,头晕43例（35.83%）,胸部闷痛42例（35.00%）,心悸40例（33.33%）;舌象以舌暗红、苔黄腻多见;脉象出现频率由高到低依次为:弦脉、沉脉、滑脉、数脉、细脉、涩脉、缓脉、微脉、弱脉。（2）聚类分析结果:所聚4类中医证型分别为肝胃郁热证、痰瘀热结证、气阴亏虚证、阴阳两虚证。各证型分布情况为:肝胃郁热证35例（29.90%）,痰瘀热结证55例（47.00%）,气阴亏虚证17例（14.55%）,阴阳两虚证10例（8.55%）。另外,有3例患者的中医辨证无法纳入到上述四种证型之中。（3）不同证型组之间的临床指标比较:（1）从各组病程可以看出,肝胃郁热证型组病程最短,与其它三型相比有统计学意义（P<0.01）;阴阳两虚证型组病程长于痰瘀热结型和气阴亏虚型,差异有统计学意义（P<0.01）。（2）在各中医证型组中,痰瘀热结证型组HOMA-IR值最高,与另外三证型组进行比较,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;阴阳两虚证型组HOMA-IR值最低,与气阴亏虚组相比有明显统计学差异（P<0.01）,但与肝胃郁热组相比无统计学差异（P>0.05）。（3）在各中医证型组中,痰瘀热结证型组BMI、Hb A1c最高,和另外三证型组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。（4）TG、LDL水平按肝胃郁热、阴阳两虚、气阴亏虚、痰瘀热结组依次升高,而CHOL水平则按阴阳两虚、肝胃郁热、气阴亏虚、痰瘀热结组依次升高,其中,痰瘀热结证型组TG、CHOL、LDL水平最高,明显高于其它组别,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。（5）在肝胃郁热证型组中,TG、LDL与HOMA-IR呈正相关（分别r=0.43,P<0.05;r=0.26,P<0.05）。在痰瘀热结证型组中,BMI、Hb A1c、TG、CHOL、LDL与HOMA-IR均呈正相关（分别r=0.45,P<0.05;r=0.31,P<0.05;r=0.52,P<0.05;r=0.38,P<0.05;r=0.43,P<0.05）。在气阴亏虚和阴阳两虚证型组中,BMI、Hb A1c、TG、CHOL、LDL与HOMA-IR均无明显相关性,P>0.05。2.实验研究:（1）与生理盐水输注组相比,由于脂肪乳的输注,脂肪乳组和脂肪乳+Gyp-XLIX组中的血浆游离脂肪酸（FFA）含量明显地升高。（2）相比于生理盐水输注,脂肪乳输注明显降低了稳态葡萄糖输注率（SSGIR）（P<0.001）,表明了胰岛素抵抗模型的建立,然而相对于脂肪乳组,脂肪乳+Gyp-XLIX组中的SSGIR明显地升高（P<0.01）,说明Gyp-XLIX能缓解脂肪乳引起的胰岛素抵抗。（3）在肝脏和肌肉组织中,Gyp-XLIX能明显减轻脂肪乳输注引起的胰岛素受体底物1（IRS1）丝氨酸307（Ser307）位点磷酸化表达的升高,以及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）P85位点和蛋白激酶B（Akt）473位点磷酸化表达的降低,表明Gyp-XLIX能够减轻脂肪乳对胰岛素信号通路的破坏作用。（4）在肝脏和肌肉组织中,Gyp-XLIX能明显减弱脂肪乳输注引起的κB抑制蛋白α（IκBα）磷酸化过表达及其泛素化降解和核因子κB（NF-κB）核移位,表明Gyp-XLIX降低了脂肪乳激发的IκBα/NF-κB信号通路的传递活性。（5）脂肪乳的输注使得肝组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的m RNA表达明显地升高,也使得肌肉组织中TNF-α和白介素-1β（IL-1β）的m RNA表达显着增加,另外,由于脂肪乳的输注,肝组织中IL-1β和肌肉组织中IL-6的m RNA表达相对于生理盐水组,也有增加的趋势,但是没有统计学差异,然而Gyp-XLIX能够明显降低这些炎症细胞因子转录水平表达的升高。结论:1.临床研究:胰岛素抵抗被公认为是2型糖尿病的关键病理特征,是引起2型糖尿病发生和导致其进展的重要因素,因此要尽早地针对胰岛素抵抗予以干预和治疗,以防迁延生变。根据我们的研究,2型糖尿病胰岛素抵抗可以划分为肝胃郁热、痰瘀热结、气阴亏虚、阴阳两虚这四大证型,不同证型的症状表现不一,轻重缓急亦各有差异。其病因病机演变规律可以大致归纳为早期气机不畅,郁热不解,继则酿痰生瘀,留恋不祛,久之戕害元气,耗气伤阴,终则阴损及阳,阴阳俱虚。我们在临床上既要“宏观辨证”,根据患者的临床症状,包括舌脉之表现,按照传统中医学基本理论,先确立其相应中医证型,在此基础之上,还要“微观辨证”,基于患者的临床指标,再结合其体质、病程、发病年龄等各方面因素,综合考虑治疗方案的实施。2.实验研究:Gyp-XLIX能明显改善脂肪乳静脉输注引起的胰岛素抵抗和减轻脂肪乳对胰岛素信号通路（IRS1/PI3K/Akt）的破坏,进一步研究发现,Gyp-XLIX的这一有益效应可能与其能够减轻脂肪乳引起的肝脏和肌肉组织的局部炎症反应有关。3.辨证论治是中医学之精髓,通过临床部分的研究,我们对2型糖尿病胰岛素抵抗的中医证型分类标准作了深入的探讨,为其临床辨证施治提供了科学依据。辨病论治是辨证论治的补充和完善,实践经验告诉我们,对于2型糖尿病胰岛素抵抗的治疗,若能在传统辨证论治、随证遣药基础之上,适当加用一些具有明确改善胰岛素抵抗作用的药物,做到辨证论治与辨病论治相结合,中西优势互补,可以在临床上相得益彰,进而大大增加临床疗效。通过实验部分的研究,我们初步证实了Gyp-XLIX作为胰岛素抵抗改善药物的可行性,为全面认识中药绞股蓝的药理作用,以及改善胰岛素抵抗药物的开发提供了新的见解和思路。
谢方洲[6]（2020）在《三配基PTP1B抑制剂的设计、合成及生物活性研究》文中提出蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）自发现以来就一直被认为是一个非常有前景的治疗II型糖尿病和肥胖症的潜在靶点。近二十余年来,有关PTP1B抑制剂的研究取得了很大进展,涌现出大量具有新颖结构的PTP1B抑制剂。但是,由于PTP1B与PTPs家族其余蛋白如T细胞蛋白酪氨酸磷酸酶（TCPTP）和一种含有SH2结构域的酪氨酸蛋白磷酸酶（SHP2）等在催化活性位点具有高度的同源性,导致目前发现的PTP1B抑制剂的选择性都不够理想。此外,这些PTP1B抑制剂大多还有着生物利用度不足,细胞透膜率差等缺陷。因此,开发具有高选择性和良好细胞透膜率的新型PTP1B抑制剂具有很好的发展空间和研究前景。对于PTP1B抑制剂存在的这两大问题,我们通过调研文献、详细解析PTP1B的结构特征以及结合本课题组的前期研究成果,首先设计并合成两端为苯乙烯磺酸酯,第三端用不同长度的链来连接疏水基团,同时母核还具有光学活性的新型三配基抑制剂。其次,我们还会结合其他种类的p Tyr类似物,设计合成一端为苯乙烯磺酸酯,一端为水杨酸,第三端为疏水基团的三配基抑制剂。在综合考虑手性以及不同p Tyr类似物的影响后,我们期望能够得到一类活性好、选择性高及生物利用度好的新型三配基PTP1B抑制剂。首先,我们以二苯乙烯磺酸酯药效团为基础,以吡咯烷作为母核并引入第三个疏水侧链,构建了一系列新型并具有光学活性的吡咯烷类三配基PTP1B抑制剂。此系列抑制剂总共有74个化合物,可分为顺式以及反式两大类型。从化合物的蛋白活性数据来看,反式异构体Ⅰ-A系列化合物的活性明显优于顺式异构体Ⅰ-B系列化合物,说明不同的光学异构体对活性有很大的影响。从选择性来看,光学异构也影响选择性;反式异构体Ⅰ-A系列化合物的选择性明显优于顺式异构体Ⅰ-B系列化合物。计算机模拟实验从分子与蛋白的相互作用这一角度解释了反式异构体Ⅰ-A系列化合物活性和选择性均高于顺式异构体Ⅰ-B系列化合物的原因。对于活性和选择性最佳的化合物11-17,我们还进行了一系列生物实验。细胞实验显示其具有细胞毒性低以及较好的降糖作用等特点,并从细胞水平证明了其对PTP1B的抑制能力以及对胰岛素通路的激活能力,平行人工膜实验也显示出其具有较好的透膜能力,是一类优秀的针对PTP1B靶点的化合物。在上一部分的研究中,活性最佳的化合物11-17相对于先导化合物,其活性提高的程度较少,虽然选择性提高一倍,但仍然不够高。因此,我们打算从其他方面来对本课题组前期发现的先导化合物进行优化和改进。我们考虑到PTP1B中各个结合位点结构的差异,设计出一端为苯乙烯磺酸酯,另一端为其他p Try类似物的三配基PTP1B抑制剂,期望能进一步提高抑制剂的活性及选择性。因此,我们从先导化合物Ⅱ-9（图3-1,第三章）出发,构建了五大系列共计74个化合物。在这五大系列化合物当中,Ⅱ-B系列化合物的活性最佳。在后续的选择性以及平行人工膜渗透实验中,Ⅱ-B系列化合物显示出优秀的选择性以及良好的透膜能力,酶动力学实验说明此类化合物是与底物相竞争的竞争性抑制剂。对于Ⅱ-B系列中选择活性及选择性最佳的化合物30-3,我们还对其进行了一系列实验。计算机模拟实验表明化合物30-3可以与PTP1B的多个位点相互作用,使得其具有高活性与高选择性的特征。进一步的生物实验也证明化合物30-3具有毒性低以及较好的降糖作用等特点。综上所述,本论文所设计并合成的三配基PTP1B抑制剂,能够比较好地解决当前PTP1B抑制剂存在的选择性低和细胞透膜率差的问题。其中优选的化合物11-17和30-3在生物实验中显示出较好的降糖作用,具有进一步开发和利用的价值。
