一、巢蛋白免疫阳性细胞在成人胰腺中的分布（论文文献综述）
史明[1]（2021）在《脐带间充质干细胞治疗创伤性胰腺炎的实验研究》文中研究指明目的:创伤性胰腺炎常因胰腺外伤引起发病,临床症状表现为类似急性期的胰腺炎反应,但其发病机制不同于普通急性胰腺炎,常规的急性胰腺炎国内多因胆道梗阻疾病引发胰管堵塞发病、国外多因过量饮酒致病,但创伤性胰腺炎常合并胰腺自身外伤,胰腺损伤的同时常伴发其周围组织器官的损伤,其病情更加复杂。创伤性胰腺炎患者若早期处理不及时将易导致中后期全身性的炎症反应、多器官功能衰竭等复杂且严重并发症发生。因此控制早期病情的进展,将是创伤性胰腺炎治疗的重要环节。间充质干细胞是具备独特免疫调节及炎症控制能力的多功能细胞,在细胞治疗领域具有巨大的潜力。我们中心前期已自行研发了基于损伤范围控制的大鼠胰腺创伤模型,其能有效地模拟临床中胰腺创伤伤情的发生发展。因此本研究主要通过建立大鼠胰腺创伤模型,探讨脐带间充质干细胞移植对大鼠创伤性胰腺炎治疗的安全性与有效性,观察脐带间充质干细胞对大鼠创伤性胰腺炎是否具有一定的保护作用,为胰腺创伤的临床救治提供理论依据和创新性的辅助治疗方法。方法:60只健康雄性SD大鼠。随机分为对照组2组:常规对照组（Sham组）以及脐带间充质干细胞对照组（uc MSCs对照组）;创伤组1组:即创伤性胰腺炎组（TP组）;治疗组1组:脐带间充质干细胞治疗组（TP+uc MSCs治疗组,即uc MSCs治疗组）;每组15只。采用自主研发的基于损伤范围控制的胰腺创伤动物模型进行大鼠创伤性胰腺炎造模,造模结束后通过尾静脉注射CM-Dil活细胞染料标记的uc MSCs（1×106个/100g）,并于造模后1d,3d,7d处死取材,收集腹水,称重胰腺组织,并行HE染色评估胰腺组织损伤程度;荧光显微镜观察脐带间充质干细胞在大鼠体内各器官的归巢定植情况,免疫荧光观察PDX-1蛋白在胰腺组织中表达,判断胰腺组织创伤后再生修复情况;并检测血清中淀粉酶与脂肪酶、促炎因子与抗炎因子以及氧化应激因子表达水平。结果:体外输注的脐带间充质干细胞具有向大鼠损伤部位迁移定植的特性,移植的脐带间充质干细胞在胰腺组织中具有转化为胰腺前体细胞促进损伤胰腺修复的潜能。胰腺创伤后大鼠腹水呈浑浊淡红色,腹水含量明显增多。取胰腺组织称重后提示胰腺创伤组胰腺净湿重重量存在显着增重趋势。与创伤组相比,脐带间充质干细胞治疗组腹水量明显减少,胰腺组织净重量也明显减轻。标准的病理学评分提示经过脐带间充质干细胞移植治疗后胰腺组织综合病理学评分显着降低。胰腺创伤造模后大鼠血清中淀粉酶与脂肪酶指标明显升高,经脐带间充质干细胞移植治疗后有下降趋势。比较胰腺创伤组与脐带间充质干细胞治疗组血清中两酶浓度组间有明显差异。创伤性胰腺炎造模后血清中促炎因子TNF-α及IL-6浓度明显增高,经过脐带间充质干细胞移植治疗后促炎因子血清中表达水平可见明显的下降。相对而言,创伤造模后的抗炎因子TGF-β及IL-10浓度较造模前比较是降低的,但经过使用脐带间充质干细胞移植治疗后其血清中表达水平可见显着的上升。创伤性胰腺炎造模后血清中氧化酶系MDA浓度明显增高而抗氧化酶系SOD浓度显示明显降低。除此之外,在氧化应激调节上,比较胰腺创伤组与脐带间充质干细胞治疗组两氧化应激因子含量组间差异显示,经过脐带间充质干细胞的移植治疗大鼠血清中氧化酶MDA表达水平有下降趋势,而经过脐带间充质干细胞的移植治疗后大鼠血清中抗氧化酶SOD表达水平提示较创伤组增高。结论:本实验初步评价了脐带间充质干细胞对大鼠创伤性胰腺炎的治疗作用,证明了脐带间充质干细胞可主动归巢于创伤后胰腺组织,通过促进胰腺组织再生以及免疫调节作用改善创伤性胰腺炎大鼠胰腺组织的损伤,并可减轻创伤性胰腺炎引发的全身性炎症反应和应激反应,从而对大鼠创伤性胰腺炎具有一定的保护作用。
周云婷[2]（2020）在《胰岛星状细胞分化方向及其影响因素探究》文中研究表明第一部分高脂饮食诱导胰岛星状细胞向类纤维细胞分化目的:近年来,众多研究表明脂代谢失衡与2型糖尿病患者胰岛功能衰竭密切相关。胰岛星状细胞（islet stellate cells,ISCs）分化成类纤维细胞从而促进胰岛纤维化发生发展是2型糖尿病胰岛损伤的重要病理生理机制之一。但高脂导致的胰岛功能损伤是否与ISCs有关仍不清楚。本研究拟通过体内外实验观察高脂饮食是否通过改变ISCs生物学表型影响胰岛功能。方法:高脂饮食（High-fat Diet,HFD）分别喂养4、8、12和20周构建肥胖模型大鼠并动态检测各组大鼠体重、内脏脂肪含量、血甘油三酯和胰岛游离脂肪酸（Free fatty acid,FFA）水平。通过葡萄糖和胰岛素耐量试验评估各组大鼠糖代谢表型,并计算其血糖和胰岛素曲线下面积。胰腺切片行H&E、Masson和免疫组织化学染色分别评估各组大鼠胰岛形态、胰岛纤维化面积及胰岛内α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表达水平。体外300μM棕榈酸（Palmitic acid,PA）分别处理ISCs 48 h、72 h和96 h,通过q-PCR和Western blot检测ISCs向类纤维细胞分化的相关蛋白（α-SMA、胶原蛋白I（Collagen I,Col I）及纤维蛋白（Fibronectin,FN））m RNA和蛋白的表达水平。胰岛与类纤维化ISCs共培养不同时间周期,酶联免疫吸附和细胞活力实验检测类纤维化ISCs对胰岛功能及活力的影响。