一、人精子透明质酸酶活性测定的临床意义（论文文献综述）
杨喆[1]（2021）在《多聚嘧啶束结合蛋白1对小鼠血睾屏障完整性和支持细胞自噬的影响》文中指出目的:睾丸支持细胞（Sertoli cells,SCs）是构成生精小管管壁结构的重要组成之一,其参与形成的血睾屏障(Blood-testis barrier,BTB在维护生精细胞的生长、发育以及精子的形成中起着不可或缺的作用。多聚嘧啶束结合蛋白1（polypyrmidine tract-binding protein 1,PTBP1）是调节前体m RNA剪接和选择性剪接事件的关键蛋白,其不仅能促进精原细胞增殖,也能调控紧密连接（Tight junction,TJ）相关蛋白的表达。PTBP1还可以通过激活PI3K/Akt通路和抑制自噬来促进细胞生长,而PI3K/Akt通路和自噬活性均在支持细胞维持血睾屏障完整性中起重要作用。因此,我们在观察到睾丸支持细胞PTBP1的表达随着年龄增长显着降低的基础上,进一步探索PTBP1是否通过影响紧密连接相关蛋白分子表达和自噬来调控血睾屏障的完整性。方法:1.收集2月龄、6月龄和18月龄小鼠的左侧睾丸,经HE染色和透射电镜观察不同年龄段小鼠睾丸的组织光镜结构和超微结构特征变化;2.收集2月龄、6月龄和18月龄小鼠的右侧睾丸,经蛋白印迹（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time q PCR）和免疫荧光染色检测PTBP1的表达变化;3.取2月龄、6月龄和18月龄小鼠的附睾尾部精子,通过透明质酸酶HYD活性检测和体外受精穿卵率检测精子活性;4.以胶原酶IV与胰酶联合消化的方法分离与培养小鼠原代SCs,经免疫组化和免疫荧光分别检测SCs特异性标志分子SOX-9和Wt-1来鉴定细胞纯度,并通过免疫荧光染色检测PTBP1在原代SCs中的表达;5.原代SCs分别转染重组慢病毒Lv-sh-EGFP和Lv-sh PTBP1-EGFP,三天后在荧光显微镜下观察EGFP的表达鉴定病毒转染率,并通过Western blot和Real-time q PCR法检测PTBP1、TJ相关蛋白（ZO-1、occludin和claudin-5）的表达;6.原代SCs传代至Trans-well板中,分别转染重组慢病毒Lv-sh-EGFP和Lv-sh PTBP1-EGFP,三天后通过跨上皮细胞电阻（Trans epithelium electrical resistant TEER）法检测BTB的通透性;7.原代SCs分别转染重组慢病毒Lv-sh-EGFP和Lv-sh PTBP1-EGFP,三天后通过Western blot检测PI3K/Akt/m TOR通路及自噬相关分子（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和p62）表达变化;8.原代SCs分别转染重组慢病毒Lv-EGFP和Lv-PTBP1-EGFP,三天后在荧光显微镜下观察EGFP的表达鉴定病毒转染率,并通过Western blot和Real-time q PCR法检测PTBP1的表达。9.原代SCs分别转染重组慢病毒Lv-EGFP、Lv-PTBP1-EGFP以及PI3K通路抑制剂LY294002,三天后通过Western blot检测PI3K/Akt/m TOR通路及自噬相关分子（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和p62）表达变化;Western blot和Real-time q PCR法检测TJ相关蛋白（ZO-1、occludin和claudin-5）的表达,TEER检测BTB的通透性。10.通过睾丸网微注射法,在6周小鼠睾丸后缘睾丸纵膈处分别注射慢病毒Lv-EGFP、Lv-sh PTBP1-EGFP和Lv-PTBP1-EGFP,并在第7天、14天、28天进行补充注射,四周后冰冻切片荧光显微镜观察感染结构;透射电镜观察睾丸组织SCs的TJ结构变化。结果:1.HE染色和透射电镜观察结果:2月龄与6月龄小鼠睾丸组织结构完整,生精细胞层次分明,精子HYD活性及体外受精率无明显差异;18月龄小鼠睾丸组织的生精上皮排列紊乱,层数进一步减少,多数精原细胞出现空泡样改变,部分管腔中可见大量脱落的生精细胞,SCs与相邻生精细胞之间连接松散,在透射电镜下发现SCs之间的TJ结构松散,连接缺失;2.Western blot、Real-time q PCR和免疫荧光检测PTBP1的结果:18月龄小鼠睾丸组织PTBP1阳性细胞数量减少、PTBP1在蛋白水平和m RNA水平表达显着降低。3.透明质酸酶HYD活性检测和体外受精穿卵率检测精子活性:18月龄小鼠的精子HYD阳性率和活性强度以及体外受精率明显下降。4.成功分离培养原代SCs,PTBP1在原代SCs中稳定表达。5.原代SCs分别成功转染重组慢病毒Lv-EGFP和Lv-sh PTBP1-EGFP;Lv-sh-PTBP1组的PTBP1在蛋白水平和m RNA水平表达显着降低,TJ相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5在蛋白水平和m RNA水平表达均明显降低。6.TEER检测BTB的通透性结果:Lv-sh-PTBP1组细胞电阻降低,BTB的通透性增大。7.Western blot检测PI3K/Akt/m TOR通路及自噬相关分子表达结果:Lv-sh-PTBP1组p-PI3K、p-Akt、p-m TOR表达降低,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1表达明显升高,p62表达降低。8.原代SCs分别成功转染重组慢病毒Lv-EGFP和Lv-PTBP1-EGFP;Lv-PTBP1组的PTBP1在蛋白水平和m RNA水平表达显着增高。9.