清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞黏附分子CD_(44)V_6表达的影响

一、清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD_(44)V_6表达的影响（论文文献综述）

王晓芳^[1]（2020）在《黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞E-cadherin、Snail1表达的影响》文中研究指明目的:研究黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其相关因子E-cadherin和Snail表达的影响。材料与方法:黄芪建中汤含药血清联合不同浓度顺铂（0、2、4、8、16、32、64ug/ml）培养人肺腺癌A549细胞株48h,采用四唑盐比色法（MTT）检测细胞株的抑制率,确定联合顺铂的最佳用药浓度;将人肺腺癌A549细胞株分为4组,即空白组、中药组、顺铂组、联合组,依次用完全培养基、黄芪建中汤含药血清、顺铂、黄芪建中汤含药血清联合顺铂干预,各组细胞株培养48h后,采用MTT法检测各组细胞株的抑制率。免疫细胞化学法（IHC）、免疫蛋白印迹法（WB）检测各组细胞株E-cadherin、Snail1蛋白的表达。实时荧光定量PCR法（RT-PCR）检测各组细胞株E-cadherin、Snail1基因的表达。结果:1.联合用药时顺铂的最佳浓度为8ug/ml;联合组人肺腺癌A549细胞株抑制率高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义（P<0.05）。2.各组人肺腺癌A549细胞中,E-cadherin阳性表达多在细胞膜,Snail阳性表达多在细胞质,呈棕黄色颗粒着色。与空白组相比,中药组、顺铂组和联合组中E-cadherin蛋白表达棕黄色颗粒较多,联合组中E-cadherin蛋白表达棕黄色颗粒最多;与空白组相比,中药组、顺铂组和联合组中Snail1蛋白表达棕黄色颗粒较少,联合组中Snail1蛋白表达棕黄色颗粒最少。3.联合组人肺腺癌A549细胞株中的E-cadherin基因、蛋白表达水平高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义（P<0.05）;联合组人肺腺癌A549细胞株中的Snail1基因、蛋白表达水平低于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞株有抑制作用,其机制可通过增强人肺腺癌A549细胞株中E-cadherin基因、蛋白的表达,降低人肺腺癌A549细胞株中Snail1基因、蛋白的表达实现。

潘磊,张庆乾,陈培丰^[2]（2016）在《清热消积方对荷Lewis肺癌小鼠移植瘤VEGF、bFGF表达的影响》文中研究指明清热消积方为浙江省中医院肿瘤科常用的抗肿瘤复方,在笔者前期研究中证实该复方具有较好的临床疗效,并有一定的抑制肿瘤血管生成的作用,但其具体机制尚需进一步研究。本实验拟建立小鼠肺癌移植瘤模型,检测清热消积方对小鼠抑制肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）蛋白表达的影响,探讨清热消积方的抗肿瘤血管生成作用机理。1材料与方法1.1材料:近交系C57BL/6J纯系小鼠,上海斯莱克动

闫珍^[3]（2014）在《清热消积方对荷Lewis肺癌小鼠移植瘤NF-κB、HIF-1α蛋白表达的影响》文中研究说明目的:通过体内抑瘤实验,采用免疫组化法和免疫印迹法（Western blotting）检测荷Lewis肺癌小鼠皮下肿瘤组织NF-λB、HIF-1α蛋白的表达。探讨清热消积方水煎剂对小鼠移植瘤组织中NF-λB、HIF-1α表达的影响。方法:取60只C57BL/6J纯系小鼠,建立Lewis肺癌移植瘤模型。移植瘤接种次日,采用随机化数字表法将其分为五组,其中清热消积方分为高、中、低剂量组,另设空白对照组（生理盐水组,NS组）及阳性对照组（环磷酰胺组,CTX组）。阳性对照组采用腹腔注射CTX（每周两次,共4次）:余荷瘤小鼠采用灌胃中药或生理盐水,1次灌胃体积均为0.4mL,每日1次,持续14天。停药次日处死小鼠,剥离皮下瘤体。部分瘤体入-80℃冰箱冻存,备Western blotting用;部分瘤体经甲醛固定-冲洗-脱水透明-浸腊-包埋,制成肿瘤组织石蜡标本以备免疫组化法用;采用免疫组化法和免疫印迹法检测清热消积方对荷瘤小鼠皮下肿瘤组织NF-λB、HIF-1α蛋白表达的影响。结果:清热消积方各剂量组荷瘤小鼠瘤组织中NF-λB、HIF-1α蛋白的表达较空白对照组均有不同程度的降低。经统计学分析,治疗组与空白对照组比较有统计学差异（P<0.05）结论:清热消积方下调肿瘤组织的NF-λB、HIF-1α蛋白的表达可能是其抗肿瘤血管生成的机制之一。