结果:HFD喂养4周后,大鼠体重、内脏脂肪含量、血清甘油三酯、胰岛FFA水平随喂养时间延长而增高。葡萄糖耐量试验和免疫组化显示HFD 20周大鼠胰岛素抵抗程度升高和糖耐量水平降低,伴随胰岛内细胞排列紊乱,胰岛素阳性区域浅染,α细胞数量减少并点状分布于胰岛中间区域;Masson染色显示大鼠胰岛内纤维化面积增加,免疫荧光显示这些大鼠胰岛内α-SMA阳性ISCs增加。体外实验显示PA干预48 h后,ISCsα-SMA、ColI及FN基因和蛋白水平明显高于对照组,且随干预时间延长而不同程度的增加。胰岛与类纤维样ISCs共培养48 h后,与胰岛单独培养组相比,共培养组上清中的基础胰岛素含量显着增高,而葡萄糖刺激胰岛素分泌峰值比例和胰岛活力降低。结论:高脂饮食诱导胰岛内α-SMA阳性的类纤维样ISCs增多,促进胰岛纤维化发生;类纤维化ISCs导致胰岛功能和活力下降,加重胰岛功能损伤。此研究为ISCs在胰岛纤维化中的角色提供了初步实验数据,提示高脂饮食诱导ISCs向类纤维细胞分化是2型糖尿病胰岛功能衰竭的重要病理机制之一。第二部分维生素A抑制胰岛星状细胞向类纤维细胞分化目的:近年来,有证据表明维生素A（Vitamin A,VA）及其衍生物参与调控机体胰岛素敏感性和葡萄糖稳态,影响糖尿病病理进程。ISCs是胰岛中储存VA的细胞类型,但目前VA对胰岛功能的调控是否与ISCs有关尚未见文献报道。因此,本研究拟通过体内外实验探索VA是否以及如何通过ISCs的生物学表型变化影响葡萄糖稳态。方法:将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分成两组,分别喂食VA充足（VAS）或VA缺乏（VAD）饮食各6周和12周。VAD饮食喂养12周后,将一部分VAD小鼠转换为VAD拯救（VADR）饮食继续喂养8周。每周动态测小鼠体重及随机血糖,实验结束时采用高效液相色谱、葡萄糖耐量试验、免疫荧光、免疫组织化学评估各组小鼠血清和组织VA水平、葡萄糖代谢表型、胰岛形态学和胰岛内ISCs分化表型相关蛋白（α-SMA、Col I和FN）表达水平。体外通过q-PCR和Western blot检测视黄醇干预不同时长的ISCs分化表型相关蛋白（α-SMA、Col I和FN）和VA代谢相关信号分子的m RNA和蛋白的表达。通过慢病毒转染敲降/过表达ISCs中视黄醇结合蛋白（cellular retinol binding protein 1,CRBP1）,观察其对ISCs分化表型的影响。构建不同分化表型ISCs-胰岛共培养系统,通过酶联免疫吸附和细胞活力试验评估ISCs分化表型的差异对胰岛功能和活力的影响。结果:VA缺乏饮食分别喂养小鼠6周和12周后,与VAS小鼠相比,VAD小鼠胰腺组织VA水平降低,同时胰腺VA代谢相关信号分子基因表达也下降,其中CRBP1下降最显着。VAD小鼠胰岛形态不规则,葡萄糖耐量降低,β细胞质量减少,胰岛中α-SMA阳性ISCs比例、Col I和FN蛋白表达水平升高。重新补充膳食VA小鼠胰腺组织VA水平恢复正常,胰腺组织VA代谢通路信号分子基因表达升高,胰岛形态和糖代谢表型改善,同时胰岛内α-SMA阳性ISCs比例、Col I和FN蛋白表达水平降低。体外视黄醇干预后ISCsα-SMA、Col I及FN蛋白表达水平显着低于对照组,且随干预时间延长而不断降低,并伴随着VA代谢相关信号分子基因表达的增加。敲降CRBP1基因的ISCs细胞形态伸展,呈多角形形态,增殖和迁移能力明显降低,同时α-SMA、Col I及FN表达减少。胰岛功能实验显示敲降CRBP1基因的ISCs组胰岛的胰岛素释放能力和胰岛细胞活力显着高于过表达组,且胰岛Caspase-3水平降低。结论:VA通过抑制ISCs向类纤维细胞分化参与胰岛功能的调节。CBBP1敲降使类纤维化ISCs“静息化”,且降低类纤维化ISCs对胰岛功能及活力的损伤。因此,通过调节VA水平来阻断ISCs分化为类纤维化细胞并保持其静息状态可能是糖尿病治疗的新策略。第三部分胰岛星状细胞向类胰岛素样细胞分化目的:新近有研究发现星状细胞可分化成多种特异性实质细胞。本研究拟探讨ISCs是否共享干/祖细胞的特性,具有向胰岛素样细胞分化的可能性。方法:密度梯度离心法从小鼠胰岛中分离ISCs,使用油红染色、q-PCR和免疫荧光鉴定不同状态ISCs细胞形态和干细胞标志物的表达。在内分泌诱导分化培养液中诱导ISCs分化,通过RT-PCR,免疫荧光,双硫腙染色,电子显微镜评估诱导后ISCs内分泌细胞分化表型。酶联免疫吸附测定诱导组ISCs细胞内胰岛素含量和葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力。结果:新鲜分离的ISCs形态伸展,呈扁平肥大的经典多边形外观,胞质中富含油红染色阳性的脂滴。随着体外培养时间延长,ISCs逐渐转化成细长的类纤维化细胞,并且ISCs表达多种成体组织特异性干细胞典型标志物。经过体外多步诱导,诱导组ISCs逐渐从细长的类纤维细胞形状细胞改变为圆形细胞外观,形成类胰岛簇,且双硫腙染色呈阳性。RT-PCR和免疫荧光结果显示诱导组ISCs表达多种β细胞特异性标志物且为C肽阳性细胞,同时C肽阳性细胞与胰岛素、胰高血糖素、CK-19,GFAP和波形蛋白存在共表达。ELISA检测示诱导组ISCs细胞内含有胰岛素,葡萄糖刺激胰岛素分泌结果示诱导组ISCs上清中胰岛素含量轻度升高,但无统计学差异。电镜结果研究显示诱导组ISCs胞质中内质网肥大,分布大量电子致密颗粒,且含有丰富的溶酶体和胶原蛋白纤维。结论:ISCs与已知的多种成体干细胞具有相同的生物学表型,表达多种干/祖细胞标志物,并可在体外诱导分化为类胰岛素样细胞。因此,本研究为ISCs的生理功能带来新见解,提示ISCs可能会成为构建功能性胰岛的成体干细胞来源。