原代SCs分别转染重组慢病毒Lv-EGFP、Lv-PTBP1-EGFP和PI3K通路抑制剂LY294002后:Lv-PTBP1组电阻增高,BTB的通透性降低,TJ相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5在蛋白水平和m RNA水平表达均明显增高;LY294002组电阻降低,BTB的通透性增大,TJ相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5在蛋白水平和m RNA水平表达均明显降低;Lv-PTBP1组p-PI3K、p-Akt、p-m TOR表达增高,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ以及Beclin1表达明显降低,p62表达升高;LY294002组p-PI3K、p-Akt、p-m TOR表达降低,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ以及Beclin1表达明显升高,p62表达降低。10.通过睾丸网微注射Lv-EGFP、Lv-sh PTBP1-EGFP和Lv-PTBP1-EGFP后结果:Lv-sh-PTBP1组的睾丸组织PTBP1在蛋白水平表达显着降低,TJ相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5在蛋白水平表达均明显降低,TJ超微结构不完整;Lv-PTBP1组的睾丸组织PTBP1在蛋白水平表达显着增高,TJ相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5在蛋白水平表达均明显升高,TJ超微结构紧密。结论:随着年龄增高,小鼠睾丸SCs内PTBP1的表达降低,PTBP1可能通过调节PI3K/Akt/m TOP通路影响TJ相关蛋白的表达,同时影响SCs的自噬,从而改变BTB的完整性,导致维护生精细胞正常发育的微环境发生变化。
李镇杰[2]（2021）在《外源性三磷酸腺苷及透明质酸酶联合应用对弱精子症患者精子影响及弱精子症精浆中AMPK表达研究》文中研究指明目的:本研究通过在弱精子症精浆中分别添加ATP、透明质酸酶以及ATP+透明质酸酶,比较外源性添加ATP及透明质酸酶前后对精液质量影响,并通过透射电子显微镜观察精子细胞内的线粒体、顶体等超微结构的改变,结合前期课题组的研究,探讨外源性添加ATP及透明质酸酶对精液质量的影响。通过酶联免疫吸附测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测AMP依赖蛋白激酶（Adenosine5‘-monophosphate-activated protein kinase,AMPK）在弱精子症精浆中表达,探讨弱精子症精浆中AMPK的变化对精子的影响,寻找提高弱精子症精液质量的新思路。方法:（1）收取在右江民族医学院附属医院生殖中心男科门诊2019年11月至2020年5月就诊的患者,按照纳入标准后收集到103例符合实验条件的标本,通过SAC精液质量分析仪检测精液质量,每一份标本至少检测3次,精液质量正常42份,弱精子症61份,将检测后的每一份样本平均分为3组,每组100ul置于EP管中,并按1:1分别加入ATP、透明质酸酶以及ATP+透明质酸酶（ATP:透明质酸酶=1:1）,再次进行精液质量分析。（2）通过透射电子显微镜观察精子细胞内线粒体、顶体等超微结构的变化。（3）按纳入标准,收取在右江民族医学院附属医院生殖中心男科门诊2019年11月至2020年8月就诊的178例精液,其中弱精子症89例,正常精液89例,分别通过ELISA测定精浆中AMPK含量。结果:（1）精子前向运动（PR）:在弱精子症组、正常组中外源性添加ATP、透明质酸酶、ATP+透明质酸酶后,精子前向运动（PR）均减弱,P<0.05,差异具有统计学意义。添加ATP组与透明质酸酶组比较,外源性添加ATP后精子前向运动（PR）减弱,P<0.05,差异具有统计学意义;ATP组与ATP+透明质酸酶比较,外源性单独添加ATP酶导致精子前向运动（PR）减弱,P<0.05,差异具有统计学意义;添加透明质酸酶与ATP+透明质酸酶比较,精子前向运动（PR）无明显改变,P>0.05,差异无统计学意义。（2）精子总活力（PR+NP）:在弱精子症组、正常组中外源性添加ATP、透明质酸酶、ATP+透明质酸酶后,精子总活率（PR+NP）均减弱,P<0.05,差异具有统计学意义。添加ATP组与透明质酸酶组比较,外源性添加ATP后精子总活率（PR+NP）减弱,P<0.05,差异具有统计学意义;ATP组与ATP+透明质酸酶比较,外源性单独添加ATP酶导致精子总活率（PR+NP）减弱,P<0.05,差异具有统计学意义;添加透明质酸酶与ATP+透明质酸酶比较,精子总活率（PR+NP）无明显改变,P>0.05,差异无统计学意义。（3）透射电子显微镜:结果显示在弱精子症和正常精液中添加ATP、透明质酸酶和ATP+透明质酸酶后精子的超微结构改变的特点:精子不同程度水肿,细胞膜面积不同程度被破损、溶解,细胞器游离,整体呈崩解状态,头部呈不规则形小头。细胞核局部凹陷,染色质均匀,其中可见核泡,核膜模糊。顶体较小,结构模糊,致密区消失。精子尾部结构肿胀,线粒体肿胀,膜内基质局部变淡,嵴减少、消失,基质外溢;外周致密纤维粗细不均匀,结构模糊;双联微管数量减少,部分双联微管消失,亚微管结构消失;中央微管双微管结构模糊或消失。（4）精浆AMPK检测结果:弱精子症精浆中AMPK含量明显高于正常精浆AMPK含量,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:（1）在弱精子症中外源性添加ATP、透明质酸酶、ATP+透明质酸酶后,精子前向运动（PR）以及精子总活力（PR+NP）均减弱;（2）在弱精子症中外源性添加ATP后,精子前向运动（PR）以及精子总活力（PR+NP）均减弱,且比外源性添加透明质酸酶、外源性添加ATP+透明质酸酶减弱更显着;（3）在弱精子症中外源性添加ATP、外源性添加透明质酸酶、外源性添加ATP+透明质酸酶,精子前向运动（PR）和精子总活力（PR+NP）减弱可能与精子超微结构改变及功能损害有关。（4）弱精子症精浆中存在AMPK,且弱精子症精浆中AMPK含量明显高于正常组。