陈培丰,潘磊,金莹祺^[4]（2013）在《清热消积方对人肺腺癌细胞诱导的人脐静脉内皮细胞迁移、趋化和成管能力的影响》文中提出目的研究清热消积方对人肺腺癌细胞（SPC-A-1）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）迁移、趋化和成管能力的影响。方法设终浓度分别为2.5、5.0、10.0、20.0mg/mL的清热消积方给药组和对照组,运用划痕、Transwell小室、Matrigel胶小管形成等实验方法观察细胞迁移趋化效应及成管能力。结果 2.5、5.0、10.0mg/mL的清热消积方药液对由SPC-A-1细胞上清培养的HUVEC细胞的迁移运动均有不同程度的抑制作用（P<0.05）,且迁移率随着药物浓度的增加而下降;HU-VEC细胞的趋化细胞数明显少于阳性对照组（P<0.01）,趋化抑制率随着药物浓度的增加而上升,且HU-VEC细胞趋化数目与药物浓度呈负相关（r=-0.830,P<0.01）;HUVEC细胞小管形成面积明显低于阳性对照组（P<0.01）,小管形成抑制率随着药物浓度的增加而上升,且HUVEC细胞生成小管的面积与药物浓度呈负相关（r=-0.937,P<0.01）。结论清热消积方抗肿瘤血管生成作用可能与其抑制肿瘤血管内皮细胞的迁移、趋化及成管能力等相关。

王秀娟^[5]（2007）在《中医药治疗胃癌研究近况》文中研究表明胃癌是临床最常见的恶性肿瘤,属于中医"症瘕"、"伏梁"、"积聚"、"噎膈"、"胃脘痛"等范畴。近年来中医药治疗胃癌已取得一定的疗效,现就近年的研究概况作一综述。1.病因病机王氏认为胃癌属中医脾胃病,但不能从一般的脾胃疾患论治。因为胃癌的症状表现除纳化升降失常以外,还有特定的癌肿病灶,故应辨病与辨证相结合,达到扶正祛邪的目的。应围绕胃癌本虚

陈培丰,倪桂宝^[6]（2006）在《清热消积方对细胞跨膜信号传递与肿瘤转移的影响》文中研究表明[目的]观察恶性肿瘤转移时,清热消积方对肿瘤细胞跨膜信号传导系统的不同组分VEGF、CD44V6、MMPs的表达状况和肿瘤转移的影响。[方法]采用SP免疫组化染色法。[结果]清热消积方有一定的抗肿瘤转移作用,肺转移抑制率为34·7%49·5%。并可降低VEGF、CD44V6、MMPs的表达,与对照组比较差异有显着性（P<0·05或P<0·01）。[结论]清热消积方可降低肿瘤细胞跨膜信号传导系统的不同组分VEGF、CD44V6、MMPs的表达。抑制肿瘤血管生成和抑制肿瘤细胞的侵袭和黏附、运动能力等可能是该方抗肿瘤转移的重要机制之一。