史明,王涛,戴睿武[3]（2020）在《胰腺干细胞分子标记物研究进展》文中研究表明胰腺干细胞存在与否尚有争议,进一步研究明确胰腺干细胞分子标志物可间接证明胰腺干细胞的存在。通过充分利用胰腺干细胞分子标记物以及分离纯化等实验室基本操作技术可培育出大量胰腺干细胞。从而以器官发育学、细胞分子生物学等为基础研究胰腺干细胞的增殖分化的相关分子机制,可为临床探索胰腺疾病的治疗提供一种可靠的、有价值的参考方法,为糖尿病、胰腺损伤、胰腺肿瘤等临床疾病在移植领域奠定治疗基础。
伍佳理[4]（2018）在《巢蛋白在喉癌的表达与分布特征》文中研究指明目的探讨巢蛋白在喉鳞癌中的表达及分布状况,检测其表达水平及其与临床分期、TNM分期、分化程度、分型等临床病理参数的关系。方法用免疫组织化学（即用型快捷免疫组化,MaxVisionTM/HRP法,DAB染色）的方法,通过检测巢蛋白及CD31在10例喉鳞癌（LSCC）组织和10例癌旁组织（对照组）中的表达,通过imageJ的免疫组化插件IHCProfiler作组织切片的光密度（OD）定量,并且收集10例喉鳞癌患者详细的临床资料,分析巢蛋白及CD31的表达及与临床病理学特征的关系。结果在10例喉鳞癌组织及10例癌旁组织中,巢蛋白表达于结缔组织中的血管内皮的细胞质,IHC染色下呈浅至深棕黄色,绝大多数癌细胞未见阳性,血管壁的平滑肌纤维阴性;在癌旁的骨骼肌纤维,可见呈表达的阳性的肌纤维细胞。在喉癌组织部位,癌细胞成团分布在结缔组织中。癌细胞核着色大多较浅,密集分布,细胞核较大,且大小不一,有些癌细胞团中央可见无细胞核的癌珠。在癌细胞团之间,可见结缔组织,即癌组织的间质,其细胞核着色较深,分布较稀疏,或有炎症细胞浸润,细胞核着色较深,较小或分叶。OD均值分别为0.166±0.038N=10和0.050±0.020N=10,喉癌组中巢蛋白的表达高于癌旁组织,两者有显着统计学差异;在喉癌组中,组织分化程度不同,巢蛋白的表达程度不同。CD31亦表达于结缔组织中的血管内皮的细胞质,IHC染色下呈深棕黄色,绝大多数癌细胞未见阳性。在癌旁的骨骼肌纤维,CD31无明显表达。OD均值分别为0.419±0.164和0.052±0.024,喉癌组中CD31的表达高于癌旁组织,两者有显着统计学差异。在喉癌组中,组织分化程度不同,CD31的表达程度不同。喉癌与巢蛋白在喉癌组织中表达具有相关性。仅病理分级不同时,巢蛋白及CD31的OD值表达具有差异性。结论1.IHC染色下巢蛋白呈深棕黄色,表达于结缔组织中的血管内皮的细胞质和在癌旁的骨骼肌纤维中。而且巢蛋白在喉鳞癌组织中较癌旁组织中的表达明显升高,这可能说明巢蛋白参与了喉鳞癌的发生发展过程,或者说,巢蛋白的高表达是喉癌发生发展的结果,这一点尚有待于进一步研究。但由于喉癌细胞中无明显表达,仅在癌旁间质中巢蛋白表达高度阳性,本实验倾向于喉癌的发生发展与喉癌组织周围微环境改变有关。2.IHC染色下CD31染色情况类似于巢蛋白,亦呈深棕黄色,CD31亦表达于结缔组织中的血管内皮的细胞质,且表达较巢蛋白更为强烈。表示在喉癌间质中,在血管生成时,有大量的CD31参与其中,这表明喉癌的环境的产生与CD31的表达有关。3.在喉鳞癌组织中,组织学分期为G3（低分化）组中巢蛋白和CD31的表达均高于G1～G2（高、中分化）组,表明巢蛋白和CD31的高表达与喉鳞癌的组织学分期相关。因此,我们推测巢蛋白和CD31参与了喉鳞癌的发生、发育和侵袭的过程。
董丽萍[5]（2012）在《不同时期胚胎组织巢蛋白的表达》文中进行了进一步梳理目的：观察肺、肾、食管、胃、小肠、大肠在人胎儿发育过程中的形态学变化,检测巢蛋白在人胎儿不同时期肺、肾、食管、胃、小肠、大肠组织的表达及其变化,并推测巢蛋白在人胎儿发育过程中的作用。方法：取3-8月人胎儿肺、肾、食管、胃、小肠、大肠,常规石蜡切片并将其分为两组,一组作HE染色观察这些组织在发育过程中的形态学变化,一组作免疫组织化学染色,检测巢蛋白在胎儿发育过程这些组织中的表达,根据免疫组化结果进行半定量分析以判断巢蛋白在不同时期胎儿组织的表达变化。结果：巢蛋白在人胎儿发育各个时期的肺、肾、食管、胃、小肠、大肠组织均有表达。巢蛋白在肺组织主要表达在支气管旁、肺间质和微血管以及毛细血管壁上,而在肺导气部管道黏膜上皮没有阳性表达。巢蛋白在肾组织主要表达在肾小球、肾小囊壁层和微血管及毛细血管壁上,在近端小管、远端小管的上皮中没有表达。巢蛋白在消化管主要表达在固有层、黏膜下层和肌层内的微血管和毛细血管壁上巢蛋白在这些组织的表达均随胎龄的增加而减少。结论：巢蛋白在胎儿发育过程的多种组织中均有表达,且表达强度随胎龄的变化而变化,提示巢蛋白可能与胎儿发育有关。另外,巢蛋白在胎儿多种组织的的微血管和毛细血管的管壁上均有表达,且随着胎儿发育,其表达逐渐减少,提示巢蛋白在这些器官组织的血管形成过程中起作用。