董贺孟[3]（2021）在《秦岭大熊猫精液超低温冷冻保存技术研究》文中指出目前大熊猫人工授精的受孕率偏低,使得人工圈养大熊猫的繁殖变得十分困难,及时的开展大熊猫精液品质的研究及其冷冻保存技术研发,对于维持秦岭大熊猫种群数量,建立秦岭亚种种质资源库,走出大熊猫濒危困境具有十分重要的意义。冷冻过程中精子遭受的氧化损伤是影响冻精质量的主要因素,在精子冷冻保存液中添加抗氧化剂,已成为提高家畜冷冻精液品质的重要方法。本试验采用ELISA等技术,通过对秦岭大熊猫精浆指标检测的基础上,探寻精浆指标与秦岭大熊猫精液品质的相关性;分析海带多糖、枸杞多糖和白藜芦醇对大熊猫冷冻精液常规质量指标与线粒体活性等影响,筛选出抗氧化剂添加最佳剂量;观察大熊猫精子冷冻-解冻后超微结构变化,为建立秦岭大熊猫精液超低温冷冻保存技术和提高人工授精的受孕率提供试验数据。试验结果如下:1.采集4只年龄为12～17岁的雄性秦岭大熊猫精液,其鲜精的平均精子活率、质膜完整性和顶体完整性分别为82.75±5.74%、81.04±4.35%以及47.10±8.11%,Panda B和Panda C的精子活率、质膜完整性和顶体完整性显着高于Panda A和Panda D;精浆指标分析结果表明,精浆中酸性磷酸酶和Zn的含量与精子活率、质膜完整性和顶体完整性呈显着正相关;Panda D精浆中ROS含量的增加对精液品质呈显着负相关。2.通过制作冷冻-解冻后大熊猫精子电镜样本,使用扫描和透射电镜技术观察超低温冷冻对大熊猫精子的影响,研究发现超低温冷冻保存后主要对精子头部、颈部造成损伤。3.在冷冻前添加三种抗氧化剂于精液中,通过ELISA等技术进行检测,结果表明,50μM、100μM白藜芦醇和2.0 mg/m L枸杞多糖添加组显着增加冻精解冻后的精子质量和抗氧化能力,且100μM白藜芦醇添加组显着下调ROS的含量;1.0 mg/m L海带多糖、4.0 mg/m L枸杞多糖和联合添加组均可以显着提高精子的抗氧化能力,且联合添加组显着上调精子活力;2.0 mg/m L、4.0 mg/m L枸杞多糖显着上调了精子顶体蛋白酶的活性。白藜芦醇、海带多糖、枸杞多糖通过增加抗氧化酶活性并抑制冷冻过程中ROS的产生,显着提高精子质量。其中50μM白藜芦醇和2.0 mg/m L枸杞多糖在冷冻保护过程中对精子的保护效果最好。综上所述,本研究结果表明,超低温冷冻对大熊猫精子结构造成一定的损伤,通过冷冻保护剂中添加2.0mg/m L枸杞多糖或添加50μM白藜芦醇可以减少大熊猫精液冷冻保存过程中的氧化损伤,提高大熊猫精液冷冻保存后的精子质量。
曹雨晴[4]（2021）在《精子顶体酶活性及IUI/IVF/ICSI受精方式对妊娠结局影响的研究》文中指出研究目的:探讨在接受辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology,ART）治疗的不孕（育）夫妇中,精子顶体酶活性（Sperm Acrosin Activity,SAA）及不同的受精方式（IUI/IVF/ICSI）对妊娠结局的影响,指导不孕（育）夫妇选择合适的辅助生殖技术方式,以获得更好的妊娠结局。研究方法:回顾分析2019年1月至2020年3月在本生殖中心行辅助生殖技术（IUI/IVF/ICSI）治疗的398个周期对应的不孕（育）夫妇的一般资料、精子实验室数据、胚胎实验室数据及临床妊娠结局随访资料等。其中包括行IUI治疗的190个周期,行IVF治疗的167个周期,行ICSI治疗的41个周期。通过精子顶体酶活性测定试剂盒（固相BAPNA法）来对SAA进行测定,评估精子顶体酶活性是否正常。根据精子顶体酶活性分组为:A组即精子顶体酶正常活性组:SAA≥64.9μIU/106精子、B组即精子顶体酶低活性组:SAA<64.9μIU/106精子。运用SPSS 23.0软件对收集的各项数据予以分析,探讨SAA及不同的受精方式（IUI/IVF/ICSI）对妊娠结局的影响。研究结果:1.在本研究中行ART治疗的夫妇共398个周期,其中A组共303个周期,B组共95个周期,A、B两组之间男性年龄（P=0.047）的差别有统计学意义,A组的平均年龄比B组的平均年龄小;两组之间的精子浓度（P=0.000）、精子总数（P=0.000）、精子前向运动率（P=0.037）、精子前向运动总数（P=0.000）、精子正常形态率（P=0.005）、精子存活率（P=0.036）的差别均具有统计学意义（P<0.05）,且均为A组高于B组;两组之间的畸形精子指数（P=0.005）的差别具有统计学意义（P<0.05）,为B组高于A组;然而两组之间的男性精液检查前的禁欲时间和精子DNA碎片指数的差别均无明显差异（P>0.05）。2.在本研究中行IUI治疗的共190个周期,其中A1组共143个周期,B1组共43个周期。研究发现A1组和B1组之间的生化妊娠率、临床妊娠率、流产率以及活产率的差别均无明显的差异性（P>0.05）。3.在本研究中行IVF治疗的共167个周期,其中A2组共137个周期,B2组共30个周期。研究发现A2组和B2组之间的受精率（χ2=26.119、P=0.000）、优质胚胎率（χ2=5.706、P=0.017）、可移植胚胎率（χ2=12.861、P=0.000）的差别均具有统计学意义（P<0.05）,且都表现为A2组高于B2;然而两组间的卵裂率、生化妊娠率、临床妊娠率、流产率、活产率均无明显的差异（P>0.05）。4.在本研究中行ICSI治疗的共41个周期,其中A3组共23个周期,B3组共18个周期。A3组和B3组之间的受精率（χ2=4.427、P=0.035）、可移植胚胎率（χ2=9.077、P=0.003）有差异性（P<0.05）;两组间的卵裂率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、活产率、流产率无明显差异（P>0.05）。5.当SAA正常即≥64.9μIU/106精子时,IVF组的生化妊娠率（χ2=47.159、P=0.000）、临床妊娠率（χ2=44.262、P=0.000）、活产率（χ2=22.137、P=0.000）和ICSI组生化妊娠率（χ2=16.185、P=0.000）、临床妊娠率（χ2=17.000、P=0.000）、活产率（χ2=16.203、P=0.000）均明显高于IUI组（P<0.05）;IVF组和ICSI组之间的受精率、卵裂率、优质胚胎率、可移植胚胎率都无明显差异性（P>0.05）;三组间的流产率的差别也无统计学意义（P>0.05）。6.当SAA<64.9μIU/106精子时,IVF组的生化妊娠率（χ2=9.205、P=0.003）、临床妊娠率（χ2=7.582、P=0.012）、活产率（χ2=4.768、P=0.029）,ICSI的生化妊娠率（χ2=5.551、P=0.034）、活产率（χ2=6.013、P=0.014）同样都明显高于IUI组（P<0.05）;而IVF组和ICSI组之间的受精率、卵列率、优质胚胎率、可移植胚胎率无明显差异（P>0.05）;三组间的流产率的差别也无统计学意义（P>0.05）。结论:1.精子顶体酶活性与男性年龄呈负相关性。2.精子顶体酶活性与精子浓度、精子总数、精子前向运动率、精子前向运动总数、精子正常形态率、精子存活率均呈正相关性;但其与畸形精子指数呈负相关性。3.当精子顶体酶活性下降时,受精率和可移植胚胎率也出现了下降趋势,且在行IVF治疗的周期中比在行ICSI治疗的周期中表现的更明显,因此精子顶体酶活性对辅助生殖技术的受精结局有较高的预测价值。4.精子顶体酶活性与生化妊娠率、临床妊娠率、活产率和流产率之间均无明显相关性,因此精子顶体酶对其的预测价值较低。5.当精液常规参数较低,但精子顶体酶活性正常时,可优先选择行IVF治疗,然而当精子顶体酶活性也较低时,综合考虑可以优先选择行ICSI治疗。