宋姗姗[7]（2020）在《电针调控T2DM大鼠骨骼肌IRS-1磷酸化改善胰岛素抵抗的机制研究》文中认为[意义]糖尿病是由遗传和环境因素共同作用而导致的内分泌系统的代谢性疾病,2型糖尿病占发病人群的90%以上。随着经济发展、生活水平提高以及生活方式的改变,肥胖人群糖尿病患病率显着增加。胰岛素抵抗作为2型糖尿病发病的重要机制,表现为外周组织器官对胰岛素敏感性降低。而骨骼肌是胰岛素最重要的外周靶器官,是胰岛素介导摄取、利用葡萄糖的重要组织,血循环中80%的葡萄糖均由骨骼肌摄取并代谢,因而对骨骼肌胰岛素抵抗的机理研究尤为关键。由于现有降糖药均具有一定副作用和不良反应,针灸则被大量文献证实可有效干预2型糖尿病。因此,本实验旨探究电针降低血糖、改善骨骼肌胰岛素抵抗的起效机制,对肥胖型2型糖尿病的研究具有重要意义。[目的]1.观察电针对2型糖尿病肥胖大鼠血糖、体重、瘦素、胰岛素、C肽、血脂等指标的影响,从而探讨电针干预2型糖尿病的可能机制。初步验证电针对2型糖尿病大鼠血糖的调控作用,检测电针是否能有效改善2型糖尿病胰岛素抵抗。2.探讨电针是否可以调整骨骼肌胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate-1,IRS-1）酪氨酸磷酸化和丝/苏氨酸磷酸化之间的平衡,促进下游磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidyl inositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt）信号转导通路的传导,上调骨骼肌葡萄糖转运体4（glucosetransponer4,GLUT4）蛋白表达,达到降低血糖,改善胰岛素抵抗的作用。观察电针对2型糖尿病大鼠骨骼肌IRS-1磷酸化水平的影响,以Western blot法观察电针干预后骨骼肌细胞中IRS-1酪氨酸磷酸化与丝氨酸磷酸化水平的调控作用,评价电针对T2DM大鼠骨骼肌IRS-1磷酸化的调控作用。同时,检测骨骼肌PI3K蛋白表达。在此基础上,研究对骨骼肌胰岛素信号通路的终端指标GLUT4进行检测,从而探讨电针干预2型糖尿病的可能机制。[方法]选用7只2月龄SPF级雄性ZL（Zucker Lean）大鼠（fa/+）,以及14只同月龄SPF级雄性ZDF（Zucker Diabetic Fatty）大鼠（fa/fa）为实验对象。适应性饲养1周后,全部大鼠进行4周高糖高脂诱导饲料喂养,动物自由饮食水。诱导饲养4周后,以空腹血糖及OGTT2h血糖均>11.1mmol/L为成模标准。将成模后的14只ZDF大鼠随机分为模型组、电针组,每组各7只;另将7只ZL大鼠设立为空白组。空白组及模型组不进行干预。电针组针刺双侧足三里、三阴交、脾俞、胃脘下俞,直刺深度4-6mm,连通电针仪（电针一端连接于胃脘下俞,一端连接同侧足三里,形成回路）,连续波,频率15Hz,电流输出强度2mA,以大鼠肌肉轻微抖动而无嘶叫为宜,留针25min,每周6次（周一至周六）,连续干预4周。于造模前、造模后、干预第4周周末检测空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）和体重。4周后取血清,以比色法检测甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平、极低密度脂蛋白等血脂指标;观察血清瘦素、胰岛素、C肽水平。冰浴状态下取大鼠部分骨骼肌组织,以Western Blot法检测IRS-1酪氨酸与丝/苏氨酸磷酸化的水平;观察骨骼肌PI3K及全细胞GLUT4水平。[结果]实验一:干预第4周后,电针组比模型组空腹血糖低,差异有统计学意义（P<0.05）。组内比较可见,电针组、模型组空腹血糖在造模后和干预后均高于造模前,差异有统计学意义（P<0.05）;电针组在造模后和干预后空腹血糖之间无明显差异（P>0.05）,而模型组4周后空腹血糖值较造模前明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）。电针组虽然干预后血糖与造模后未有明显变化,但从模型组的血糖变化趋势来看,在造模后的四周内,血糖是持续上升的,显示电针干预对血糖的上升是有抑制作用的。另外,比较干预后与造模后血糖差值可见:电针组与空白组相比空腹血糖差值无明显差异（P>0.05）;电针组空腹血糖增值明显低于模型组（P<0.05）,显示电针可以有效控制2型糖尿病肥胖大鼠血糖。电针组比模型组体重增加值低,显示电针可控制2型糖尿病肥胖大鼠的体重变化。电针组比模型组血清瘦素水平有所下降,显示电针可改善2型糖尿病肥胖大鼠脂代谢情况。电针组比模型组总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇值均有所下降,但差异无统计学意义（P>0.05）;电针组比模型组血清甘油三酯水平低,差异有统计学意义（P<0.05）。可见电针可降低2型糖尿病肥胖大鼠血清血脂水平,尤以甘油三酯水平为优。电针组比模型组血清胰岛素水平低,差异有统计学意义（P<0.05）。电针组比模型组C肽水平低,但差异无统计学意义（P>0.05）,比较均值评分显示模型组大于电针组,电针组大于空白组。显示电针可降低2型糖尿病肥胖大鼠血清胰岛素水平,在一定程度上可降低C肽水平。比较胰岛素抵抗指数可见,电针组胰岛素抵抗指数比模型组低,差异有统计学意义（P<0.05）,显示电针可缓解2型糖尿病肥胖大鼠的胰岛素抵抗情况。实验二:电针组比模型组IRS-1丝/苏氨酸磷酸化水平低,差异有统计学意义（P<0.05）,电针组与空白组之间无明显差异（P>0.05）。比较三组IRS-1酪氨酸895磷酸化位点水平显示,电针组比模型组磷酸化表达量最高,差异有统计学意义（P<0.05）,空白组与电针组之间无明显差异（P>0.05）。显示电针可提高大鼠骨骼肌IRS-1酪氨酸磷酸化表达,调节IRS-1磷酸化之间的平衡来缓解骨骼肌胰岛素抵抗。电针组比模型组PI3K p85蛋白表达升高,两组之间有明显差异（P<0.05）,电针组与空白组两组之间无明显差异（P>0.05）。显示电针可以提高糖尿病大鼠骨骼肌PI3K p85的蛋白表达。电针组与空白组、模型组相比,GLUT4蛋白表达水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）,空白组、模型组之间无明显差异（P>0.05）,显示电针可提高大鼠骨骼肌葡萄糖蛋白的表达。[结论]电针可降低2型糖尿病肥胖大鼠血糖、血脂水平,降低胰岛素、C肽水平,控制大鼠体重、降低瘦素水平,从而改善其胰岛素抵抗状况,缓解2型糖尿病肥胖大鼠糖、脂代谢异常。同时电针可上调骨骼肌GLUT4蛋白表达水平,从而改善其胰岛素抵抗状况,究其机制与电针调节IRS-1磷酸化之间的平衡,提高PI3K蛋白表达水平,调控下游PI3K通路活性有关。
吴崇超[8]（2019）在《IRTKS调控胰岛素信号通路作用机制的研究》文中认为背景和目的:胰岛素信号通路调控葡萄糖代谢,蛋白质合成,细胞增殖和分化。胰岛素受体酪氨酸激酶底物（IRTKS,insulin receptor tyrosine kinase substrate）是一个新的胰岛素信号通路中的调控分子,但是调控胰岛素信号转导的具体分子机制仍然不是很明确。含SH2结构域的肌醇磷酸酶（SHIP2,Src homology（SH2）containing inositol polyphosphate5-phosphatase-2）是IRTKS的潜在结合分子,SHIP2可水解PI（3,4,5）P3,调节PI（3,4,5）P3的水平,参与胰岛素信号调控。为此我们揭示IRTKS与SHIP2的相互作用关系,同时明确IRTKS与SHIP2的相互作用调控胰岛素信号通路的作用机制,进一步深入阐明IRTKS对胰岛素信号通路的调控机制。方法:利用激光共聚焦显微镜和免疫共沉淀方法明确IRTKS和SHIP2在细胞内的共定位和相互作用;构建一系列的截短体,利用GST pull-down和免疫沉淀等方法进一步确定IRTKS和SHIP2的相互作用的结构域。利用孔雀绿实验检测过表达或者干扰IRTKS对SHIP2酶活性的影响。同时利用蛋白质免疫印迹方法、CCK-8、克隆形成等实验方法探索IRTKS和SHIP2的相互作用对胰岛素信号通路的影响。结果:通过共聚焦显微镜发现IRTKS和SHIP2在细胞中存在共定位现象;利用免疫共沉淀方法证实IRTKS和SHIP2在小鼠肝脏、肾脏、胚胎成纤维细胞MEF和人肝癌细胞系（HepG2、SK-Hep-1和Huh7）中具有相互作用;利用GST pull-down和免疫沉淀实验证实IRTKS结构中SH3的结构域和SHIP2分子IPP5c的结构域是二者结合的关键区域;另外,发现在多个细胞中过表达IRTKS可以抑制SHIP2的酶活性,同时沉默IRTKS的表达可增强SHIP2的酶活性;IRTKS-KO MEF细胞中恢复IRTKS的水平,SHIP2的酶活性也呈现出相应的变化趋势;利用体外的酶活性实验发现IRTKS可显着抑制SHIP2的酶活性;此外IRTKS与SHIP2共表达可调节胰岛素信号转导,过表达IRTKS可抑制SHIP2酶活性,增加PI（3,4,5）P3的水平,激活Akt,促进细胞增殖,从而促进胰岛素信号的传递。IRTKS通过抑制SHIP2的酶活性从而促进胰岛素信号传递,进一步揭示了胰岛素信号传递的作用机制,补充了对二型糖尿病的发病机制的认识,为今后临床上治疗糖尿病,药物开发提供了新的理论基础。