黄林伟,杨最素,郁迪,闫海强,朱有法[6]（2010）在《人胚胎胰腺发育中巢蛋白阳性细胞表达的变化》文中认为目的:探索人胚胎发育过程中胰腺巢蛋白（nestin）阳性细胞表达的变化。方法:应用免疫组织化学EnVision法,检测30例人胚胎胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的表达及分布变化。结果:各胎龄段（10～37w）胰腺均有巢蛋白阳性细胞表达,存在于胰岛、间充质和血管中,在腺泡、导管中未发现阳性细胞,胚胎发育晚期阶段（29～37w）巢蛋白阳性细胞高于其它胎龄组。结论:在人胚胎胰腺组织中存在着巢蛋白阳性细胞,该细胞主要分布于胰岛和间充质中。随着胎龄的变化,胰腺巢蛋白阳性细胞数也发生了变化。
王赟[7]（2008）在《猪胰腺干细胞分离鉴定》文中认为糖尿病是全球性医学难题,目前,对糖尿病的治疗虽然有很多方法,但都不能从根本上解决问题。主要受制于供体不足和免疫排斥的问题。因此,人们寄希望于干细胞替代疗法。干细胞增殖力强、数量充足、移植排斥反应相对较低,更重要的是胰腺干细胞可塑性强,可以分化形成胰腺组织的各种细胞。猪胰腺干细胞的研究,目的在于解决干细胞来源的问题.本人在实验室以往的工作基础上,进一步分离、鉴定猪胰腺干细胞。无菌采集胎猪胰腺120例,采用酶消化法,用RPMI1640加入1mmol/L丙酮酸钠,71.5μmol/Lβ-巯基乙醇,20ng/mL EGF、20ng/mL bFGF,100U/mL青霉素100U/mL、链霉素0.1mg/mL,添加10% FBS作培养基培养细胞。结果有59例仅获得原代细胞,部分传至6～8代后,细胞大量飘浮死亡。同时观察到细胞传至6～8代时,随着细胞的大量死亡漂浮,皿底始终零散地保留一些圆形的、折光性强的小细胞。此时采用含20%血清的上述培养液后,皿中的小细胞在换液24h后形态发生变化,变大、变长,迅速扩增。48h后,每个小圆细胞形成一个克隆,96h后形成大的克隆,直径超过100um,随后细胞不断从集落边缘迁徙出来,细胞间相互连接,形成网络状生长,5～6天就会融汇成单层,此类细胞可以多次进行传代。由此发现胰腺干细胞不能传过7～8代的制约因素,成功地突破了胰腺干细胞扩增难题,并且一次获得4株胰腺干细胞,其中一株已经顺利传至64代,另3例传至10代,各代均有冻存;在诱导分化实验中观察到如果用无血清的培养基诱导胰腺干细胞向β细胞分化,细胞可以大量形成胰岛细胞团,但是成团后细胞活力很快下降,发黑、漂浮甚至死亡。因此,进一步探索了诱导条件,采用含血清的诱导液诱导,不仅可以促使胰腺干细胞向胰岛内分泌细胞分化,而且有效地避免了细胞分化后活力下降的问题。利用高糖刺激胰岛素释放实验,胰岛素和c-肽的分泌量分别可以达到306.87±20.72 mIU/mL和0.31±0.11ng/mL。经免疫组化检测,细胞表达目前公认的胰腺干细胞特异性标记物,如胰肠同源域因子1、葡萄糖转运子2、巢蛋白和波形蛋白,经RT-PCR检测,细胞表达胰肠同源域因子1、葡萄糖转运子2、胰淀素前体、胰岛素、生长抑素,确定分离获得的细胞为胰腺干细胞。细胞经成骨细胞诱导液诱导后,有明显的细胞聚集成团块状物的形成,经茜素红染色呈阳性;向神经细胞诱导后,细胞NF-200染色阳性;细胞亦表达胚胎干细胞的一些标志,如强表达胚胎干细胞的表面标志物OCT-4、胚胎阶段特异性抗原（1Stage-specific embryonic antigens SSEA-1）;用流式细胞仪证实细胞表达骨髓间充质干细胞的一些表面标志,如CD29,CD44,CD166。通过裸鼠致瘤性实验证实所分离的胰腺干细胞无致瘤性。并制备了大鼠糖尿病模型,将诱导后的细胞经腹腔注射给大鼠模型用于治疗,仅在注射后的2～4天内,血糖略有下降。
黄盛[8]（2008）在《不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响》文中研究表明糖尿病是常见的慢性疾病,全世界患病率约6%。患者常需要终身注射胰岛素治疗,但胰岛素注射疗法对血糖的控制并不理想,无法阻止糖尿病肾病、冠心病、糖尿病眼病等并发症的发生和发展。最近几年胰岛移植的成功表明了通过补充缺乏的β细胞可以治愈糖尿病。但供体来源缺乏和移植排斥阻碍了胰岛细胞移植的广泛应用。干细胞作为一类具有极强自我更新及多向分化潜能的细胞,已经逐渐成为人们寻找胰岛β细胞替代物的新的细胞资源。由于骨髓间充质干细胞（MSCs）具有多向分化和很强的增殖能力,具有用于细胞治疗的巨大潜能。它们可以分化为神经细胞、脂肪细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、软骨细胞和产胰岛素细胞等。但是由骨髓间充质干细胞诱导分化而来的产胰岛素细胞（IPCs）,其胰岛素分泌量不足正常胰腺β细胞的1%。如何促进MSCs分化为较成熟的IPCs成为亟待解决的关键问题。目前认为其分化机制,主要是微环境因素通过一定的信号转导通路传递,转录因子抑制或激活,启动关键基因表达的结果。本研究的目标是:探索不同微环境下对大鼠MSCs体外分化为IPCs的影响,在糖尿病大鼠体内微环境下MSCs是否还可以分化为IPCs,为糖尿病细胞替代治疗提供理想的种子细胞。大鼠MSCs的体外分离培养和生物学特征:利用贴壁法分离纯化大鼠MSCs,传代培养于含10%胎牛血清的DMEM培养液中;通过倒置显微镜、电镜、免疫细胞化学分析大鼠MSCs的生物学特征。结果显示原代和传代培养MSCs均保持较强的增殖能力,形态为均一的成纤维样细胞。