何水勇^[7]（2005）在《解毒消痰散结方对S180荷瘤鼠PCNA及p27～（kip1）表达的影响》文中指出目的:观察解毒消痰散结方在三个不同时间点的抑瘤作用及其可能的作用机制。 方法:将150只健康的昆明种小鼠随机分为5组:生理盐水组、5-FU组、解毒消痰散结组、消痰散结组和解毒组,每组30只。分组后建立S180荷瘤小鼠皮下移植模型,再分别连续给药7d、14d、21d后,各随机拉颈处死10只小鼠,采用瘤体称重法计算抑瘤率,运用Envision免疫组织化学法检测肉瘤S180组织PCNA（增殖细胞核抗原）、p27kipl表达。 结果: 1、第7d,5-FU组、解毒消痰散结组、消痰散结组、解毒组的抑瘤率分别为68.95%、66.55%、51.47%和41.02%;第14d,各组的抑瘤率分别为65.68%、60.83%、54.52%和42.22%;第21d,各组的抑瘤率分别为45.71%、47.27%、56.37%和33.66%; 2、第7d,生理盐水组、5-FU组、解毒消痰散结组、消痰散结组、解毒组的PCNALI分别为62.92%、18.63%、15.05%、28.94%和31.55%:第14d,各组的PCNALI分别为64.44%、22.99%、27.79%、25.45%和35.98%;第21d,各组的PCNALI分别为66.52%、23.10%、43.65%、21.70%和42.73%; 3、第7d,生理盐水组、5-FU组、解毒消痰散结组、消痰散结组、解毒组的p27kiplLI分别为27.80%、63.92%、84.48%、63.81%和50.19%;第14d,各组的p27kiplLI分别为18.45%、55.96%、64.17%、62.91%和40.90%;第21d,各组的p27kiplLI分别为14.98%、53.72%、36.33%、60.72%和32.35%。 结论: 1、解毒消痰散结方、消痰散结方、解毒方对移植性S180肉瘤有一定的抑瘤作用,其机理与下调S180肉瘤PCNA、上调p27kipl的表达有关。 2、解毒方、消痰散结方在移植性S180肉瘤发展的某一阶段中有协同的抑瘤作用。