马瑞[9]（2019）在《西格列汀对新诊断2型糖尿病降糖疗效评估及影响西格列汀降糖疗效的机制研究》文中认为目的:对新疆医科大学第一附属医院就诊的新诊断的2型糖尿病患者相关人口学特征进行分析,评价西格列汀对新诊断2型糖尿病的降糖疗效。针对西格列汀治疗人群血糖控制情况进行分析,发现西格列汀对不同糖尿病病患的降糖疗效存在个体差异。为探讨西格列汀在新诊断2型糖尿病中发挥降糖疗效存在个体差异的原因,筛选差异基因并进行荧光定量PCR验证差异基因。进一步通过体外胰岛素抵抗细胞模型,探寻西格列汀发挥降糖作用的作用机制,为指导糖尿病患者合理、有效用药提供科学依据。方法:采用随机对照实验,研究对象收集时间自2016年3月至2018年12月,期间就诊的新疆医科大学第一附属医院内分泌科的住院、门诊患者以及新疆医科大学第一附属医院体检中心筛查的新诊断的2型糖尿病患者共232例,随机分为西格列汀治疗组及二甲双胍治疗组。收集研究对象的个人史、既往史,测量身高、体重、腰围、臀围和血压,进行糖代谢、脂代谢、颈部内膜情况、脂肪肝情况检测。相关资料通过SPSS22.0工具软件完成运算和统计研究。连续变量采用均值±标准差来描述,不同小组之间的对比分析需要运用到独立样本t检验,小组内部对比分析运用到配对样本的t检验方式。分类变量采用频数和百分数进行描述,采用卡方检验或Fisher确切概率法进行统计推断。P<0.05为差别有统计学意义。分析不同性别糖尿病患者一般资料及临床指标差异,比较治疗12周后西格列汀及二甲双胍对新诊断2型糖尿病降糖疗效及相关临床指标的作用。然后在西格列汀治疗组中抽取年龄30-40岁的,性别、年龄匹配的患者共8例,以治疗后糖化血红蛋白降幅<0.4%为疗效欠佳组,降幅>0.9%为疗效显着组,每组各4例（各2男2女）进行转录组高通量测序发现差异表达水平的基因,之后抽取疗效欠佳、疗效显着组性别、年龄匹配的患者共40例（每组20例）针对高通量测序发现的差异水平基因进行RT-PCR验证,得到差异基因。再通过建立体外胰岛素抵抗细胞模型,通过设置不同分组,观察胰岛素抵抗细胞模型、SOCS3沉默组、西格列汀药物治疗组和SOCS3沉默+西格列汀药物治疗组对葡萄糖消耗量以及糖原含量的影响,为探讨西格列汀通过SOCS3/PI3K/AKT通路在降糖作用机制中的效应,采用qRT-PCR方法检测SOCS3、AKT、GSK-3β基因表达水平,WB检测SOCS3、AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达水平,从而探寻影响西格列汀降糖疗效的机制。结果:1.西格列汀降糖疗效分析新诊断的2型糖尿病,在使用西格列汀治疗后,糖化血红蛋白、糖化血清蛋白、空腹血糖、餐后2h血糖、甘油三酯和尿素氮均较治疗前降低。二甲双胍组治疗后,糖化血红蛋白、糖化血清蛋白、空腹血糖、餐后2h血糖、胰岛素、homaIR、甘油三酯、直接胆红素、非直接胆红素、肌酐、估算肾小球滤过率均较治疗前降低,高密度脂蛋白较治疗前升高。单药降糖治疗3月后,西格列汀组对餐后2h血糖控制效果优于二甲双胍组,西格列汀组糖化血红蛋白、总胆红素、非直接胆红素和门冬氨酸氨基转移酶（U/L）均高于二甲双胍组。在基线糖化血红蛋白无差异的2型糖尿病患者中,使用西格列汀治疗三月后糖化血红蛋白降幅存在个体差异,特点为体重指数较低的患者糖化血红蛋白降低程度相对明显。说明西格列汀降糖作用在不同糖尿病患病人群中存在个体差异。2.西格列汀疗效差异病例转录组高通量测序及RT-PCR验证结果西格列汀治疗3月后,转录组高通量测序发现降糖作用疗效显着组、疗效欠佳组存在差异基因:GHRL、IGF1R、MAPK3、PIK3CD、SOCS3。RT-PCR验证:西格列汀疗效显着组、疗效欠佳组GHRL基因无差异;西格列汀疗效显着组IGF1R基因表达显着升高,P值0.034,MAPK3表达显着降低,P值0.002,SOCS3基因表达显着降低,P值0.000。PIK3CD表达降低,但无差异。3.体外胰岛素抵抗细胞模型分析西格列汀对SOCS3/PI3K/AKT通路的影响SOCS3基因在胰岛素抵抗模型组和胰岛素抵抗模型+siRNA-NC组表达显着升高,经药物西格列汀干预后,表达有所下降。模型组AKT经qRT-PCR检测无显着性变化,而AKT、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达显着降低。经药物干预或沉默SOCS3后,SOCS3蛋白显着降低,说明西格列汀可通过下调SOCS3水平来改善胰岛素抵抗,发挥降糖作用。结论:1.西格列汀组对餐后2h血糖控制效果优于二甲双胍组,西格列汀组糖化血红蛋白、总胆红素、非直接胆红素和门冬氨酸氨基转移酶均高于二甲双胍组。西格列汀组治疗后血糖、血脂水平较治疗前降低。二甲双胍组治疗后血糖、胰岛素抵抗情况、血脂较治疗前有所改善。在基线糖化血红蛋白无差异的2型糖尿病患者中,使用西格列汀治疗三月后糖化血红蛋白降幅存在个体差异,特点为体重指数较低的患者糖化血红蛋白降低程度相对明显。说明西格列汀降糖作用在不同糖尿病患病人群中存在个体差异。2.西格列汀疗效显着组IGF1R基因表达显着升高,MAPK3表达显着降低,SOCS3基因表达显着降低。3.体外胰岛素抵抗细胞模型发现,SOCS3基因在胰岛素抵抗模型组和胰岛素抵抗模型+siRNA-NC组表达显着升高,经药物西格列汀干预后,表达有所下降。模型组AKT、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达显着降低。经西格列汀干预或沉默SOCS3后,SOCS3蛋白显着降低,说明西格列汀可通过下调SOCS3水平来改善胰岛素抵抗,发挥降糖作用。
杨潇[10]（2019）在《小分子腺嘌呤核苷酸介导的胰岛素抵抗和高血糖形成机制》文中提出2型糖尿病是一种复杂的慢性疾病,在全球范围内引起了广泛的重视。糖尿病的发病率逐年上升,目前已成为重要的公共健康问题之一。肥胖引起的游离脂肪酸（Free fatty acids,FFA）水平上升是产生2型糖尿病的一大危险因素。之前的研究发现,血浆中腺嘌呤核苷酸5’-AMP含量的上升是2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗和高血糖的上游信号;在野生型小鼠中强化5’-AMP信号能够引起胰岛素抵抗和高血糖;FFA引起的细胞损伤是糖尿病血浆中5’-AMP上升的原因之一;强化5’-AMP信号能够引起肝脏和肌肉腺苷含量的上升,抑制胰岛素作用下的胰岛素受体磷酸化,导致胰岛素抵抗。然而腺嘌呤核苷酸引起高血糖的机制还需要深入研究。首先,本研究发现2型糖尿病模型小鼠肝脏中ATP以及腺嘌呤核苷酸代谢产物的含量较正常小鼠显着上升。通过代谢组的方法,发现db/db糖尿病小鼠和注射5’-AMP的野生型小鼠肝脏中代谢物含量的变化具有相似性。ATP、腺苷、次黄嘌呤、黄嘌呤和尿酸的含量在db/db小鼠和注射5’-AMP的小鼠肝脏中显着上升;在其他2型糖尿病模型小鼠的肝脏中观察到类似结果。然而在未形成高血糖的肥胖小鼠肝脏中,仅检测到了腺苷含量的显着上升。这些结果表明,肝脏中ATP和腺嘌呤核苷酸代谢产物含量的上升是2型糖尿病的重要特征。发现2型糖尿病小鼠血浆中5’-AMP和腺嘌呤核苷酸代谢产物的含量显着上升。与正常小鼠相比,血浆中5’-AMP的含量在db/db鼠和高脂（High fat,HF）加链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导的2型糖尿病小鼠中显着上升（db/db vs lean:13.9±2.3μmol/L vs 3.7±0.9μmol/L,p<0.01;HF+STZ vs CK:6.6±1.5μmol/L vs 4.1±0.9μmol/L,p<0.05）;次黄嘌呤、黄嘌呤和尿酸在血浆中的含量也是显着上升的。在未形成高血糖的肥胖小鼠血浆中仅观察到尿酸含量的显着上升。增加野生型小鼠血浆中FFA的含量可以观察到血浆中腺嘌呤核苷酸代谢产物含量的上升。正常小鼠注射5’-AMP会引起糖耐量的下降。血糖和血浆中腺嘌呤核苷酸代谢产物的含量与注射5’-AMP的剂量正相关:低剂量下,与对照组相比,仅观察到小鼠糖耐量的受损和血浆中尿酸含量的显着上升;高剂量下小鼠出现明显高血糖（20.7±2.8 mmol/L vs 7.7±0.8 mmol/L,p<0.01）,血浆中腺嘌呤核苷酸和代谢产物的含量也显着上升。发现FFA是引起胞外腺嘌呤核苷酸含量上升的重要原因。FFA诱导血管内皮细胞短时间内释放核苷酸,这种现象早于凋亡的发生。格列本脲可以抑制这种释放作用。格列本脲是囊性纤维化跨膜传导调节因子和体积调节性阴离子通道的抑制剂,说明这两种通道可能参与了游离脂肪酸诱导的核苷酸释放。另外,FFA可以降低红细胞对过氧化氢的降解能力。过氧化氢的累积可以诱导红细胞释放腺嘌呤核苷酸。5’-AMP可以引起的肝细胞内pH的下降,提高酪氨酸磷酸酶PTP1B的活性。5’-AMP和腺苷可以引起培养的肝细胞内ATP和腺嘌呤核苷酸代谢产物含量上升。腺苷酸代谢产物次黄嘌呤、黄嘌呤和尿酸可以抑制Na+/K+-ATPase的活性,导致细胞内ATP含量的上升。体外实验表明,ATP可以显着提高PTP1B的活性。PTP1B是胰岛素信号负调控的关键酶,该酶活性的加强会抑制胰岛素信号。ATP作用下的反应体系pH的下降是PTP1B活性上升的主要原因。5’-AMP可以引起培养的肝细胞内pH的下降。