潘程程[5]（2020）在《生精散联合电针对少、弱精子症患者精子顶体酶活性与精子P34H表达的影响》文中进行了进一步梳理目的:通过生精散联合电针治疗肾虚精亏型少、弱精子症患者,观察其对中医证候积分、精子活力、精子浓度、精子顶体酶活性和精子P34H表达的影响,探索生精散联合电针对少、弱精子症患者精子质量的影响,并初步探讨其作用机制。方法:该研究筛选符合纳入标准的肾虚精亏型少、弱精子症患者共105例,使用随机数字表法将其分为3组:电针组35例、生精散组35例、联合组35例。电针组应用韩式治疗仪,生精散组服用生精散,联合组两种治疗方式同时进行。1个月为1治疗周期,治疗3个周期。观察3组患者治疗前后的中医证候积分、前向运动精子（PR）比例、精子浓度、精子顶体酶活性与精子P34H表达,并进行机制探讨。结果:（1）中医证候积分:三组治疗后的中医证候积分较治疗前均有所下降且差异显着（P<0.05）;治疗后,联合组证候积分低于电针组,存在显着性差异（P<0.05）;联合组、电针组分别和生精散组相比,差异均无统计学意义（P>0.05）。（2）精子活力、浓度:三组治疗后PR比例、精子浓度较治疗前均有提高且差异显着（P<0.05）;治疗后,联合组PR比例、精子浓度高于电针组,均存在显着性差异（P<0.05）;联合组PR比例高于生精散组且有显着性差异（P<0.05）,其精子浓度与生精散组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;电针组与生精散组PR比例、精子浓度比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。（3）精子顶体酶活性:三组治疗后精子顶体酶活性较治疗前均有提高且差异显着（P<0.05）;治疗后,联合组顶体酶活性高于电针组、生精散组,均存在显着性差异（P<0.05）;电针组与生精散组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。相关性分析中,治疗前后,精子顶体酶活性与PR比例、精子浓度均呈正相关性（P<0.05）。（4）精子P34H表达:三组治疗后精子P34H表达量较治疗前均有提高且差异显着（P<0.05）;治疗后,联合组P34H表达量高于生精散组、电针组,均存在显着性差异（P<0.05）;电针组和生精散组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.生精散联合电针可以改善肾虚精亏型少、弱精子症患者中医证候,为中医诊疗提供依据。2.生精散联合电针可以提高少、弱精子症患者精子活力与浓度,改善精子顶体酶活性与精子P34H的表达,且疗效优于单独使用电针或生精散,为临床患者提供有效的治疗方法。3.通过机制研究推论,生精散联合电针可能是通过提高精子顶体酶活性与精子P34H表达,从而改善相关精液指标与中医证候,为临床治疗提供理论指导基础。
戴研平,高晓勤,倪佳[6]（2020）在《人精液内蛋白激酶A、精子透明质酸酶与男性不育关系的研究》文中指出目的:研究蛋白激酶A（PKA）、精子透明质酸酶（HYD）阳性率与男性不育的相关性。方法:收集生殖中心门诊年龄20～40岁不育患者精液36例,正常生育男性精液17例作为正常生育组,根据伟力彩色精子质量检测系统检查结果将不育男性精液36例分为三组（不明原因不育组9例、少精或畸形精子多组15例、泌尿生殖系统炎症组12例）。用酶联免疫吸附测试（定量）人精液PKA含量;同时采用本课题组改良透明质酸钠-明胶底物膜法检测精子顶体内HYD阳性率。结果:PKA含量与精子HYD阳性率呈显着正相关。与正常生育组比较,不育各组中的精子PKA含量和精子HYD均下降,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论:精子PKA含量与男性不育存在一定相关性,精子PKA含量与精子HYD阳性率呈显着正相关,精子PKA含量是评定男性生育能力的重要指标之一。
潘程程,李静,梁琦,赵梦璐,崔薇[7]（2019）在《精子表面蛋白P34H与男性精子质量关系的研究进展》文中研究指明精子表面蛋白P34H作为附睾上皮分泌的一种物质,并作为精子在附睾内成熟的标志,与男性不育的发生密切相关,而男性不育多由于精子数量减少或精子质量降低。研究显示,精子表面蛋白P34H能介导精卵透明带的结合,并且与精子顶体反应率、精子顶体酶活性、精浆中性a-葡萄糖苷酶、精子透明质酸酶活性呈正相关,其表达水平低下可影响精子质量,阻碍精子成熟,从而引起男性不育症的发生。本文对精子P34H蛋白与男性精子质量的相关性做一综述。
李漫,刘建建,苏江伟,张燕,杨莹莹,吴万福,郭学平[8]（2019）在《透明质酸酶的研究进展》文中进行了进一步梳理近年国内外关于透明质酸酶的研究日益增多,本文综述了透明质酸酶的相关研究进展,主要阐述透明质酸酶的分类及来源、临床应用、不良反应,展望透明质酸酶的研究前景。