邢光明^[8]（2004）在《右旋柠烯抗胃癌转移机制实验研究》文中研究说明胃癌是常见的严重威胁人类生命健康的恶性疾病之一,据统计占我国消化道恶性肿瘤的第一位,全身肿瘤的第三位,并有继续上升的趋势。手术切除为其主要治疗手段,但术后复发及转移率较高。根治性手术治疗进展期胃癌5年生存率为40%,患者主要死于复发和转移,而淋巴转移是其最主要的转移方式。侵袭和转移是恶性肿瘤重要的生物学特征,是导致临床上绝大多数肿瘤患者死亡的主要因素。侵袭和转移是肿瘤生长发展过程中密不可分的相关过程,侵袭行为是肿瘤转移的内在因素。如何穿越生物学屏障是肿瘤细胞侵袭和转移动态过程的关键步骤。在此过程中,癌细胞与基底膜或细胞外基质粘附,然后释放和激活多种蛋白水解酶降解基底膜和细胞外基质,在趋化因子、自分泌以及旁分泌生长因子等作用下迁移到达靶组织,克隆增殖从而形成转移灶。肿瘤细胞可以直接侵入淋巴管,原有及新生的淋巴管均将成为肿瘤细胞淋巴转移的通道。肿瘤由原发部位脱落而发生转移,也可以通过血液循环到达淋巴结门并在淋巴结中被捕获,侵入血管中细胞多,淋巴结受累机率则高。但是后者发生的机率远较前者小。由此可见,对于胃癌来说,其表达粘附、侵袭相关因子如基质金属蛋白酶（matrix metal proteinases, MMPs）的水平、微血管、微淋巴管密度将直接影响其淋巴转移的发生。右旋柠烯（d-limonene）是中药桔皮中提纯的单体成份,属于天然单萜烯类化合物。其学名为1-甲基-4-异丙基环己烯,分子式C10H16,分子量136.23。右旋柠烯在桔皮精油中的含量超过90%,纯度高达97%。它具有防治化学诱导的啮齿类动物乳腺癌、皮肤癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌和胰腺癌等作用,其低毒、广谱和食用性特征使其受到国内外研究者的广泛关注。右旋柠烯防治癌症的机制理论上有如下观点:初期的预防作用是诱导致癌物代谢的酶类表达,使致癌物解毒;初期后的预防作用是由于诱导了癌症细胞凋亡、细胞再分化和/或抑制了细胞生长调节蛋白转移酶的异丙基化等多种机制发挥预防及治疗作用。但是对其在肿瘤转移方面尤其是对淋巴转移的作用和机制的相关研究未见报道。近来,对肿瘤淋巴转移的研究倍受重视,多种淋巴管内皮细胞特异性标记物<WP=6>如血管内皮生长因子受体3（vascular endothelial growth factor receptor 3, VRGFR-3）、LYVE-1和Podoplanin等的发现使淋巴管与血管的区分成为可能。但是迄今人们对肿瘤淋巴结转移的机制了解甚少。目前认为,血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C, VEGF-C）是较特异的淋巴管内皮生长因子,属于血管内皮生长因子家族,它主要通过激活其特异性表达于淋巴管内皮细胞的受体VEGFR-3,继而经由MEK/ERK和PI3-激酶/Akt途径引起淋巴管内皮细胞增生和淋巴管发生。由于淋巴管缺乏紧密连接和连续的基底膜,肿瘤细胞容易从淋巴管内皮细胞间隙进入淋巴管。肿瘤细胞由于产生较高水平的VEGF-C,通过与其受体的作用,促进肿瘤淋巴管形成,淋巴管数目的增多增加了肿瘤细胞接触和进入淋巴管的机会,从而促进淋巴结的转移。本实验将检测多种人胃癌细胞和手术切除胃癌标本中VEGF-C表达水平,分析其与肿瘤生物学行为和临床病理特征的关系,并在此基础上,通过体内裸小鼠原位移植模型和体外粘附、侵袭实验评价右旋柠烯对胃癌转移能力的抑制作用,在细胞和分子水平探讨其作用机理,并为该药的临床应用提供理论依据。第一部分 胃癌细胞VEGF-C表达水平与粘附、侵袭能力的关系目的:观察不同胃癌细胞株VEGF-C蛋白表达与胃癌细胞体外粘附、侵袭能力的关系,探讨VEGF-C对胃癌细胞转移潜能的作用。方法:三种人胃腺癌细胞BGC-823、SGC-7901、MKN-45,常规RPMI-1640培养液于37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中培养,取处于对数生长期的细胞备用。Western-blot法检测肿瘤细胞裂解液中VEGF-C蛋白表达水平;以纤维粘连蛋白和层粘连蛋白为作用对象,检测不同胃癌细胞与细胞外基质粘附作用;利用Transwell小室,以Matrigel和纤维粘连蛋白构建重组基底膜,检测胃癌细胞侵袭人工基底膜能力;针对VEGF-C基因编码区设计合成反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide, ASODN）,通过脂质体介导对VEGF-C高表达胃癌细胞株进行转染;蛋白印迹检测反义寡核苷酸封阻后VEGF-C和基质金属蛋白酶2（matrix metal proteinase 2, MMP-2）蛋白表达;体外粘附实验和侵袭实验检测胃癌细胞肿瘤生物学行为的改变。结果:蛋白印迹结果显示,三种细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-45 裂解液VEGF-C蛋白表达积分光密度分别为21.5±0.8、28.6±0.5和17.2±0.7,以SGC-7901表达水平最高;对细胞外基质纤维粘连蛋白和层粘连蛋白的粘附率分别为89.2%、96.6%、81.3%和90.8%、98.5%、82.7%;24h侵袭实验表明,SGC-7901细胞具有较强的体外侵袭能力（侵袭细胞数分别为114.5±20.9、186.3±14.2和<WP=7>96.1±15.7）。相关分析显示,VEGF-C表达与粘附、侵袭能力呈正相关。VEGF-C反义寡核苷酸封阻后,SGC-7901细胞VEGF-C表达下调（26.1±0.8/9.4±0.6）,粘附、侵袭能力减弱（分别为94.5%/64.8%、96.2%/70.9%和169.8±16.2/71.1±10.5）。同时发现,转移重要相关分子MMP-2蛋白表达下调（24.3±0.6/12.8±0.3）。结论:VEGF-C表达与胃癌细胞体外粘附、侵袭能?