5’-AMP、次黄嘌呤、黄嘌呤以及尿酸抑制了Na+/H+交换体的活性,削弱了细胞对胞内pH的调节能力。二甲双胍可以引起胞内pH的上升,抑制PTP1B的活性。提前用二甲双胍处理小鼠可以改善5’-AMP引起的胰岛素抵抗。HPLC结果显示,灌胃二甲双胍显着的降低db/db和注射5’-AMP的小鼠肝脏中ATP和腺苷的含量,但是对次黄嘌呤、黄嘌呤以及尿酸的含量没有明显影响。体外实验发现,阳离子化的二甲双胍可以通过提高反应体系的pH抑制PTP1B的活性。二甲双胍可以短时间内引起培养的肝细胞pH的上升。这为二甲双胍的降血糖作用提出了一个新的潜在机制。最后,发现了腺嘌呤核苷酸参与介导了肥胖引起的睾丸代谢紊乱。与正常小鼠相比,腺苷在ob/ob、db/db和高脂诱导的肥胖小鼠睾丸中显着上升（ob/ob vs lean:36.8±12.4nmol/g protein vs 20.8±3.9 nmol/g protein,p<0.05;db/db vs lean:36.1±19.5 nmol/g protein vs 16.7±2.3 nmol/g protein,p<0.05;HF vs CK:26.9±5.17 nmol/g protein vs 20.2±3.5 nmol/g protein,p<0.05）。野生型小鼠注射5’-AMP后有相似的变化（49.8±23.6nmol/g protein vs 20.9±2.7 nmol/g protein,p<0.05）。注射5’-AMP削弱了小鼠睾丸中激素代谢相关基因表达水平,并且血清中睾酮水平显着下降（235±30 ng/d L vs 328±44ng/d L,p<0.01）。代谢组分析结果表明,注射5’-AMP小鼠睾丸与不育的ob/ob小鼠睾丸具有相似的代谢轮廓并且代谢物含量的变化具有相似性。AKT/mTOR影响雄性小鼠的精子发生,在ob/ob和5’-AMP注射小鼠睾丸中AKT/mTOR的磷酸化水平下降。睾丸中腺苷含量的上升介导了肥胖小鼠睾丸的代谢紊乱。
二、Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织胰岛素受体底物1和含2个SH_2结构的蛋白酪氨酸磷酸酶的蛋白表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织胰岛素受体底物1和含2个SH_2结构的蛋白酪氨酸磷酸酶的蛋白表达（论文提纲范文）
（1）SHP2抑制剂的发现研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 蛋白酪氨酸磷酸酶家族 |
| 1.2 SHP2 的结构与功能 |
| 1.3 SHP2 突变引发的疾病与抑制剂研究进展 |
| 1.4 SHP1 结构、功能和抑制剂研究进展 |
| 第2章 SHP2和SHP1 蛋白表达与纯化 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 质粒和菌株 |
| 2.2.2 主要实验试剂 |
| 2.2.3 主要实验仪器和耗材 |
| 2.2.4 载体构建 |
| 2.2.5 目的蛋白的表达 |
| 2.2.6 目的蛋白的纯化 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 SHP2 蛋白的纯化及鉴定 |
| 2.3.2 SHP1 蛋白的纯化及鉴定 |
| 2.4 小结与讨论 |
| 第3章 靶向SHP2 抑制剂的筛选与作用机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 实验仪器与试剂 |
| 3.2.2 高通量抑制剂筛选方法 |
| 3.2.3 蛋白热迁移实验(Thermal shift assay,TSA) |
| 3.2.4 分子对接(Docking) |
| 3.3 实验结果与讨论 |
| 3.3.1 针对老药库的抑制剂筛选结果 |
| 3.3.2 化合物的选择性测试 |
| 3.3.3 化合物与SHP2 的结合验证 |
| 3.3.4 化合物与蛋白结合模式探究 |
| 3.4 小结与讨论 |
| 第4章 SHP2 蛋白晶体的结构解析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 实验仪器与试剂 |
| 4.2.2 蛋白晶体培养 |
| 4.2.3 蛋白晶体数据收集和结构解析 |
| 4.3 蛋白晶体条件筛选与结构解析 |
| 4.3.1 蛋白晶体条件筛选 |
| 4.3.2 SHP2 晶体结构解析 |
| 4.4 小结与讨论 |
| 第5章 总结与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 酪氨酸磷酸酶相关疾病及抑制剂研究进展 |
| 参考文献 |
（2）“昆南素”辅助降血糖固体饮料的作用机制及降糖效果研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 糖尿病 |
| 1.1.1 糖尿病简介 |
| 1.1.2 血糖调节 |
| 1.1.3 胰岛素和胰岛素受体 |
| 1.1.4 GLUT4 |
| 1.1.5 类胰岛素和胰岛素增敏作用 |
| 1.2 PTP1B |
| 1.2.1 蛋白质酪氨酸磷酸酶 |
| 1.2.2 PTP1B |
| 1.3 PTP1B与糖尿病的关系 |
| 1.3.1 胰岛素信号通路(Insulin signaling pathway,ISP) |
| 1.3.2 PTP1B在胰岛素信号通路中作用 |
| 1.3.3 PTP1B与 T1DM的关系 |
| 1.3.4 T2DM的治疗方法 |
| 1.4 固体饮料和本文所用主要原料简介 |
| 1.4.1 固体饮料 |
| 1.4.2 昆布 |
| 1.4.3 南瓜籽 |
| 1.4.4 山药 |
| 1.5 实验模型 |
| 1.5.1 3T3-L1 细胞 |
| 1.5.2 糖尿病小鼠模型 |
| 1.6 立题依据 |
| 第2章 昆南素对PTP1B的抑制作用 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 溶液配方 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 昆南素的制备 |
| 2.2.2 昆南素对PTP1B抑制作用的测定 |
| 2.2.3 昆南素对PTPs家族其他成员的抑制作用 |
| 2.2.4 IC_(50)(半数抑制浓度)的测定 |
| 2.3 实验结果与讨论 |
| 2.3.1 昆南素对PTP1B的抑制作用 |
| 2.3.2 昆南素对PTPs家族其他成员的抑制作用 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 昆南素对胰岛素信号通路的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验仪器 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验对象 |
| 3.1.4 主要培养基和溶液的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞复苏和传代培养 |
| 3.2.2 3T3-L1 细胞的诱导分化 |
| 3.2.3 油红O染色 |
| 3.2.4 昆南素处理细胞 |
| 3.2.5 3T3-L1 细胞总蛋白的提取 |
| 3.2.6 昆南素对细胞内总蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响 |
| 3.2.7 昆南素对胰岛素信号通路的影响 |
| 3.2.8 昆南素对GLUT4 分布情况的影响 |
| 3.2.9 数据统计 |
| 3.3 实验结果与讨论 |
| 3.3.1 油红O染色结果 |
| 3.3.2 昆南素对细胞内总蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响 |
| 3.3.3 昆南素对胰岛素信号通路的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 昆南素对糖尿病小鼠的降血糖作用研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验仪器 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验动物、饲料及饲养环境 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 受试物剂量选择、配制及给予方式 |
| 4.2.2 正常动物降糖实验 |
| 4.2.3 糖尿病模型降糖实验 |
| 4.2.4 糖耐量的测定 |
| 4.2.5 数据处理 |
| 4.2.6 结果判定 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 昆南素对正常小鼠空腹血糖的影响 |
| 4.3.2 对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响 |
| 4.3.3 昆南素对高血糖模型小鼠糖耐量的影响 |