姜珊[9]（2019）在《冷冻处理对牛、绵羊、山羊精子形态及受精能力的影响》文中指出牛精子冷冻保存技术已经得到广泛应用,但是绵羊与山羊精子解冻后活力和受精率与牛冻精相比明显低下。为了探索绵羊与山羊精子解冻后活力以及受精率下降的原因,为提高绵羊与山羊精子解冻后活力以及受精率提供理论依据。本实验进行了以下三个方面的研究:1.检测比较了牛、绵羊、山羊精子冷冻处理前后精子顶体完整率及精子头部超微结构;2.检测比较了牛、绵羊、山羊精子冷冻处理前后精子活力、透明质酸酶活性、顶体蛋白酶活性;3.对比分析了牛、绵羊、山羊精子体外受精能力。本研究三部分实验结果如下:第一部分实验结果表明,（1）经吉姆萨染色后精子顶体共分为5种类型,（1）顶体完整、（2）顶体轻微膨胀、（3）顶体膨胀、（4）顶体部分脱落、（5）顶体全部脱落;其中牛、绵羊、山羊精子冷冻处理前后、以及牛、绵羊、山羊不同物种之间顶体完整率均显着下降。（2）冷冻处理前后精子头部超微结构共分为4种类型,（1）顶体与质膜完整、（2）顶体完整、质膜膨胀、（3）顶体膨胀、（4）顶体与质膜囊泡化;牛冷冻精子的前3种类型占的比例>山羊>绵羊;牛、绵羊、山羊精子冷冻保存处理后精子顶体完整率与超微结构显示了物种差异。第二部分实验结果表明,（1）牛、绵羊、山羊精子在冷冻处理后活力均显着下降;冷冻处理导致各物种活力均有下降,牛冷冻精子活力>绵羊>山羊,物种之间存在显着差异;（2）牛、绵羊、山羊精子在冷冻处理后透明质酸酶活性、顶体蛋白酶活性均显着下降,并且牛冷冻精子透明质酸酶活性、顶体蛋白酶活性>绵羊>山羊,物种之间存在显着差异。第三部分实验结果表明,（1）牛、绵羊、山羊精子在冷冻处理前后受精卵裂率均是牛>绵羊>山羊,但各组之间没有显着差异;（2）冷冻处理导致各物种受精卵裂率均有下降且存在显着差异。本实验结果表明冷冻保存处理对牛、绵羊、山羊精子的顶体、细胞膜具有损伤作用,并且在冷冻耐受性方面存在比较明显的物种差异;另一方面,冷冻保存处理也造成牛、绵羊、山羊与受精相关的活力下降、透明质酸酶与顶体蛋白酶的部分流失,从而导致受精能力下降。根据以上实验结果推测,冷冻处理影响了牛、绵羊、山羊与受精相关的结构、功能变化,但是不同物种之间存在的差异,其原理或机制需要从生殖生物学与生物化学角度进一步研究。
刘莉[10]（2018）在《姜曲海猪精液超低温保存参数优化及应用研究》文中研究指明哺乳动物精液冷冻保存,在种质资源保存、优良公畜利用、养殖场生物安全和节约成本等方面越来越受到关注。近年来,在某些动物种类精液冷冻保存技术方案已取得了突破,这些方案在人、犬和牛上应用并获得良好的效果。然而,猪精液的冷冻保存应用效果仍不十分理想。因此,随着集约化、规模化养殖业的发展,建立有效的猪精液超低温冷冻保存方案就非常迫切。本文选择我国优良品种姜曲海猪,研究精液超低温冷冻保存后对存活和发育能力的影响,在建立冷冻方案的基础上,对姜曲海精子冷冻前后的酶活性、超微结构和差异蛋白进行研究,以阐明冷冻损伤机制;同时,进行了人工授精应用。主要内容包括以下5个部分:一、超低温冷冻对姜曲海猪精液品质的影响本研究主要进行了姜曲海猪精液品质评价方法与体外受精相关性的分析,冷冻精液保护剂的选择,冷冻与解冻方法对精液品质的影响。结果表明,①猪精子活力、PI染色、低渗肿胀试验、Rh123染色、FITC标记的PNA染色与体外受精均存在较强的线性相关性,以顶体完整率与体外受精率的相关程度最高。②在冷冻稀释液中添加终浓度为3%的二甲亚砜、丙二醇、乙二醇和甘油,甘油冷冻保护效果最好,且其活力、质膜破损率、顶体完整率和线粒体活性均与二甲亚砜（Dimethylsulphoxide,DMSO）冷冻组和丙二醇（Propanediol,PDO）冷冻组存在显着差异（P<0.05）,但与乙二醇（Ethyleneglycol,EG）冷冻组均无显着差异存在（P>0.05）。③通过选择距离液氮面分别为2 cm、5 cm和9 cm高度进行熏蒸,发现以距离液氮面9 cm高度熏蒸效果最差,与2 cm和5cm高度熏蒸各试验指标均存在显着差异（P<0.05）;距离液氮面2 cm和5 cm高度熏蒸效果相比,除5 cm高度熏蒸组顶体完整率显着高于2 cm高度熏蒸组外,二者活力、质膜破损率和线粒体活性间均无统计学意义（P>0.05）。④通过研究解冻方法对猪精液品质的影响,发现解冻时直接将0.25 mL细管置于37 ℃水浴30 s,其精子活力、顶体完整率、质膜完整率和体外受精胚胎发育率等各指标均显着优于后者。⑤在冷冻液中添加不同含量GSH和/或HA,发现添加GSH 5 mmol/L效果较好,除卵裂率指标外,活力、顶体完整率、超氧化物歧化酶活性以及丙二醛含量均与未添加组具有显着差异（P<0.05）;而添加透明质酸则以900μg·mL-1添加浓度效果较好,除卵裂率与未添加HA组不存在显着差异外（P>0.05）,其冻后活力、顶体完整率、SOD活性及MDA含量均与未添加HA组存在统计学差异（P<0.05）。联合添加GSH和HA,以添加GSH 5 mmol·L1和HA 900 μg·mL-1组效果较好,且其各指标与未添加GSH和HA组均存在显着差异（P<0.05）。说明,冷冻液中联合添加GSH 5 mmol·L-1和HA 900 μg·mL-1可有效改善猪精液冷冻效果。二、超低温冷冻对姜曲海猪精液酶活性的影响为了阐明姜曲海猪精液超低温冷冻-解冻后酶活性的变化,检测了新鲜和冷冻保存精液中抗氧化酶、功能性酶和代谢性酶的活性。结果表明,与新鲜精液相比,冷冻-解冻精液除GR活性显着升高外（P<0.05）,其他酶活性均显着降低（P<0.05）。说明,超低温冷冻保存破坏了姜曲海猪精子酶系统,导致多数酶活性降低是影响其冷冻效果的原因之。三、超低温冷冻对姜曲海猪精液超微结构的影响本试验旨在研究姜曲海猪精子超低温保存前后的超微结构变化。扫描电镜和透射电镜观察结果表明,姜曲海猪精子全长约54.4 μm,由头、颈、体和尾4部分组成;形态结构正常的精子,表现为质膜、顶体和线粒体结构完整,顶体光滑,线粒体排列整齐,核染色质均匀;冻后精子表现为不同程度的损伤,主要为颈部断裂、膨胀,顶体表面粗糙或顶体缺失,质膜膨胀或缺失,线粒体移位。表明,超低温保存造成姜曲海猪精子超微结构的损伤主要集中于质膜、顶体和线粒体。四、姜曲海猪精液超低温保存前后差异蛋白质组学研究以冻融前后姜曲海猪精子为研究对象,采用双向电泳技术（Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）分离获得表达不同的蛋白点,利用MALDITof/Tof质谱鉴定技术分析相关差异蛋白,并利用blast2go软件对差异蛋白质进行GO（gene ontology）功能注释。经蛋白图谱比较分析和质谱鉴定发现,冻融前后精子差异的蛋白点为42个,主要参与结合、催化活性、结构分子活性、分子功能调节、抗氧化活性、核酸结合转录因子和转运活性等7个生物学功能。