陈培丰,刘鲁明,陈丽荣^[9]（2001）在《清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD44V6表达的影响》文中研究说明目的:观察清热消积方对小鼠 Lewis 肺癌细胞粘附分子 CD44V6的调变作用。方法:采用 SP免疫组化染色法。结果:清热消积方可降低 CD44V6的表达,与对照组比较差异有显着性（P<0.05,P<0.01）。结论:清热消积方降低 CD44V6表达可能是该方抗转移的重要机制之一。

二、清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD_(44)V_6表达的影响（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD_(44)V_6表达的影响（论文提纲范文）

（1）黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞E-cadherin、Snail1表达的影响（论文提纲范文）

（2）清热消积方对荷Lewis肺癌小鼠移植瘤VEGF、bFGF表达的影响（论文提纲范文）

（3）清热消积方对荷Lewis肺癌小鼠移植瘤NF-κB、HIF-1α蛋白表达的影响（论文提纲范文）

（4）清热消积方对人肺腺癌细胞诱导的人脐静脉内皮细胞迁移、趋化和成管能力的影响（论文提纲范文）

（6）清热消积方对细胞跨膜信号传递与肿瘤转移的影响（论文提纲范文）

（7）解毒消痰散结方对S180荷瘤鼠PCNA及p27～（kip1）表达的影响（论文提纲范文）

（8）右旋柠烯抗胃癌转移机制实验研究（论文提纲范文）

（9）清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD44V6表达的影响（论文提纲范文）

四、清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD_(44)V_6表达的影响（论文参考文献）

• [1]黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞E-cadherin、Snail1表达的影响[D]. 王晓芳. 辽宁中医药大学, 2020(02)
• [2]清热消积方对荷Lewis肺癌小鼠移植瘤VEGF、bFGF表达的影响[J]. 潘磊,张庆乾,陈培丰. 浙江中医杂志, 2016(05)
• [3]清热消积方对荷Lewis肺癌小鼠移植瘤NF-κB、HIF-1α蛋白表达的影响[D]. 闫珍. 浙江中医药大学, 2014(05)
• [4]清热消积方对人肺腺癌细胞诱导的人脐静脉内皮细胞迁移、趋化和成管能力的影响[J]. 陈培丰,潘磊,金莹祺. 中国中西医结合杂志, 2013(04)
• [5]中医药治疗胃癌研究近况[A]. 王秀娟. 中华中医药学会脾胃病分会第十九次全国脾胃病学术交流会论文汇编, 2007
• [6]清热消积方对细胞跨膜信号传递与肿瘤转移的影响[J]. 陈培丰,倪桂宝. 浙江中医药大学学报, 2006(02)
• [7]解毒消痰散结方对S180荷瘤鼠PCNA及p27～（kip1）表达的影响[D]. 何水勇. 第二军医大学, 2005(06)
• [8]右旋柠烯抗胃癌转移机制实验研究[D]. 邢光明. 大连医科大学, 2004(01)
• [9]清热消积方对小鼠Lewis肺癌细胞粘附分子CD44V6表达的影响[J]. 陈培丰,刘鲁明,陈丽荣. 中国中西医结合杂志, 2001(S1)

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