| 4.3.4 昆南素对高血糖模型小鼠甘油三酯的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 结论 |
| 5.1 昆南素对PTP1B的体外抑制作用 |
| 5.2 昆南素对胰岛素信号通路的影响 |
| 5.3 昆南素的降血糖作用 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（3）拐枣多糖的分离纯化和结构解析及其降血糖活性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 拐枣概述 |
| 1.1.1 拐枣资源概况 |
| 1.1.2 拐枣的营养与药用价值 |
| 1.1.3 拐枣资源的利用现状及存在的问题 |
| 1.2 拐枣多糖研究进展 |
| 1.2.1 拐枣多糖的提取与分离纯化 |
| 1.2.2 拐枣多糖的结构解析 |
| 1.2.3 拐枣多糖的生物活性 |
| 1.3 植物多糖研究进展 |
| 1.3.1 植物多糖简介 |
| 1.3.2 植物多糖的提取与分离纯化 |
| 1.3.3 植物多糖的结构解析 |
| 1.4 糖尿病概述 |
| 1.4.1 糖尿病的分类 |
| 1.4.2 糖尿病并发症 |
| 1.4.3 糖尿病的治疗现状 |
| 1.4.4 植物多糖在糖尿病治疗中的作用 |
| 1.5 糖尿病发病机制的研究进展 |
| 1.5.1 糖尿病的研究模型 |
| 1.5.2 1型糖尿病的发病机制 |
| 1.5.3 2型糖尿病的发病机制 |
| 1.6 立题背景和意义 |
| 1.7 研究内容和技术路线 |
| 1.7.1 研究内容 |
| 1.7.2 技术路线 |
| 参考文献 |
| 第2章 三种提取工艺对拐枣多糖的理化性质和结构特性及生物活性的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.2 分析方法 |
| 2.2.1 拐枣多糖样品总糖含量的测定 |
| 2.2.2 拐枣多糖样品蛋白质含量的测定 |
| 2.2.3 拐枣多糖样品糖醛酸含量的测定 |
| 2.2.4 拐枣多糖样品结构性质的测定 |
| 2.2.5 拐枣多糖样品对α-葡萄糖苷酶抑制率测定 |
| 2.2.6 拐枣多糖样品对Hep-G2胰岛素抵抗细胞葡萄糖摄取的测定 |
| 2.2.7 数据处理 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 三种提取工艺对拐枣多糖提取得率的影响 |
| 2.3.2 三种提取工艺对拐枣多糖化学成分组成的影响 |
| 2.3.3 三种提取工艺对拐枣多糖的单糖组成的影响 |
| 2.3.4 三种提取工艺对拐枣多糖分子量分布的影响 |
| 2.3.5 三种提取工艺对拐枣多糖红外光谱的影响 |
| 2.3.6 三种提取工艺对拐枣多糖热稳定性的影响 |
| 2.3.7 三种提取工艺对拐枣多糖的α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响 |
| 2.3.8 三种提取工艺对拐枣多糖的Hep-G2细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖摄取的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小节 |
| 参考文献 |
| 第3章 拐枣多糖的分离纯化和结构解析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 |
| 3.1.4 实验方法 |
| 3.2 分析方法 |
| 3.2.1 拐枣多糖纯化组分的纯度鉴定及分子量测定 |
| 3.2.2 理化性质分析 |
| 3.2.3 单糖组成分析 |
| 3.2.4 傅里叶红外光谱(FT-IR)分析 |
| 3.2.5 紫外光谱分析 |
| 3.2.6 高碘酸氧化和Smith降解 |
| 3.2.7 甲基化分析 |
| 3.2.8 核磁共振波谱(NMR)分析 |
| 3.2.9 原子力显微镜(AFM)分析 |
| 3.2.10 X衍射(XRD)分析 |
| 3.2.11 数据处理 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 拐枣多糖的分离纯化 |
| 3.3.2 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的纯度鉴定及其分子量测定 |
| 3.3.3 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的化学组成分析 |
| 3.3.4 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的溶解性分析 |
| 3.3.5 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的单糖组成分析 |
| 3.3.6 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的红外光谱分析 |
| 3.3.7 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的紫外光谱分析 |
| 3.3.8 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的高碘酸氧化 |
| 3.3.9 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的 Smith降解 |
| 3.3.10 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的甲基化分析 |
| 3.3.11 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的核磁共振分析 |
| 3.3.12 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的原子力显微镜分析 |
| 3.3.13 拐枣多糖纯化组分HDPs-2A的 X衍射分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小节 |
| 参考文献 |
| 第4章 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病的降糖效果及机制研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料与动物 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验设备与仪器 |
| 4.1.4 实验方法 |
| 4.2 分析方法 |
| 4.2.1 糖尿病大鼠血清指标测定 |
| 4.2.2 口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test,OGTT) |
| 4.2.3 肝糖原水平的测定 |
| 4.2.4 胰腺组织相关指标的测定 |
| 4.2.5 RNA提取和实时荧光定量分析 |
| 4.2.6 Western blotting实验 |
| 4.2.7 数据处理 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠体重的影响 |
| 4.3.2 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠血糖的调节作用 |
| 4.3.3 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠血清血脂水平的影响 |
| 4.3.4 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠胰腺相关指标的影响 |
| 4.3.5 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠血清炎症因子水平的影响 |
| 4.3.6 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠胰腺相关基因及蛋白的影响 |
| 4.3.7 拐枣多糖HDPs-2A对1型糖尿病大鼠肝脏糖代谢相关基因及蛋白的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小节 |
| 参考文献 |
| 第5章 拐枣多糖HDPs-2A对2型糖尿病的降糖效果及机制研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料与动物 |
| 5.1.2 实验试剂 |
| 5.1.3 实验设备与仪器 |
| 5.1.4 实验方法 |
| 5.2 分析方法 |
| 5.2.1 糖尿病大鼠血清指标测定 |
| 5.2.2 口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test,OGTT) |
| 5.2.3 肝脏相关指标的测定 |
| 5.2.4 粪便短链脂肪酸(Short chain fatty acid,SCFA)水平的测定 |