结合GO分析和KEGG数据库进行蛋白信号通路分析,分析获得有意义差异蛋白15个,其中差异酶蛋白5种:类组氨酸磷酸酶14、烯醇酶、二氢硫辛酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和β-5型-蛋白酶体亚基,均表现下调;与受精相关的差异蛋白6种,分别为顶体结合蛋白、糖结合蛋白AQN-1前体、电压依赖阴离子选择通道蛋白2、类锌指蛋白420、乳凝集素前体、磷脂酰乙醇胺结合蛋白4,除糖结合蛋白AQN-1前体外,其余均表现下调;与细胞骨架相关的差异蛋白4个,分别为肌动蛋白成帽蛋白β亚基变异体Ⅱ、类胞质动力蛋白2重链1、β微管蛋白、外致密纤维蛋白2,除肌动蛋白成帽蛋白β亚基变异体Ⅱ外,也均表现下调。表明冻融影响姜曲海猪精子能量代谢、细胞骨架、受精和抗氧化能力,为进一步研究猪精子蛋白质组学及揭示精子冷冻损伤机制提供了依据。但差异蛋白质对精子功能和受精胚胎发育的影响还有待深入研究。五、冷冻姜曲海猪精液的人工授精应用为研究自制冷冻姜曲海猪精液的保存效果,采用常规输精和子宫内输精进行人工授精。结果表明,新鲜精液人工授精效果显着高于冷冻-解冻精液人工授精效果（P<0.05）。新鲜精液采用常规输精和子宫内输精,二者在受胎率、分娩率和窝均产仔数方面无显着差异（P>0.05）。冷冻-解冻精液采用常规输精和子宫内输精,二者受胎率和分娩率具有统计学差异（P<0.05）,但窝均产仔数差异不显着（P>0.05）。
二、人精子透明质酸酶活性测定的临床意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人精子透明质酸酶活性测定的临床意义（论文提纲范文）
（1）多聚嘧啶束结合蛋白1对小鼠血睾屏障完整性和支持细胞自噬的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 支持细胞在血睾屏障中的作用机制的发展研究 |
| 参考文献 |
| 作者简介及攻读学位期间科研成果 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（2）外源性三磷酸腺苷及透明质酸酶联合应用对弱精子症患者精子影响及弱精子症精浆中AMPK表达研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 第一部分:外源性三磷酸腺苷及透明质酸酶联合应用对弱精子症患者精子影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 一般资料和分组 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 实验试剂及器材 |
| 1.3.2 精液标本收集 |
| 1.3.3 精液常规检查 |
| 1.3.4 外源性添加ATP及透明质酸酶 |
| 1.3.5 透射电镜制片步骤 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 弱精子症患者于正常精液年龄、精液浓度、PR、PR+NP对比 |
| 2.2 精子前向运动(PR) |
| 2.3 精子总活力水平(PR+NP) |
| 2.4 透射电子显微镜下观察 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分:弱精子症精浆中 AMP 依赖的蛋白激酶(AMPK)含量表达 |
| 前言 |
| 1 临床资料及方法 |
| 1.1 一般资料和分组 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 实验试剂及器材 |
| 1.3.2 精液标本收集 |
| 1.3.3 精液常规检查 |
| 1.3.4 精浆AMPK浓度的检查 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 弱精子症的诊疗新进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及获得的科研成果 |
（3）秦岭大熊猫精液超低温冷冻保存技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 大熊猫精液冷冻保存及其研究进展 |
| 1.1 雄性大熊猫发情特点 |
| 1.2 大熊猫精液采集 |
| 1.3 大熊猫精液品质检测 |
| 1.4 大熊猫精液冷冻方法 |
| 1.5 大熊猫精液解冻 |
| 1.6 大熊猫精液冷冻保护稀释液的研究 |
| 1.6.1 大熊猫精液稀释液 |
| 1.6.2 大熊猫精液冷冻保护剂 |
| 1.7 本研究的目的意义 |
| 试验研究 |
| 第二章 秦岭大熊猫精浆指标对精液品质的影响 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验样品 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 精液的采集与处理 |
| 2.2.2 精子活率检测 |
| 2.2.3 质膜完整性检测 |
| 2.2.4 顶体完整性检测 |
| 2.2.5 精浆指标测定 |
| 2.2.6 统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 秦岭大熊猫精液品质的检测 |
| 2.3.2 秦岭大熊猫精浆指标检测 |
| 2.3.3 秦岭大熊猫精浆指标与精液品质相关性分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 超低温冷冻对大熊猫精子超微结构的影响 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 主要仪器 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 精液的采集 |
| 3.2.2 大熊猫精液冷冻程序 |
| 3.2.3 样本制备 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 抗氧化剂对秦岭大熊猫精液冷冻保存效果的研究 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 试验样品 |
| 4.1.2 主要仪器 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 精液的采集与处理 |
| 4.2.2 大熊猫精液冷冻程序与试验分组 |
| 4.2.3 精液品质检测 |
| 4.2.4 线粒体活性检测 |