超微结构显示了干细胞的幼稚特征,免疫细胞化学显示CD34阴性,CD44阳性。结论:采用我们的方法,可以获得生长稳定,扩增较快和纯度较高的MSCs。不同微环境对大鼠MSCs体外分化为IPCs的影响:采用第三代MSCs,用不同的微环境进行诱导,对照组诱导剂为含有角朊细胞生长因子、胰岛素铁硒传递蛋白（ITS）、尼克酰胺的无血清DMEM/F12培养基、实验组在对照组基础上添加胰腺条件培养液;对诱导后细胞进行光、电镜观察,双硫腙和免疫细胞化学等进行鉴定,并行体外葡萄糖刺激实验,测定细胞分泌胰岛素及C-肽功能。结果表明,实验组及对照组均可诱导分化为IPCs,但实验组分化而成的IPCs在数量及功能上均好于对照组。结论:大鼠胰腺提取物模拟的微环境能促进大鼠MSCs体外诱导分化为较高质量的IPCs。在糖尿病大鼠体内微环境下MSCs分化为IPCs的潜能:通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导健康SD大鼠建立糖尿病模型;将MSCs及由MSCs诱导分化来的IPCs注射到糖尿病模型大鼠的肾包膜下,检测移植前后血糖、体重、尿量、生存时间变化,当移植大鼠血糖开始下降后,行荷移植物肾切除术去除移植物,继续观察血糖变化,看是否有血糖反跳,以评价其治疗糖尿病的效果,结合标本免疫组织化学染色,观察移植入的MSCs在糖尿病大鼠体内是否分化为IPCs。结果:将MSCs及IPCs移植到大鼠肾包膜下后,大鼠的血糖水平下降,糖尿病症状得到控制,生存时间明显延长。免疫组化显示移植入的MSCs分化为胰岛素染色阳性细胞。结论:在糖尿病大鼠体内微环境下MSCs可以分化为IPCs。综上所述,大鼠MSCs在不同的体外及体内微环境下均可特异诱导分化为IPCs,而大鼠胰腺提取物模拟的微环境能促进大鼠MSCs体外诱导分化为IPCs;将大鼠MSCs和IPCs移植入糖尿病大鼠模型体内能够明显改善糖尿病症状,延长其生存时间。虽然骨髓间充质干细胞在安全而有效地运用于临床治疗之前还有许多基本的问题有待解决,但它为我们解决移植治疗糖尿病中供体缺乏问题方面提供了一条新的途经。
吴德全,高峰[9]（2007）在《成体干细胞来源胰岛素分泌细胞的研究概况》文中研究指明
乔海[10]（2007）在《人胎儿胰岛样细胞团源胰腺干细胞分离和鉴定》文中指出糖尿病作为严重危害人类健康的三大主要疾病之一,传统的药物及胰岛素替代疗法不能从根本上医治该病。近年来,随着成人胰岛移植的成功和对免疫抑制方案的改进,移植胰岛细胞已成为治愈Ⅰ型和部分Ⅱ型糖尿病的有效途径。但是,由于每个临床胰岛移植受体通常需要2～4个新鲜尸体胰腺,胰岛供体短缺的矛盾阻碍了胰岛细胞治疗糖尿病技术的推广和应用。胰腺干细胞（Pancreatic stem cells）是一类存在于胎儿和成年胰腺组织中的成体干细胞,能自我更新,具有多分化潜能,其特点是在自然分化过程中首先分化为胰腺组织的各种细胞。体外分离、克隆人类胰腺干细胞作为种子细胞,并定向诱导其分化为功能性胰岛细胞移植治疗糖尿病,是解决胰岛供体短缺的有效途径。本试验从人胎儿胰腺分离胰岛样细胞团（Islet-like cell clusters, ICCs）,从中纯化出干细胞并进行扩增培养,对其表达特性及诱导分化等方面进行研究,从而优化胰腺干细胞分离、鉴定的方法和体系,为糖尿病研究和治疗提供种子细胞,为人胎儿胰腺干细胞的临床应用提供基础资料。本实验无菌取3-5月龄人胎儿胰腺,剪碎后用Ⅳ型胶原酶消化,RPMI1640+10%NBS培养获得胰岛样细胞团;挑出细胞团接种于明胶包被的玻璃皿中,低糖DMEM +10%NBS+10ng/mL EGF进行贴壁培养,当细胞长成单层后传代,以RPMI1640+10%NBS培养;传代4d后可见许多呈克隆样生长的上皮样细胞片,挑出用RPMI1640 +10%NBS扩增培养,获得纯化的上皮样细胞,现传45代,每代冻存106-108个细胞。随机取生长状态良好的第13代细胞,接种到96孔板中,采用MTT法测定并绘制细胞生长曲线。生长曲线显示,用20%血清培养时,其传代第三天进入对数生长期,第五天达到平台期,在10%血清的培养液中生长则相对较慢。将第6代、11代、21代细胞分别接种于96孔板中,培养三天后4%多聚甲醛（pH7.4）固定后进行免疫组织化学染色。细胞表达PDX-1、CK-19、PCNA、CK-7、CK-3、E-钙粘素、Nestin、Glucagon、Glut2、Vimentin、;不表达Insulin、Somatostatin、IAPP（Islet amyloid polypeptide）。提取第39代细胞总RNA进行RT-PCR分析,细胞也表达PDX-1,CK-7,CK-19,Nestin,胰高血糖素,β-半乳糖苷酶,Vimentin,Glut2,不表达NGN3,胰岛素,生长抑素,胰多肽,葡萄糖激酶等。悬浮培养时CK-19表达仍然比较强,但nestin表达明显减弱。将培养的第5代细胞上流式细胞仪检测,细胞表达CD29、CD44、CD166,不表达CD11a、CD14、CD34、CD45、CD90、CD105、CD117。第39代细胞仍稳定表达CD29、CD44、CD166;稳定不表达CD54、CD90、CD11a。而CD14、CD34、CD45、CD105、CD117、CD 71、CD34、CD45的表达不稳定。将第39代HFIECs用10μg/L 10mmol/NIC, 10μg/L bFGF, 10μg/L HGF诱导培养14d,可形成DTZ阳性的细胞团。胰岛素释放量在第20d达到最大,证明诱导细胞在20d成熟程度达到最高。本试验表明从人胎儿胰腺分离培养的胰岛样细胞团中能纯化出具有自我更新能力的上皮样细胞,其来源于胰腺导管,具胰腺干细胞特性。该细胞有望成为研究治疗糖尿病的种子细胞。