| 5.2.5 RNA提取和实时荧光定量分析 |
| 5.2.6 Western blotting实验 |
| 5.2.7 数据处理 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 拐枣多糖HDPs-2A对2型糖尿病大鼠体重的影响 |
| 5.3.2 拐枣多糖HDPs-2A对2型糖尿病大鼠血糖的调节作用 |
| 5.3.3 拐枣多糖HDPs-2A对2型糖尿病大鼠血清血脂水平的调节 |
| 5.3.4 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠血清胰岛素和相关指数及血清GLP-1 的影响 |
| 5.3.5 拐枣多糖HDPs-2A对2型糖尿病大鼠肝脏相关指标的影响 |
| 5.3.6 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)的影响 |
| 5.3.7 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠肝脏PI3K/Akt胰岛素信号通路的影响 |
| 5.3.8 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠肝脏AMPK介导相关信号通路的影响 |
| 5.3.9 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠肝脏GS/GSK-3β信号通路的影响 |
| 5.3.10 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠肝脏Fox O1 基因和蛋白表达的影响 |
| 5.3.11 拐枣多糖HDPs-2A对2 型糖尿病大鼠肝脏PPARγ/PGC-1α信号通路的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 本章小节 |
| 参考文献 |
| 第6章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 论文创新点 |
| 6.3 展望 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 攻读博士学位期间退修文章 |
（4）电针调控T2DM大鼠骨骼肌内质网应激IRE1/JNK改善胰岛素抵抗的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 针灸治疗2型糖尿病的治疗方法及作用机制研究进展 |
| 1 现代医学对2型糖尿病的认识 |
| 2 中医对2型糖尿病的认识 |
| 3 针灸治疗2型糖尿病的临床研究 |
| 4 针灸治疗2型糖尿病的实验机制研究 |
| 5 展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 内质网应激与2型糖尿病 |
| 1 内质网应激 |
| 2 UPR信号通路 |
| 3 内质网应激与β细胞凋亡关系 |
| 4 内质网应激与胰岛素抵抗关系 |
| 5 调控内质网应激改善2型糖尿病的实验研究 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 观察电针对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 电针干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌内质网应激IRE1/JNK与PI3K通路的影响研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 1 实验依据 |
| 2 电针对糖脂代谢的影响 |
| 3 骨骼肌胰岛素抵抗 |
| 4 电针对骨骼肌内质网应激IRE1、JNK、p-JNK蛋白表达的影响 |
| 5 电针对骨骼肌IRS-1 ser307、P13K p85、GLUT4蛋白表达的影响 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）2型糖尿病胰岛素抵抗中医证型的聚类分析以及绞股蓝皂苷XLIX改善胰岛素抵抗的初步研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 临床研究:2 型糖尿病胰岛素抵抗中医证型的聚类分析 |
| 引言 |
| 临床研究 |
| 1 研究内容 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 西医诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 中医证型诊断标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 资料收集 |
| 2.2 聚类分析 |
| 2.3 数据统计学处理 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 一般资料 |
| 3.2 中医四诊信息统计 |
| 3.3 四诊信息聚类分析 |
| 3.4 2型糖尿病胰岛素抵抗中医证型的分布情况 |
| 3.5 2型糖尿病胰岛素抵抗各证型组患者年龄和病程的比较 |
| 3.6 2型糖尿病胰岛素抵抗各证型组FPG、FINS、HOMA-IR的比较 |
| 3.7 2型糖尿病胰岛素抵抗各证型组BMI、Hb A1c的比较 |
| 3.8 2型糖尿病胰岛素抵抗各证型组TG、CHOL、LDL的比较 |
| 3.9 2型糖尿病胰岛素抵抗各证型组的BMI、Hb A1c、TG、CHOL、LDL与HOMA-IR的相关性 |
| 讨论 |
| 1 中医学对2 型糖尿病胰岛素抵抗之认识 |
| 1.1 病因病机 |
| 1.2 中医治疗 |
| 1.3 小结 |
| 2 西医学对2 型糖尿病胰岛素抵抗的认识 |
| 2.1 胰岛素抵抗的病因及发病机制 |
| 2.2 胰岛素抵抗的治疗 |
| 3 2型糖尿病胰岛素抵抗证型之确立 |
| 4 2型糖尿病胰岛素抵抗证型的相关分析 |
| 4.1 不同证型所占比之分析 |
| 4.2 不同证型发病年龄和病程之分析 |
| 4.3 不同证型胰岛素抵抗程度轻重之分析 |
| 4.4 不同证型间相关指标变化之分析 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验研究:绞股蓝皂苷XLIX改善脂肪乳诱发的胰岛素抵抗的机制研究 |
| 引言 |
| 实验研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验器材 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验液体的配制 |
| 1.4 动物准备 |
| 1.5 动物造模 |
| 1.6 静脉用药方法 |
| 1.7 血浆游离脂肪酸含量测定 |
| 1.8 实时荧光定量PCR |
| 1.9 蛋白免疫印迹 |
| 1.10 统计分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 动物的一般特征 |
| 2.2 Gyp-XLIX缓解了脂肪乳引起的胰岛素抵抗 |
| 2.3 Gyp-XLIX减轻了脂肪乳输注所造成的胰岛素信号通路的破坏 |
| 2.4 Gyp-XLIX抑制了脂肪乳诱导的NFκB活化 |
| 2.5 Gyp-XLIX调控脂肪乳引起的炎症基因表达 |
| 2.6 mTOR、JNK、ERK蛋白没有参与脂肪乳引起的胰岛素抵抗 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 综述 中医药治疗 2 型糖尿病胰岛素抵抗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 发表论文 |
（6）三配基PTP1B抑制剂的设计、合成及生物活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词简表(Abbreviations) |
| 第一章 PTP1B抑制剂的研究综述 |
| 1.1 概述 |
| 1.1.1 糖尿病的发展现状 |
| 1.1.2 胰岛素信号通路与糖尿病和肥胖 |
| 1.1.3 PTP1B与糖尿病和肥胖 |
| 1.2 PTP1B的结构特征 |
| 1.2.1 催化活性区域A |
| 1.2.2 非催化活性区域B,C,D与E |
| 1.2.3 PTP1B抑制剂在分子水平上的选择性 |
| 1.3 PTP1B的催化机制 |
| 1.4 PTP1B抑制剂的研究进展 |
| 1.4.1 二氟亚甲基磷酸盐类衍生物 |
| 1.4.2 杂环羧酸类衍生物 |
| 1.4.3 水杨酸类衍生物 |
| 1.4.4 2-苯(芳)氧乙酸类衍生物 |
| 1.4.5 异噻唑烷酮类衍生物 |
| 1.4.6 磺胺类以及三氟甲磺酰胺类衍生物 |
| 1.4.7 草酰芳基胺苯甲酸类衍生物 |
| 1.4.8 噻唑烷二酮类衍生物 |
| 1.4.9 天然产物抑制剂 |
| 1.4.10 新型三配基PTP1B抑制剂 |
| 1.5 PTP1B抑制剂开发所面临的问题 |
| 1.6 课题设计思路 |
| 参考文献 |