| 4.2.5 DNA完整性检测 |
| 4.2.6 ROS、MDA、SOD和 GSH-Px含量测定 |
| 4.2.7 HAase和 ACE含量测定 |
| 4.2.8 统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 抗氧化剂组与对照组精子活率、活力的比较 |
| 4.3.2 抗氧化剂组与对照组质膜完整性、顶体完整性的比较 |
| 4.3.3 抗氧化剂组与对照组线粒体活性和DNA完整性的比较 |
| 4.3.4 抗氧化指标ROS、MDA、SOD、GSH-Px的比较 |
| 4.3.5 抗氧化剂组与对照组HAase和 ACE的比较 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）精子顶体酶活性及IUI/IVF/ICSI受精方式对妊娠结局影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| (一)前言 |
| (二)对象与方法 |
| 1.研究对象 |
| 1.1 纳入标准 |
| 1.2 排除标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 精液的采集与检测 |
| 2.2 促排卵及取卵 |
| 2.3 IUI/IVF/ICSI的受精过程 |
| 2.4 胚胎移植过程 |
| 2.5 研究对象的分组 |
| 2.6 妊娠结局的判断标准 |
| 2.7 计算方法 |
| 3.统计学分析 |
| (三)研究结果 |
| 1.SAA与男性一般临床数据及精液常规参数间的相关性 |
| 2.在 IUI周期中,SAA对妊娠结局的影响 |
| 3.在 IVF周期中,SAA对妊娠结局的影响 |
| 4.在 ICSI周期中,SAA对各妊娠结局的影响 |
| 5.当SAA≥64.9μIU/106精子,受精方式对妊娠结局的影响 |
| (四)讨论 |
| (五)研究结论 |
| 参考文献 |
| 综述 精子顶体酶活性的影响因素及治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 缩略词表 |
| 致谢 |
（5）生精散联合电针对少、弱精子症患者精子顶体酶活性与精子P34H表达的影响（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 临床研究 |
| 一、研究对象 |
| (一)病例来源 |
| (二)诊断标准 |
| (三)病例选择标准 |
| 二、研究方法 |
| (一)病例分组 |
| (二)治疗方法 |
| 三、观察指标 |
| (一)中医证候积分 |
| (二)精液分析 |
| (三)精子顶体酶活性检测 |
| (四)精子P34H表达检测 |
| 四、实验方法 |
| (一)实验用材 |
| (二)操作步骤 |
| 五、统计学处理 |
| 第二部分 实验结果 |
| 一、一般情况比较(剔除脱落标本后) |
| 二、治疗前后中医证候积分比较 |
| 三、治疗前后精子活力、浓度比较 |
| 四、治疗前后精子顶体酶活性比较 |
| 五、精子顶体酶活性与PR比例、精子浓度相关性分析 |
| 六、治疗前后精子P34H表达比较 |
| 七、安全性评价 |
| 第三部分 讨论 |
| 一、临床观察 |
| (一)中医对少、弱精子症的认识 |
| (二)生精散方解 |
| (三)电针穴位分析 |
| 二、机制探讨 |
| (一)精子顶体酶与男性精子质量 |
| (二)精子P34H蛋白与男性精子质量 |
| (三)生精散联合电针作用机制 |
| 三、临床疗效分析 |
| (一)生精散联合电针对少、弱精子症患者中医证候积分的改善 |
| (二)生精散联合电针对少、弱精子症患者精子活力、浓度的影响 |
| (三)生精散联合电针对少、弱精子症患者精子顶体酶活性的影响 |
| (四)生精散联合电针对少、弱精子症患者精子P34H表达的影响 |
| (五)机制探讨 |
| 四、研究创新、不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 精子表面蛋白P34H与男性精子质量关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 发表论文 |
（6）人精液内蛋白激酶A、精子透明质酸酶与男性不育关系的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 标本收集。 |
| 1.3.2 酶联免疫吸附测试（定量）人精液PKA含量。 |
| 1.3.3 改良透明质酸钠—明胶底物膜法测HYD阳性率。 |
| 1.4 观察指标 |
| 1.5统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组HYD阳性率 |
| 2.2 各组中PKA含量与HYD阳性率 |
| 2.3 精子PKA含量与HYD阳性率的相关性分析 |
| 3 讨论 |
（8）透明质酸酶的研究进展（论文提纲范文）
| 1 透明质酸酶的分类 |
| 1.1 动物睾丸透明质酸酶 |
| 1.2 人工重组透明质酸酶 |
| 1.3 微生物透明质酸酶 |
| 2 透明质酸酶的临床应用 |
| 2.1 促进其他注射药物吸收和分布 |
| 2.2 麻醉辅助剂 |
| 2.3 眼科方面的应用 |
| 2.4 医学整形美容并发症中的应用 |
| 2.5 其他应用 |
| 3 透明质酸酶的不良反应 |
| 4 展望 |
（9）冷冻处理对牛、绵羊、山羊精子形态及受精能力的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.精子冷冻技术研究进展 |
| 1.1 动物精子保存的技术和意义 |
| 1.2 牛羊精子冷冻保存研究进展 |
| 1.3 精液冷冻保存的原理 |
| 1.4 精液低温保存技术存在的问题 |
| 2.冷冻保存对精子损伤研究进展 |
| 2.1 冷冻保存对精子活力的影响 |
| 2.2 冷冻保存对精子顶体的影响 |
| 2.3 冷冻保存对精子顶体酶活性的影响 |
| 2.3.1 冷冻保存对精子透明质酸酶活性的影响 |
| 2.3.2 冷冻保存对精子顶体蛋白酶活性的影响 |
| 2.4 冷冻保存对精子受精能力的影响 |
| 第二章 研究内容 |
| 前言 |