二、巢蛋白免疫阳性细胞在成人胰腺中的分布（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、巢蛋白免疫阳性细胞在成人胰腺中的分布（论文提纲范文）
（1）脐带间充质干细胞治疗创伤性胰腺炎的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 胰腺干细胞分子标记物研究进展 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（2）胰岛星状细胞分化方向及其影响因素探究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词简表 |
| 绪论 |
| 综述 胰腺内星状细胞分化方向的研究进展 |
| 第一部分 高脂饮食诱导胰岛星状细胞向类纤维细胞分化 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料和方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 第二部分 维生素A抑制胰岛星状细胞向类纤维细胞分化 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三部分 胰岛星状细胞向类胰岛素样细胞分化 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
| 附录 博士期间发表学术论文成果 |
（3）胰腺干细胞分子标记物研究进展（论文提纲范文）
| 1 胰腺干细胞的定义及存在依据 |
| 2 胰腺干细胞的特异性分子标记物 |
| 2.1 胰十二指肠同源框1(pancreatic duodenal homeo-protein,PDX-1) |
| 2.2 神经元素3(neurogenin3,Ngn3) |
| 2.3细胞角蛋白(cytokeratin,CK) |
| 2.4 波形蛋白(vimentin) |
| 2.5 SOX-9(SRY-related HMG box gene 9) |
| 2.6 c-Kit |
| 3 联合分子标记物综合鉴定胰腺干细胞 |
| 4 问题与展望 |
（4）巢蛋白在喉癌的表达与分布特征（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）不同时期胚胎组织巢蛋白的表达（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 人胎儿组织标本 |
| 1.1.2 HE染色材料 |
| 1.1.3 免疫组织化学染色材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 石蜡切片制作 |
| 1.2.2 HE染色 |
| 1.2.3 免疫组织化学染色 |
| 第二章 结果 |
| 2.1 不同时期人胎儿各种器官组织的形态学特征 |
| 2.1.1 不同时期人胎儿肺的形态学特征 |
| 2.1.2 不同时期人胎儿肾的形态学特征 |
| 2.1.3 不同时期人胎儿食管的形态学特征 |
| 2.1.4 不同时期人胎儿胃的形态学特征 |
| 2.1.5 不同时期人胎儿小肠的形态学特征 |
| 2.1.6 不同时期人胎儿大肠的形态学特征 |
| 2.2 巢蛋白在不同时期人胎儿不同器官组织的表达 |
| 2.2.1 巢蛋白在不同时期人胎儿肺中的表达 |
| 2.2.2 巢蛋白在不同时期人胎儿肾中的表达 |
| 2.2.3 巢蛋白在不同时期人胎儿食管中的表达 |
| 2.2.4 巢蛋白在不同时期人胎儿胃中的表达 |
| 2.2.5 巢蛋白在不同时期人胎儿小肠中的表达 |
| 2.2.6 巢蛋白在不同时期人胎儿大肠中的表达 |
| 第三章 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 |
（6）人胚胎胰腺发育中巢蛋白阳性细胞表达的变化（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料和分组 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（7）猪胰腺干细胞分离鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 干细胞与胰腺干细胞 |
| 1.1 干细胞的分类 |
| 1.2 胰腺干细胞的概念 |
| 1.3 胰腺干细胞存在的证据 |
| 1.4 胰腺干细胞存在的部位 |
| 1.5 国外胰腺干细胞研究进展 |
| 1.5.1 支持胰腺干细胞存在于胰导管的研究 |
| 1.5.2 支持胰腺干细胞存在于胰岛的研究 |
| 1.5.3 支持胰腺干细胞源于胰腺细胞转分化的研究 |
| 1.6 国内胰腺干细胞研究进展 |
| 1.6.1 支持胰腺干细胞存在于胰导管的研究 |