| 第二章 具有光学活性的新型吡咯烷类三配基PTP1B抑制剂的研究 |
| 2.1 吡咯烷类三配基PTP1B抑制剂的分子设计 |
| 2.2 吡咯烷类三配基PTP1B抑制剂的化学合成路线设计 |
| 2.2.1 反式Ⅰ-A系列化合物的化学合成路线 |
| 2.2.2 顺式Ⅰ-B系列化合物的化学合成路线 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 体外PTP1B蛋白抑制活性实验及结构活性关系 |
| 2.3.2 部分Ⅰ-A以及Ⅰ-B系列化合物的磷酸酶蛋白(PTP1B,TCPTP和 SHP2)选择性抑制实验以及平行人工膜渗透实验 |
| 2.3.3 计算机辅助设计 |
| 2.3.4 细胞活力实验 |
| 2.3.5 胰岛素诱导的葡萄糖吸收实验 |
| 2.3.6 Western Blot实验 |
| 2.4 实验部分 |
| 2.4.1 仪器与试剂 |
| 2.4.2 吡咯烷类三配基PTP1B抑制剂的化学合成步骤 |
| 2.4.3 体外PTP1B,TCPTP和 SHP2 蛋白抑制活性测试步骤 |
| 2.4.4 细胞活力实验步骤 |
| 2.4.5 胰岛素诱导的葡萄糖吸收实验步骤 |
| 2.4.6 平行人工膜渗透实验步骤 |
| 2.4.7 Western Blot实验步骤 |
| 2.4.8 计算机辅助设计实验步骤 |
| 2.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 新型苯乙烯磺酸酯类三配基PTP1B抑制剂的研究 |
| 3.1 苯乙烯磺酸酯类三配基PTP1B抑制剂的分子设计 |
| 3.2 苯乙烯磺酸酯类三配基PTP1B抑制剂的化学合成路线设计 |
| 3.2.1 Ⅱ-A以及Ⅱ-B系列化合物的合成路线 |
| 3.2.2 Ⅱ-C-1,Ⅱ-C-2 以及Ⅱ-D系列化合物的合成路线 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 体外PTP1B蛋白抑制活性实验及相应的构效关系 |
| 3.3.2 部分Ⅱ-B系列化合物的磷酸酶蛋白(PTP1B,TCPTP和 SHP2)选择性抑制实验以及平行人工膜渗透实验 |
| 3.3.3 计算机辅助设计 |
| 3.3.4 细胞活力实验 |
| 3.3.5 酶动力学实验 |
| 3.3.6 胰岛素诱导的葡萄糖吸收实验 |
| 3.4 实验部分 |
| 3.4.1 仪器与试剂 |
| 3.4.2 苯乙烯磺酸酯类三配基PTP1B抑制剂的化学合成步骤 |
| 3.4.3 体外PTP1B,TCPTP及 SHP2 蛋白抑制活性实验步骤 |
| 3.4.4 细胞活力实验步骤 |
| 3.4.5 胰岛素诱导的葡萄糖吸收实验步骤 |
| 3.4.6 平行人工膜渗透实验步骤 |
| 3.4.7 计算机辅助设计实验步骤 |
| 3.4.8 酶动力学实验步骤 |
| 3.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 总结与展望 |
| 攻读博士期间发表的学术论文及专利 |
| 致谢 |
| 附录 一些代表性化合物的核磁共振谱图 |
（7）电针调控T2DM大鼠骨骼肌IRS-1磷酸化改善胰岛素抵抗的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 电针治疗2型糖尿病胰岛素抵抗的机制探究 |
| 1 胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的关键环节 |
| 2 电针治疗2型糖尿病胰岛素抵抗的机制研究 |
| 3 展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 IRS-1信号通路在2型糖尿病胰岛素抵抗中的作用研究 |
| 1 IRS-1信号通路与胰岛素抵抗关系 |
| 2 针刺可通过调节IRS-1-PI3K-Akt-GLUT4改善胰岛素抵抗 |
| 参考文献 |
| 综述三 针刺对2型糖尿病的临床和实验研究进展 |
| 1 针刺对2型糖尿病的临床研究 |
| 2 针刺干预2型糖尿病的实验研究 |
| 3 结论 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 研究技术路线图 |
| 实验一 电针对2型糖尿病ZDF大鼠血糖、血脂含量的影响 |
| 1 目的 |
| 2 材料 |
| 3 方法 |
| 4 结果 |
| 实验二 电针对骨骼肌IRS-1磷酸化及其下游通路的影响 |
| 1 目的 |
| 2 材料 |
| 3 方法 |
| 4 结果 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 实验设计依据 |
| 2 骨骼肌胰岛素抵抗 |
| 3 IRS-1与糖尿病胰岛素抵抗 |
| 4 实验结果分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）IRTKS调控胰岛素信号通路作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 胰岛素信号通路 |
| 1.1.1 胰岛素受体 |
| 1.1.2 胰岛素受体底物IRS |
| 1.1.3 3-磷酸磷脂酰肌醇激酶PI3K |
| 1.1.4 Akt/PKB的活化 |
| 1.1.5 Akt底物 |
| 1.2 IRTKS |
| 1.2.1 IRTKS的结构 |
| 1.2.2 I-BAR家族 |
| 1.2.3 IRTKS的功能 |
| 1.3 SHIP2 |
| 1.3.1 SHIP2 的结构 |
| 1.3.2 SIHP2 与磷脂酰肌醇 |
| 1.3.3 SHIP2 的相互作用 |
| 1.3.4 SHIP2 酪氨酸磷酸化修饰 |
| 1.3.5 SHIP2 与胰岛素信号通路 |
| 1.3.6 SHIP2 与肿瘤的关系 |
| 1.3.7 SHIP2 与神经退行性病 |
| 1.3.8 SHIP2 与动脉粥样硬化 |
| 第二章 IRTKS与 SHIP2 相互作用的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验试剂 |
| 2.1.2 相关溶液配制 |
| 2.1.3 细胞的培养 |
| 2.1.4 小鼠饲养 |
| 2.1.5 MEF细胞分离及传代 |
| 2.1.6 基因组DNA提取 |
| 2.1.7 基因型鉴定 |
| 2.1.8 细胞免疫荧光 |
| 2.1.9 免疫共沉淀(co-IP) |
| 2.1.10 Western-blot |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 IRTKS与 SHIP2 细胞中呈现共定位现象 |
| 2.2.2 IRTKS与 SHIP2 在小鼠组织及细胞中存在相互作用 |
| 2.2.3 IRTKS与 SHIP2 在人肝癌细胞系中存在相互作用 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 IRTKS与 SHIP2 的结合区域的鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验试剂 |
| 3.1.2 缓冲液配制 |
| 3.1.3 GST-IRTKS截短体表达载体的构建 |
| 3.1.4 诱导表达及检测GST-IRTKS及突变体 |
| 3.1.5 纯化GST-IRTKS及截短体 |
| 3.1.6 GST-IRTKS及截短体pull-down实验 |
| 3.1.7 Flag-SHIP2 及截短体表达载体的构建 |
| 3.1.8 Flag-SHIP2 及其截短体表达鉴定 |
| 3.1.9 Flag-SHIP2 及其截短体与IRTKS的相互作用 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.2.1 IRTKS蛋白中SH3 结构域与SHIP2 结合 |
| 3.2.2 SHIP2 蛋白中IPP5c结构域与IRTKS结合 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 IRTKS抑制SHIP2 磷酸酶活性 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验试剂 |
| 4.1.2 缓冲液配制 |
| 4.1.3 磷脂酰肌醇水平的检测 |
| 4.1.4 磷脂酰肌醇磷酸酶活性的检测 |
| 4.1.5体外磷脂酰肌醇磷酸酶活性实验 |
| 4.1.6 统计分析 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.2.1 IRTKS的敲除可引起PI(3,45)P3 水平的下调 |
| 4.2.2 IRTKS的过表达可抑制SHIP2 的酶活性 |
| 4.2.3 沉默IRTKS促进SHIP2 的酶活性 |
| 4.2.4 IRTKS抑制SHIP2 酶活性 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 IRTKS与 SHIP2 的相互作用受胰岛素信号调控 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验试剂 |