| 1.冷冻保存处理对牛、绵羊、山羊精子形态变化的影响 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 样品来源 |
| 1.1.2 主要仪器设备 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 试剂配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 精液采集 |
| 1.2.2 冷冻精液的制备及解冻 |
| 1.2.3 顶体完整率检测 |
| 1.2.4 精子超微结构检测 |
| 1.3 统计分析 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.4.1 冷冻保存处理对精子顶体完整率的影响 |
| 1.4.2 冷冻保存处理对精子超微结构的影响 |
| 1.5 讨论 |
| 1.5.1 冷冻保存处理对精子顶体完整率的影响 |
| 1.5.2 冷冻保存处理对精子超微结构的影响 |
| 1.6 小结 |
| 2.冷冻保存处理对牛、绵羊、山羊精子受精能力指标变化的影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 样品来源 |
| 2.1.2 主要仪器设备 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 精液采集 |
| 2.2.2 冷冻精液的制备及解冻 |
| 2.2.3 精子活力检测 |
| 2.2.4 精子透明质酸酶(HYD)测定 |
| 2.2.5 精子顶体蛋白酶活性(ACE)测定 |
| 2.3 统计分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 冷冻保存处理对精子活力变化的影响 |
| 2.4.2 冷冻保存处理对精子透明质酸酶活性变化的影响 |
| 2.4.3 冷冻保存处理对精子顶体蛋白酶活性变化的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 冷冻保存处理对精子活力变化的影响 |
| 2.5.2 冷冻保存处理对精子酶活性变化的影响 |
| 2.6 小结 |
| 3.冷冻保存处理对牛、绵羊、山羊精子受精能力的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 样品来源 |
| 3.1.2 主要仪器设备 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.1.4 试剂配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 精液采集 |
| 3.2.2 冷冻精液的制备及解冻 |
| 3.2.3 体外受精 |
| 3.3 统计分析 |
| 3.4 结果 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）姜曲海猪精液超低温保存参数优化及应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号及缩略语 |
| 前言 |
| 第一部分 文献综述 |
| 第一章 哺乳动物精液冷冻保存研究进展 |
| 1 精液冷冻保存原理 |
| 2 冷冻保存对精子细胞的损伤 |
| 3 冷冻保护剂的保护作用 |
| 4 精液冷冻保存方法 |
| 5 精液品质的评定方法 |
| 6 猪精液冷冻保存的研究进展 |
| 7 问题与展望 |
| 第二章 蛋白质组学在精液保存中的应用研究 |
| 1 蛋白质组学技术体系 |
| 2 蛋白质组学技术在精液保存中的研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分 试验研究 |
| 第三章 超低温冷冻对姜曲海猪精液品质的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 超低温冷冻对姜曲海猪精液酶活性的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 超低温冷冻对姜曲海猪精子超微结构的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 姜曲海猪精液超低温保存前后差异蛋白质组学研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第七章 冷冻姜曲海猪精液的人工授精应用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 附图及说明 |
| 致谢 |
四、人精子透明质酸酶活性测定的临床意义（论文参考文献）
- [1]多聚嘧啶束结合蛋白1对小鼠血睾屏障完整性和支持细胞自噬的影响[D]. 杨喆. 贵州医科大学, 2021(02)
- [2]外源性三磷酸腺苷及透明质酸酶联合应用对弱精子症患者精子影响及弱精子症精浆中AMPK表达研究[D]. 李镇杰. 右江民族医学院, 2021(01)
- [3]秦岭大熊猫精液超低温冷冻保存技术研究[D]. 董贺孟. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [4]精子顶体酶活性及IUI/IVF/ICSI受精方式对妊娠结局影响的研究[D]. 曹雨晴. 大连医科大学, 2021(01)
- [5]生精散联合电针对少、弱精子症患者精子顶体酶活性与精子P34H表达的影响[D]. 潘程程. 山东中医药大学, 2020(01)
- [6]人精液内蛋白激酶A、精子透明质酸酶与男性不育关系的研究[J]. 戴研平,高晓勤,倪佳. 甘肃医药, 2020(06)
- [7]精子表面蛋白P34H与男性精子质量关系的研究进展[J]. 潘程程,李静,梁琦,赵梦璐,崔薇. 中国优生与遗传杂志, 2019(08)
- [8]透明质酸酶的研究进展[J]. 李漫,刘建建,苏江伟,张燕,杨莹莹,吴万福,郭学平. 食品与药品, 2019(04)
- [9]冷冻处理对牛、绵羊、山羊精子形态及受精能力的影响[D]. 姜珊. 内蒙古大学, 2019(09)
- [10]姜曲海猪精液超低温保存参数优化及应用研究[D]. 刘莉. 扬州大学, 2018(05)