| 1.6.2 支持胰腺干细胞存在于胰岛的研究 |
| 1.7 胰腺干细胞的鉴定 |
| 1.7.1 胰肠同源域因子1 |
| 1.7.2 神经原素3 |
| 1.7.3 Nestin |
| 1.7.4 酪氨酸羟化酶 |
| 1.7.5 其他 |
| 1.8 胰腺干细胞的来源 |
| 第二章 干细胞与治疗糖尿病 |
| 2.1 糖尿病治疗的历史与现状 |
| 2.1.1 胰腺器官移植 |
| 2.1.2 胰岛细胞移植 |
| 2.2 干细胞治疗糖尿病 |
| 2.2.1 成体干细胞 |
| 2.2.2 胚胎干细胞 |
| 2.2.3 异种干细胞 |
| 2.2.4 基因工程细胞 |
| 2.3 胰腺干细胞临床应用前景 |
| 第三章 猪胰腺干细胞研究进展 |
| 3.1 猪胰腺干细胞替代人胰腺干细胞的可行性 |
| 3.1.1 猪胰岛素与人类胰岛素结构 |
| 3.1.2 猪与人类胰岛素分泌血糖调定点 |
| 3.2 猪胰腺干细胞研究进展 |
| 3.2.1 材料选取 |
| 3.2.2 胰腺干细胞类型及存在部位 |
| 3.3 细胞分离方法与纯化 |
| 3.3.1 胰腺灌注酶法 |
| 3.3.2 胶原酶直接消化法 |
| 3.4 培养及扩增体系 |
| 3.4.1 共同的添加物质 |
| 3.4.2 培养基及培养方法 |
| 3.5 猪胰腺干细胞的诱导分化 |
| 3.6 猪胰腺干细胞研究中存在问题及解决办法 |
| 3.6.1 干细胞扩增 |
| 3.6.2 免疫排斥与解决办法 |
| 3.6.3 种间交叉感染 |
| 3.6.4 胰腺干细胞治疗时的数量问题 |
| 3.7 小结 |
| 第四章 胰腺干细胞的分离、扩增及诱导 |
| 4.1 胰腺干细胞的分离 |
| 4.1.1 胰腺结构 |
| 4.1.2 消化酶 |
| 4.1.3 细胞纯化 |
| 4.2 常用的培养基 |
| 4.3 培养基添加物 |
| 4.3.1 EGF |
| 4.3.2 bFGF |
| 4.3.3 血清 |
| 4.4 诱导方法及诱导添加物 |
| 4.4.1 定向诱导的方法 |
| 4.4.2 常用的诱导因子 |
| 4.5 小结 |
| 实验研究 |
| 第五章 胎猪胰腺干细胞扩增方法的建立 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验动物 |
| 5.1.2 主要仪器及试剂 |
| 5.1.3 主要溶液的配制 |
| 5.1.4 细胞分离与传代 |
| 5.1.5 细胞免疫组化染色 |
| 5.1.6 分子生物学鉴定 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 胰腺干细胞细胞生长行为 |
| 5.2.2 细胞免疫组化染色 |
| 5.2.3 分子生物学检测 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 猪胰腺干细胞生物学特性的研究 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验动物 |
| 6.1.2 主要试剂、仪器 |
| 6.1.3 方法 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 细胞生长形态 |
| 6.2.2 向胰岛细胞诱导结果 |
| 6.2.3 胚胎干细胞标志的检测结果 |
| 6.2.4 向成骨细胞、神经细胞诱导结果 |
| 6.2.5 生长曲线的测定结果 |
| 6.2.6 胰腺干细胞致瘤性实验结果 |
| 6.2.7 流式细胞仪检测结果 |
| 6.2.8 制备大鼠糖尿病模型与胰岛细胞移植 |
| 6.3 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 下一步工作设想 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 干细胞治疗糖尿病研究进展 |
| 第二部分 骨髓间充质干细胞与微环境的研究进展 |
| 正文 |
| 第一部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和生物学特性 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响 |
| 1、材料 |
| 2、实验方法 |
| 3、结果与分析 |
| 4、讨论 |
| 第三部分 骨髓间充质干细胞在糖尿病大鼠体内微环境下分化的研究 |
| 1、材料 |
| 2、实验方法 |
| 3、结果与分析 |
| 4、讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）成体干细胞来源胰岛素分泌细胞的研究概况（论文提纲范文）
| 一、胚胎干细胞 |
| 二、成体干细胞 |
| 1.胰岛干细胞是否存在: |
| 2.胰岛干细胞的研究现状: |
| 3.胰腺外干细胞来源 |
| (1) 骨髓: |
| (2) 肝脏: |
| 三、现存的问题和展望 |
（10）人胎儿胰岛样细胞团源胰腺干细胞分离和鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 第一章 胰腺的发育 |