| 5.1.2 细胞培养 |
| 5.1.3 胰岛素处理 |
| 5.1.4 IRTKS酪氨酸磷酸化水平检测 |
| 5.1.5 统计分析 |
| 5.2 实验结果 |
| 5.2.1 IRTKS酪氨酸磷酸化水平受到胰岛素信号调控 |
| 5.2.2 IRTKS与 SHIP2 的相互作用受到胰岛素信号调控 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 IRTKS和 SHIP2 相互作用对胰岛素信号通路的影响 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验试剂 |
| 6.1.2 稳转株质粒构建 |
| 6.1.3 慢病毒包装 |
| 6.1.4 慢病毒感染及稳转株筛选 |
| 6.1.5 增殖曲线 |
| 6.1.6 克隆形成 |
| 6.1.7 统计分析 |
| 6.2 实验结果 |
| 6.2.1 过表达IRTKS抑制SHIP2 并促进胰岛素信号传递 |
| 6.2.2 过表达IRTKS抑制SHIP2 并促进细胞增殖 |
| 6.2.3 过表达IRTKS抑制SHIP2 并促进细胞克隆形成 |
| 6.2.4 IRTKS通过抑制SHIP2 从而促进胰岛素信号传递模式简图 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 小结 |
| 总结 |
| 创新点 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间已发表论文 |
（9）西格列汀对新诊断2型糖尿病降糖疗效评估及影响西格列汀降糖疗效的机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 西格列汀对新疆新诊断的2型糖尿病降糖疗效评估 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 质量控制措施 |
| 1.4 统计分析方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 西格列汀对新诊断2型糖尿病降糖疗效差异的基因表达水平检测 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 试剂、耗材和仪器设备 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 数据统计 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 西格列汀在胰岛素抵抗细胞模型对SOCS3/PI3K/AKT通路的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 数据统计 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 新疆医科大学博士研究生学位论文 导师评阅表 |
（10）小分子腺嘌呤核苷酸介导的胰岛素抵抗和高血糖形成机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写注释表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 游离脂肪酸与胰岛素抵抗 |
| 1.1.1 游离脂肪酸与炎症反应 |
| 1.1.2 细胞内脂质代谢产物积累导致胰岛素抵抗 |
| 1.2 胰岛素信号的调控 |
| 1.2.1 胰岛素信号通路 |
| 1.2.2 胰岛素信号的负调控 |
| 1.3 酪氨酸磷酸酶PTP1B |
| 1.3.1 PTP1B的结构特点 |
| 1.3.2 PTP1B与2 型糖尿病 |
| 1.3.3 PTP1B抑制剂 |
| 1.4 腺嘌呤核苷酸及其代谢产物 |
| 1.4.1 细胞外腺嘌呤核苷酸的来源 |
| 1.4.2 腺嘌呤核苷酸的代谢 |
| 1.4.3 腺嘌呤核苷酸信号与疾病 |
| 1.5 二甲双胍 |
| 1.5.1 二甲双胍的吸收与代谢 |
| 1.5.2 二甲双胍的作用机理 |
| 1.6 肥胖与雄性生殖 |
| 1.6.1 肥胖对精液参数的影响 |
| 1.6.2 肥胖影响生殖能力的机制 |
| 1.7 论文选题的目的、意义和研究内容 |
| 2 2 型糖尿病小鼠外周组织腺嘌呤核苷酸含量的变化 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 糖尿病db/db小鼠与注射5’-AMP小鼠肝脏的代谢组学分析 |
| 2.2.2 2型糖尿病小鼠肝脏腺嘌呤核苷酸和代谢产物含量的变化 |
| 2.2.3 2型糖尿病小鼠外周组织腺嘌呤核苷酸和代谢产物含量的变化 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 2 型糖尿病小鼠血浆中升高的腺嘌呤核苷酸的来源 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.2.1 2型糖尿病小鼠血浆中腺苷酸和代谢产物的含量变化 |
| 3.2.2 脂肪摄入后血浆中腺苷酸和代谢产物含量的变化 |
| 3.2.3 注射5’-AMP对血浆中腺苷酸及代谢物含量的影响 |
| 3.2.4 游离酸脂肪酸引起的腺嘌呤核苷酸释放 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 腺嘌呤核苷酸引起高血糖的机制 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.2.1 5’-AMP对肝细胞内腺嘌呤核苷酸和代谢产物含量的影响 |
| 4.2.2 腺苷酸及其代谢产物对PTP1B活性的影响 |
| 4.2.3 ATP与PTP1B的相互作用 |
| 4.2.4 p H对PTP1B活性的影响 |
| 4.2.5 5’-AMP影响细胞内pH |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 二甲双胍改善2型糖尿病高血糖的机制 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 实验方法 |
| 5.2 实验结果 |
| 5.2.1 二甲双胍对小鼠肝脏中腺嘌呤核苷酸和代谢产物含量的影响 |
| 5.2.2 二甲双胍对PTP1B活性的影响 |
| 5.2.3 二甲双胍与PTP1B的相互作用 |
| 5.2.4 二甲双胍对细胞内pH的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 腺嘌呤核苷酸介导了肥胖引起的小鼠睾丸代谢紊乱 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.2 实验方法 |
| 6.2 实验结果 |
| 6.2.1 肥胖小鼠睾丸中腺嘌呤核苷酸含量的变化 |
| 6.2.2 ob/ob小鼠和5’-AMP处理小鼠睾丸的基因表达分析 |
| 6.2.3 ob/ob小鼠和5’-AMP处理小鼠睾丸的代谢组学分析 |
| 6.2.4 5’-AMP抑制睾丸中AKT和mTOR的磷酸化水平 |
| 6.2.5 长期注射5’-AMP对精子数量的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 本章小结 |
| 7 结论 |
| 7.1 全文小结 |
| 7.2 本论文创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
四、Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织胰岛素受体底物1和含2个SH_2结构的蛋白酪氨酸磷酸酶的蛋白表达（论文参考文献）
- [1]SHP2抑制剂的发现研究[D]. 母倩文. 南昌大学, 2021(01)
- [2]“昆南素”辅助降血糖固体饮料的作用机制及降糖效果研究[D]. 韩丹. 吉林大学, 2021(01)
- [3]拐枣多糖的分离纯化和结构解析及其降血糖活性研究[D]. 杨兵. 西南大学, 2020(04)
- [4]电针调控T2DM大鼠骨骼肌内质网应激IRE1/JNK改善胰岛素抵抗的机制研究[D]. 金永祚. 北京中医药大学, 2020(04)
- [5]2型糖尿病胰岛素抵抗中医证型的聚类分析以及绞股蓝皂苷XLIX改善胰岛素抵抗的初步研究[D]. 石书龙. 山东中医药大学, 2020(01)
- [6]三配基PTP1B抑制剂的设计、合成及生物活性研究[D]. 谢方洲. 上海交通大学, 2020(01)
- [7]电针调控T2DM大鼠骨骼肌IRS-1磷酸化改善胰岛素抵抗的机制研究[D]. 宋姗姗. 北京中医药大学, 2020(04)
- [8]IRTKS调控胰岛素信号通路作用机制的研究[D]. 吴崇超. 上海交通大学, 2019(06)
- [9]西格列汀对新诊断2型糖尿病降糖疗效评估及影响西格列汀降糖疗效的机制研究[D]. 马瑞. 新疆医科大学, 2019(04)
- [10]小分子腺嘌呤核苷酸介导的胰岛素抵抗和高血糖形成机制[D]. 杨潇. 南京理工大学, 2019
标签：糖尿病论文; 胰岛素抵抗论文; 胰岛素论文; 胰岛素释放试验论文; 糖尿病的早期症状论文;