| 1.1 胰腺的大体发育 |
| 1.2 胰腺的分子发育 |
| 1.2.1 胰腺的决定 |
| 1.2.2 内分泌的决定 |
| 1.2.3 内分泌祖细胞的分化定向 |
| 1.2.4 胰岛各型细胞的维持 |
| 第二章 胰腺干细胞研究进展 |
| 2.1 胰腺干细胞的概念 |
| 2.2 胰腺干细胞的来源 |
| 2.2.1 胚胎干细胞 |
| 2.2.2 成体胰腺 |
| 2.2.3 横向分化 |
| 2.3 胰腺干细胞的分离培养 |
| 2.3.1 胰腺导管上皮细胞分离与培养 |
| 2.3.2 胰岛源细胞分离与培养 |
| 2.3.3 胰干细胞单克隆培养 |
| 2.3.4 流式细胞仪分离 |
| 2.3.5 免疫磁珠分离 |
| 2.4 胰腺干细胞的分子标志 |
| 2.4.1 胰十二指肠同源异型盒基因（PDX-1） |
| 2.4.2 角蛋白（CK-19） |
| 2.4.3 神经元素 3(Ngn3) |
| 2.4.4 巢蛋白（Nestin） |
| 2.4.5 ISL1 |
| 2.4.6 NKX2.2,NKX6.1 |
| 2.4.7 PAX4,PAX6 |
| 2.4.8 NeuroD |
| 2.4.9 c-met |
| 2.4.10 CXCR4 |
| 2.4.11 SOX9 |
| 2.4.12 C-kit |
| 2.4.13 GLUT2 |
| 2.4.14 酪氨酸羟化酶 |
| 2.4.15 波形蛋白 |
| 2.5 胰腺干细胞的诱导分化 |
| 2.5.1 培养基 |
| 2.5.2 诱导因子及其作用 |
| 2.5.3 葡萄糖 |
| 2.5.4 细胞外基质( EMC) |
| 2.5.5 基因工程技术诱导或抑制操纵基因的表达 |
| 2.5.6 血管的诱导作用 |
| 第三章 人胎儿胰腺干细胞研究进展 |
| 3.1 人胎儿 ICCs 的分离与培养 |
| 3.1.1 分离与培养方法 |
| 3.1.2 影响分离培养的因素（ICCs 获得量） |
| 3.1.3 扩增 |
| 3.2 人胎儿胰腺细胞的 ICCs 表达特性 |
| 3.3 人胎儿 ICCs 诱导分化 |
| 3.4 人胎儿胰腺干细胞研究现状 |
| 试验研究 |
| 第四章 人胎儿胰岛样细胞团源上皮样细胞分离与培养 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 人胎儿 ICCs 源干细胞的分离与培养 |
| 4.2.2 不同血清浓度对 HFIECs 生长的影响 |
| 4.2.3 冷冻对细胞存活率的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 取材 |
| 4.3.2 人胎儿 ICCs 的分离培养 |
| 4.3.3 ICCs 中上皮样细胞纯化与扩增 |
| 4.3.4 冷冻对的细胞影响 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 人胎儿胰岛样细胞团源上皮样细胞的鉴定 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试剂与仪器 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 免疫组织化学染色鉴定结果 |
| 5.2.2 RT-PCR 检测结果 |
| 5.2.3 流式细胞仪鉴定结果 |
| 5.2.4 体外诱导 |
| 5.2.5 体内移植 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 细胞表达干细胞分子标志 |
| 5.3.2 流式细胞仪检测细胞表面标志表达 |
| 5.3.3 体外诱导 |
| 5.3.4 体内移植 |
| 5.4 小结 |
| 结论 |
| 下一步工作设想 |
| 参考文献 |
| 主要缩略词简表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、巢蛋白免疫阳性细胞在成人胰腺中的分布（论文参考文献）
- [1]脐带间充质干细胞治疗创伤性胰腺炎的实验研究[D]. 史明. 西南医科大学, 2021(01)
- [2]胰岛星状细胞分化方向及其影响因素探究[D]. 周云婷. 东南大学, 2020
- [3]胰腺干细胞分子标记物研究进展[J]. 史明,王涛,戴睿武. 西南军医, 2020(02)
- [4]巢蛋白在喉癌的表达与分布特征[D]. 伍佳理. 湖南师范大学, 2018(01)
- [5]不同时期胚胎组织巢蛋白的表达[D]. 董丽萍. 中南大学, 2012(02)
- [6]人胚胎胰腺发育中巢蛋白阳性细胞表达的变化[J]. 黄林伟,杨最素,郁迪,闫海强,朱有法. 中国民族民间医药, 2010(10)
- [7]猪胰腺干细胞分离鉴定[D]. 王赟. 西北农林科技大学, 2008(11)
- [8]不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响[D]. 黄盛. 第四军医大学, 2008(02)
- [9]成体干细胞来源胰岛素分泌细胞的研究概况[J]. 吴德全,高峰. 中国糖尿病杂志, 2007(11)
- [10]人胎儿胰岛样细胞团源胰腺干细胞分离和鉴定[D]. 乔海. 西北农林科技大学, 2007(06)